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常见蛋白质数据库NCBInr(National Center for Biotechnology Information，美国国立生物技术信息中心. ) 全球最有影响的生物学网站之一。提供综合的、混合数据库（非单一，non-identical）的蛋白和核酸数据库。包括GenBank CDS 翻译库(GenBank CDS translation)、PIR、SWISS-PRO、PRF和PDB。NCBI为了避免重复，花费了很大精力为这些数据库里的序列提供了相 ...

经过N年的非人的生活，俺终于毕业了，硕士，博士，真的是一种煎熬。但是当一切结束，回头看的时候才发现一切的辛苦化为乌有，只有那一本博士毕业论文给一点慰藉。就象死后重生内心再难起波澜。在这里我作一个小小的总结，以便让大家在读医学研究生生涯中能借鉴。一、.首先心态要积极，我就是心态比较消极，结果过的几年越来越觉得辛苦，到最后都快崩溃了。作科研本身就是一个充满困难，挑战困难的过程，在这里不要害怕失败，不要畏缩不前，从心理上不 ...

花了些时间把关于原核表达方面的帖子整理一下，如有重复在所难免，希望大家原谅，也希望能够给大家有所帮助！！～～1. 原核表达？？？？http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/1576298_1.html2. 急急--- 原核表达http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/1699575_1.html3. 原核表达http://www.dxy.cn/bbs/actions/arc ...

多肽物质分离与分析方法研究进展　　摘　要　综述了近几年来多肽类物质的提取分离与分析方法，主要包括高效液相色谱法、电泳、质谱及核磁共振等方法在肽类物质研究中的最新应用进展。　　关键词　多肽，分离，分析，进展　　多肽类化合物广泛存在于自然界中，其中对具有一定生物学活性的多肽的研究，一直是药物开发的一个主要方向。生物体内已知的活性多肽主要是从内分泌腺组织器官、分泌细胞和体液中产生或获得的，生命活动中的细胞分化、神经激素递质调节、肿瘤病变、免疫调节 ...

Western的原理几乎所有蛋白质电泳分析都在聚丙烯酰胺凝胶上进行，而所用条件总要确保蛋白质解离成单个多肽亚基并尽可能减少其相互间的聚集。最常用的方法是将强阴离子去污剂SDS与某一还原剂并用，并通过加热使蛋白质解离后再加样于电泳凝胶上。变性的多肽与SDS结合并因此而带负电荷，由于多肽结合SDS的量几乎总是与多肽的分子量成正比而与其序列无关，因此SDS多肽复合物在聚丙烯酰凝胶电泳中的迁移只与多肽的大小相关 ...

一.液体蛋白芯片指纹图谱系统液体蛋白芯片指纹图谱系统以MALDI TOF/TOF质谱系统为基础，把样品分离、质谱分析和生物信息学相结合，克服了2D电泳的缺点，为差异蛋白的发现提供了新的途径。与普通蛋白质组学不同的是，临床蛋白组学研究的主要目标是寻找疾病相关的蛋白标志物。该方案简单、重复性强、通量高，分离低丰度蛋白效果尤其显著，充分适应临床蛋白质组学研究的要求。 血清（人、小鼠）、细胞裂解液、尿液、组织等； 肿瘤 呼吸疾病 乳腺癌 卵巢癌 呼吸衰竭 ...

一、抗血清的制备　　有了质量好的抗原，还必须选择适当的免疫途径，才能产生质量好（特异性强和效价高）的抗体。　　（一）用于免疫的动物　　作免疫用的动物有哺乳类和禽类，主要为羊、马、家兔、猴、猪、豚鼠、鸡等，实验室常用者为家兔、山羊和豚鼠等。动物种类的选择主要根据抗原的生物学特性和所要获得抗血清数量，如一般制备抗r-免疫球蛋白抗血清，多用家兔和山羊，因动物反应良好，而且能够提供足够数量的血清，用于免疫的动物应适龄，健壮，无感染性疾患，最好为/// ...

分享我刚找到的有关RNAi的资料，现附目录如下，希望对战友们有用，如果您觉得不错，烦劳顶一下，呵呵（共42个分卷压缩包）=========================================2002年世界十大科学成就之首.caj2006年生命科学的十大新闻.txtH1启动子siRNA载体的构建及应用.kdhmicRNA和siRNA基因调控技术研究进展.cajmiRNARNAi和siRNA.cajRNAi_DNA稳定表达载体的构建与应用.k ...

记得在有一集《生活大爆炸》中，那些智商超高的科学怪才们又在捣鼓开发一款iPhone程序，想通过直接拍照来解微积分。不记得这款程序最终开发出来没有，但iPhone和iPad这些潮物在科学家中的普及肯定是毋庸置疑了。因此，也就涌现出一大批应用程序来帮助大家搞研究。下面就介绍两款蛋白方面的应用程序。随着科学家逐渐解析出更多蛋白的结构，并将这些结构添加到数据库中，目前的蛋白结构数正在快速增长。过去，如果想要查看某个蛋白 ...

