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        用cDNA扩增一个基因,总是扩增出带有内含子的片段 ,怎么办

        相关实验:痘苗 DNA 检测实验

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        未来9

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        3 个回答

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        丁香清香

        有帮助

        1. 任何一个时刻,提取的RNA里有尚未完全加工成熟的mRNA.
        2. 不管是否去除gDNA污染,都无法改变事实。只有靠marker去寻找正确长度的片段克隆,才能有可能得到不含内含子的基因片段。
        3. 注意灯下黑,如果测序引物位点离正向引物太短,正向引物可能不完整或有模糊碱基。

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        Guoood

        有帮助

        可能引物不特异,建议重新设计引物试试

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        天一湖医者

        有帮助

        可能这个基因的某一个亚型就是带有这个内含子片段。换句话说,在某种细胞中可能这个内含子不被识别出来,存在一个带有它的剪切拼接亚型。如果一定要p出来和数据库一样的序列,要么就换个细胞要么就基因合成,现在基因合成也不算贵。

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