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科研学霸天团,48小时有问必答
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提取血清中microRNA及后续实验
loveliufudan
1. 对于血清中的microRNA的提取,专用的microRNA提取试剂盒和TRIZOL方法都是可以的。试剂盒通常更加方便,而且更容易获得高质量的RNA,尤其是对于microRNA这种较小的RNA分子。然而,TRIZOL方法也可以有效提取RNA,包括microRNA,只是可能需要更多的优化。具体选择哪种方法,取决于你的实验室条件和预算。 2. 通常情况下,对microRNA的逆转录是需要使用特定
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问
为什么核酸的纯度是以OD260/OD280的比值作为检测标准?有没有其他的检测标准呢
loveliufudan
这是因为核酸在260nm处的吸光度最大,而蛋白质则在280nm处吸光度最大。因此,OD260/OD280的比值可以用来估计样品中核酸和蛋白质的相对含量,从而评估核酸的纯度。理想情况下,DNA的OD260/OD280比值应接近1.8,而RNA的比值应接近2.0。如果比值低于这些数值,通常表示样品中蛋白质的含量较高,即核酸的纯度较低。除此之外,还有其他的一些方法可以用来评估核酸的纯度和质量,比如凝胶电
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问
miRNA的靶向调控效率?求助!急!
是TTT
取靶向前后荧光的比值,或者靶向前后wb灰度值的比值,都要在0.5以下
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问
circRNA分析
huarenqiang5
可以在national center for biotechnology information 网站进行查询。
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问
真菌污染
sswei
从镜下看明显是受到真菌污染了。
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问
求助|茜素红染色怎样诱导细胞到21天?
skyye
我养的BMSC也碰到过类似情况。这种情况可以提前用多聚赖氨酸或明胶包被孔板,然后再种板。另外换液时尽量轻打在侧壁上,避免直接影响了底部细胞
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问
贴壁细胞RNA提取
谦谦千千
建议不用胰酶,因为它会对该实验有影响,直接加入trizol裂解数分钟用细胞刮刀刮下进行后续实验
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问
RNA提取为什么DNA和蛋白质在中间层和下层即有机相,而RNA在水相
loveliufudan
在常规的RNA提取过程中,细胞或组织样品首先被裂解,细胞膜和核膜被破坏,释放出细胞内的各种分子。随后,加入酚酸混合物(例如酚/氯仿),形成两个相,其中有机相和水相。这种分离主要是由于酚酸混合物的化学特性和密度差异所致。酚酸混合物中的酚主要与蛋白质相互作用,形成酚蛋白复合物,使蛋白质沉淀到有机相中。另一方面,RNA与水相中的水结合,形成水相中的RNA溶液。DNA和RNA的相互作用性质不同,导致它们在
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问
提取烟草叶片RNA拖带是为什么
loveliufudan
烟草叶片RNA提取中出现拖带和胶图弥散的问题可能有几个可能的原因: 1. RNA降解:RNA在提取和处理过程中容易受到核酸酶的降解。如果样品处理不当、时间过长或者未能避免核酸酶的存在,可能导致RNA的降解,从而出现拖带和胶图弥散的现象。 2. 污染物:可能存在其他核酸、蛋白质或化学物质的污染,这些污染物可能影响RNA在凝胶电泳中的迁移,导致拖带和胶图弥散。在提取RNA的过程中,注意使用无RNase
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问
miRNA转染
sswei
24孔细胞转染实验的终浓度建议采用50-100nM
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问
求助 id8细胞质里的黑点是什么
huarenqiang5
考虑可能是支原体或黑胶虫污染了,建议及时处理。
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问
沙利度胺溶解问题
dxyc42u
沙利度胺溶解后用超声振荡不容易析出
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coip细胞裂解液求助
loveliufudan
进行膜蛋白的共免疫沉淀(Co-IP)实验时,选择合适的裂解液配方是非常重要的。裂解液的成分应该能够充分裂解细胞膜,并保持目标蛋白质的稳定性和功能。以下是一种常用的裂解液配方,供参考: 1. 缓冲液:选择适当的缓冲液,如磷酸盐缓冲液(PBS)或甘氨酸盐缓冲液(Tris-Glycine),pH值根据实验需求选择合适的范围。 2. 蛋白酶抑制剂:添加蛋白酶抑制剂,如苯甲砜(PMSF)、氨基甲酸甲酯(AM
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lncRNA过表达
dxyc42u
可以参考某些文章中敲低某个基因的剂量做预实验
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问
RTqPCR,microRNA
dxyc42u
肯定是相同质量,如果是体积一样的话,样本间本身就有差异无法比较
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问
请问circRNA的convergent引物怎么设计啊
沉沦6RZH
https://www.sohu.com/a/215186821_802014
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问
请问体外转录后的RNA有两条带怎么办
dxyc42u
杂带有可能是引物二聚体导致的,重新设计引物
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求助|RNA琼脂糖凝胶电泳的RNA Marker 老是跑不好是为啥啊
dxyc42u
可以增大电泳时的电压试一试看。
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问
如果用流感病毒假病毒感染巨噬细胞,能引起细胞因子的分泌吗?
土井挞克树
可以的,假病毒也是可以引起细胞因子分泌的
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问
冈田酸如何溶解能让DMSO<0.1%并且不析出?
土井挞克树
把dmso稀释后润洗就可以不析出了。
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