打算先尝试大家都赞的原核表达系统（操作简单才是上策，反正偶不打算把残存的青春继续贡献在充满毒物的环境中了），以及目前广泛应用的大名鼎鼎的Novogen公司的pET系列。经历了一次低级错误后，在实验时最可以信赖的范博士的帮助下，终于将引物定稿。感谢英骏公司总部在进行机器调试，才让我有机会改正两天前的错误，虽然不是我毕业用的实验。入正题。设计表达载体用的引物与克隆基因用的引物是两种完全不同的思路，后者需要考虑很多 ...

Western Blot为什么必须要用内参?要检测一个基因的表达产物是否正确，或者比较表达产物量的相对变化，首选方法是Western Blot。因为Western Blot操作相对简单方便，既可以定性分析表达产物，同时还可以指示目的蛋白量的相对变化。虽然，顺利的时候Western Blot做起来很简单，可不顺的时候也很令人心烦――做不出结果啦、假阳性啦、结果出现多条带啦、到底是一抗有问题还是二抗有问题啦……毕竟，作为一种有活性的 ...

人体的各种生理反应都是由蛋白参与和调节的，而这些蛋白的表达和活性同时也受多水平，多方面的调节。这种调节既有转录水平的，也有翻译水平。既有转录后的修饰，也可以是蛋白翻译后的修饰调节。对这些蛋白的调节也有多种的形式，包括磷酸化——去磷酸化，乙酰化——去乙酰化，羧基化，甲基化，糖基化等等。这种多水平，多方面的调节构成了人体内庞大而复杂的调节体系，精确地调节了人体内的各种生理、生化反应。蛋白的乙酰化和去乙酰化是蛋白活性调节的 ...

http://www.10150.com/com/changadhere/ns_detail.php?id=15589&nowmenuid=17102&cpath=&catid=0基于ＣＢＰ标签技术的蛋白质表达与纯化系统 （用于高水平蛋白质表达和单步骤纯化）Protein Expression and Purification System是一种简单、温和、有效的方法，包括一个含有 calmodulin-binding peptide tag 钙调蛋白结 ...

以前做的很好看的条带现在怎么做也做不出来原来的效果了，所有的液体和buffer都换了，尝试了很多次，都没见改善，大家来帮忙看看问题出在哪里？1，做的好的内参：不管齐不齐，但至少条带是一根一根的，边界很清楚，没有糊，没有影子，干净，即使中间空一个泳道，也不会出现串孔的现象。2，做的好的目的蛋白：可能拍照的原因出现了很多格子，但是不影响，目的条带是两条带，同样每跟都很清晰，没有串孔，没有拖带，边缘没有发毛发糊。以上两条是同一 ...

http://www.cellbio.com/protocols.htmlMethods and ProtocolsThis section lists online resources for cell and molecular biology research protocols. Most of the web sites focus on particular research techniques.Web sites of reagent sources often supply specific protocols ...

做了两个月的时间的 western blotting 终于出了比较好的结果。老板让整理出protocol这是写的PROTOCOL大概会有很多错误请大家指正！谢谢先WESTERN PROTOCOLA.Preparation of Samples1.Get the heads of the fly2.Stir them in the lysis buffer(4heads/10ul)3.Add 2XSDS-gel-loading buffer(4heads/10ul)4.Spin at 112 ...

各位大大， 最近小妹接到老板的任务， 要对SPITC法修饰研究进行实验， 在参考了大量的文献（15篇左右）， 总结出了如下的流程， 并且进行了实验，我会把我的实验过程和结果贴出来， 希望大家能够共同分析并且提供小妹建议， 谢谢！！以下是我试验的一个protocol，希望各位前辈能指点一下，谢谢！我用BSA（国产）1mg 做样品，大致的流程是：先溶液酶解，然后C18 ZipTip固相SPITC衍生，洗脱冻干后打MALDI。具体步骤如下：（一）溶液酶解：8 M Urea 3 ...

2D Gel Electrophoresis ProtocolLysis Buffer7M Urea2M Thiourea4% CHAPSAdd fresh: 20mM Spermine20mM DTT1mM PMSFRehydration Buffer8M Urea 2% CHAPSAdd fresh:20mM DTT0.5% IPG Buffertrace amount of bromophenol blueEquilibration Buffer6M Urea 30% Glycerol 2% SDS 50mM Tris-HCl ...

Biotechniques 1998 Apr;24(4):676-8 Related Articles, LinksSDS agarose gels for analysis of proteins.Wu M, Kusukawa N.FMC BioProducts, Rockland, ME, USA.A new agarose-based protein electrophoresis gel system is described. The system consists of a highly resolving agarose, MetaPh ...

Promoter Searching - Lecture LinksLecture 1: From mRNA to Genomic Sequence - Defining the Genomic Region• RefSeq: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/RefSeq/• NEDO: http://www.kazusa.or.jp/NEDO/• NEDO home: http://www.nedo.go.jp/bio-e/index.html• Kasuza home: http://www.kazusa. ...