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        原核表达胶图

        相关实验:🔥 蛋白质的原核表达

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        纳米抗体养驼人

        表达系统的选择:选择表达系统主要考虑蛋白质的大小、需要蛋白质的量、蛋白质来源的物种,以及蛋白质是否有二硫键和翻译后修饰。如果只需要少量目标蛋白——如当筛选一系列点突变用于酶活性研究时,不需要优化生产条件。但是,如果必须纯化一个活性蛋白和/或需要大量蛋白质时,在发现一个大规模可用方法前就需要尝试不同的宿主-载体系统、表达条件和/或纯化方案。图片描述图片描述

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        3 个回答

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        晓雨知春来

        有帮助

        如果量少的话可以直接选择大肠杆菌表达系统。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        主要看蛋白的种类和大小,如果只需要少量目的蛋白可以延续之前的生产条件,较小的蛋白质建议直接选择大肠杆菌表达系统,成功率高

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        loveliufudan

        有帮助

        以下是一些进一步的指导和建议:

        1. 蛋白质大小:对于较小的蛋白质,如小于30 kDa,常规的大肠杆菌表达系统(如E. coli BL21)通常是一个不错的选择。对于较大的蛋白质,如膜蛋白或复杂的多亚基蛋白质,可能需要考虑其他表达系统,如哺乳动物细胞表达系统。

        2. 蛋白质需求量:如果只需要少量的目标蛋白质,如用于点突变筛选等研究,可以选择简单的表达系统,如原核表达系统(如大肠杆菌)或酵母表达系统。这些系统通常具有较低的成本和操作简便性。

        3. 蛋白质来源的物种:如果你的目标蛋白质来自哺乳动物或其他特定物种,可以考虑使用相应物种的细胞表达系统,如CHO细胞或HEK293细胞。这些系统可以更好地保留和产生复杂的翻译后修饰。

        4. 二硫键:对于含有二硫键的蛋白质,如多肽激素或一些酶类,原核表达系统可能不适用,因为它们无法提供适当的氧化环境。在这种情况下,可以考虑使用酵母表达系统或昆虫细胞表达系统。

        5. 纯化需求:如果你需要纯化活性蛋白质或大量蛋白质,那么表达系统的选择将更为重要。哺乳动物细胞表达系统通常能够提供更高水平的蛋白质表达,并且更适合于复杂的蛋白质纯化过程。此外,一些特殊的表达系统,如昆虫细胞或大肠杆菌的包涵体表达系统,也可以用于高表达和纯化目的。


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