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        载体构建时遇到了问题

        相关实验：巢式 PCR

        user-title

        哇哈哈哈321

        切胶回收的pcr产物大概1.2kb连不上载体，测序显示引物连到了载体上，请问给位大神怎么回事

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        3 个回答

        user-title

        汤姆卜丽波

        有帮助

        这应该是酶切位点不太对，没有在产物头尾，在产物中间

        user-title

        dxy_g9y5gije

        有帮助

        这个情况有些离谱，按理不会出现这种情况。我觉得最有可能是你里面存在其他的酶将目的片段切断了。你看看目的片段里面有没有酶切位点

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        你是同源重组到载体上，还是酶切后连接到载体上？感觉你采用的是酶切连接，一般这种情况，会考虑是不是酶切的配比和时间有问题。条带被切碎了

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