谦谦千千
建议不用胰酶,因为它会对该实验有影响,直接加入trizol裂解数分钟用细胞刮刀刮下进行后续实验
sswei
在6孔板内养的细胞,处理时间到了以后,直接弃上清,用PBS洗2~3遍,把PBS弃净后直接加0.5~1.0mlTRIZol,裂解4~5min后将其移入无RNA酶的EP管中,-80度保存。
huarenqiang5
贴壁细胞rna提取建议用后者比较好。
skyye
个人经验是,不需要消化离心,毕竟胰酶也可能对细胞产生一定的影响。弃上清,用PBS清洗2-3次后,直接加Trizol裂解,静置5min左右后就可以收集到EP管了。多说一句,六孔板的话每个孔加500微升就可。另外全程注意无酶操作,使用的枪头和EP管都需要无酶的
土井挞克树
直接将trizol放到细胞内刮下来就可以
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