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        贴壁细胞RNA提取

        相关实验:用T4 RNA 连接酶连接 RNA 分子

        user-title

        楠楠UL6G

        请问贴壁细胞RNA的提取,是先将细胞消化下来离心比较好。还是直接将trizol加入到细胞里用刮刀刮下来呢?

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        5 个回答

        user-title

        谦谦千千

        有帮助

        建议不用胰酶,因为它会对该实验有影响,直接加入trizol裂解数分钟用细胞刮刀刮下进行后续实验

        user-title

        sswei

        有帮助

        在6孔板内养的细胞,处理时间到了以后,直接弃上清,用PBS洗2~3遍,把PBS弃净后直接加0.5~1.0mlTRIZol,裂解4~5min后将其移入无RNA酶的EP管中,-80度保存。

        user-title

        huarenqiang5

        有帮助

        贴壁细胞rna提取建议用后者比较好。

        user-title

        skyye

        有帮助

        个人经验是,不需要消化离心,毕竟胰酶也可能对细胞产生一定的影响。弃上清,用PBS清洗2-3次后,直接加Trizol裂解,静置5min左右后就可以收集到EP管了。多说一句,六孔板的话每个孔加500微升就可。另外全程注意无酶操作,使用的枪头和EP管都需要无酶的

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        直接将trizol放到细胞内刮下来就可以

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