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        做实验练练手,结果有点出人意料

        相关实验:用 GST 融合蛋白检测蛋白质-蛋白质相互作用实验

        user-title

        何以杜康

        一个蛋白样品,上4个孔,上样量分别是5,6.5,8,5。第一张图是目的蛋白P62,趋势与上样量相同,第二张图是内参,上样量最小的两个孔,颜色却最深,跑了两次都是这种结果😭😭,请问这种情况可能是什么原因。图片描述图片描述

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        2 个回答

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        这种结果可能有以下几种可能的原因:

        过量染色:在染色过程中,过量的染料会与蛋白质结合,导致颜色过深。如果您在染色过程中使用了过多的染料,那么即使内参蛋白质的上样量最小,它仍然可能出现深色带。

        实验条件不一致:在进行蛋白质电泳实验时,很多因素都会影响结果,如电泳时间、电压、缓冲液pH值等。如果这些实验条件在不同的实验中存在差异,那么结果也会有所不同。

        仪器问题:蛋白质电泳实验需要使用一些特殊的仪器,如电泳仪、转印仪等。如果这些仪器存在故障或者不稳定,那么可能会影响实验结果,导致内参蛋白质的颜色异常。

        蛋白质质量问题:内参蛋白质需要具备稳定的表达量和相对均一的分子量,以确保它在不同样品中的表达量相对稳定。如果您选择的内参蛋白质质量存在问题,如表达量不稳定、分子量发生变化等,那么它在实验中的表现可能就会异常,导致您观察到的结果不符合预期。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        考虑目标体系中存在降解或污染,先排查污染

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