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        RTqPCR,microRNA

        相关实验:RNA 干扰技术

        user-title

        小朋友abc

        想对三种不同细胞中microRNA141的绝对定量,求问逆转录的时候是应该保证总RNA质量相同还是体积相同呀??(三种细胞的总RNA浓度不一样),按照相同质量做了几次,表达都没有差异(看文献中是有差异的)

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        3 个回答

        user-title

        dxyc42u

        有帮助

        肯定是相同质量,如果是体积一样的话,样本间本身就有差异无法比较

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        在进行不同细胞中microRNA-141的绝对定量时,保证反转录的RNA量相同是更为重要的因素,而不是总RNA的质量。因为您的目标是比较不同细胞中microRNA-141的表达水平,确保相同的RNA量可以更准确地比较它们之间的差异。

        如果总RNA浓度不同,您可以根据浓度调整不同细胞中的RNA体积,以保持相同的RNA量。例如,如果一个细胞的总RNA浓度较高,您可以使用较少的体积,而如果另一个细胞的总RNA浓度较低,则需要使用较大的体积。这样,您可以在相同的RNA量下进行反转录反应,以确保可比性和准确性。

        需要注意的是,确保RNA反转录反应条件的一致性和准确性也是非常重要的。使用相同的反转录试剂、反应时间和温度,以及其他相关反应条件,可以帮助您获得可靠和准确的结果。

        此外,如果您之前按照相同的质量进行了多次实验,但没有观察到差异,可能有其他因素影响了结果。您可以仔细检查实验步骤和条件是否一致,并评估其他实验变量(如引物、PCR条件等)是否正确。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        当然是保持质量相同的,浓度不同保持体积相同没意义,

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