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baoyuanfei siRNA沉默基因时间短， 48小时后能测蛋白表达情况吗？freecell 一般24~72H内检测蛋白表达情况。baoyuanfei 嗯，看文献都是48h测蛋白，但是每个基因表达为蛋白的时间应该是不一样的，不知现在有没有好的方法测出这种时间？威斯腾 主要侧什么时间sszfbj 没问题zenghong808 一般都是48-72h检测的本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可 ...

freedegree hsa-miR-625　和hsa-miR-62undefinedhsa-mir-532-5p 和hsa-miR-532-3phsa-mir-34a 和　hsa-mir-34b　　（同源？？）hsa-let-7a-2 和　hsa-let-7a-1　　（分布不同？？）晕了，赐教啊zhujoker hsa-miR-625　和hsa-miR-62undefined这2个第一个你应该清楚吧，hsa-miR-62undefined表示和前面那个互补的miRNA，于是就用了一个号标记。hsa-mir-532-5p 和hsa ...

superman211 拟通过WB进行AP-1的相关研究，在选择一抗时遇到如下困惑，望了解的战友予以解答。关于AP-1的出c-jun的一抗有多种，其中主要分为磷酸化一抗、非磷酸化一抗两大类。每一大类又包含若干，不知如何选择，它们之间有何区别？实验目的为研究某细胞AP-1的表达情况，及其蛋白磷酸化和DNA结合活性等。superman211 自顶，望解答，谢谢！ziyunfei ampk细胞通路是通过磷酸化激活下游的，磷酸化的就是 ...

yunchenxia 我正在写硕士毕业论文，做了很多关于western检测蛋白质表达的实验，我想问一下这些试验结果是直接将图片贴到论文上还是要用软件对电泳条带进行光密度(OD)分析，然后进行统计，我看到国外的文献直接是贴图片的，国内有一些进行了统计，所以想问一下要不要统计？ 最好解释一下，谢谢。licanming 请问你如果不做统计的话怎么知道组间是有差异的？而且这些差异是否具有统计学意义？而我看的外文文献基本都有做OD， ...

yjr923 哪位师兄姐做过35S掺入法检测细胞蛋白质翻译率，请教若干问题。谢谢freecell 请教什么问题？fishbody 我的问题是，买S35-met，手续繁琐，要经过环保厅，看来能买来要过些时日了。本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

00501101 NF-kB在不同的情况下，作用不一样。NF-kB不同的功能是因为什么原因，现在有没有报道？NF-kB可以对于基因的转录是一个充分条件，还是一个必要条件？NF-kB在不同的情况下，转录的基因不同吗,机制是什么呢？有没有几个特定的功能区，分别起到不同的转录作用？不同亚基或者和不同的辅助转录因子结合，或者磷酸化的位点不同等等可能性，而引起转录的不同，导致NF-kB的功能不同？这些问题还是至今没有解决？如果上述 ...

圈子圈套 困惑很久了，请有经验 有爱心的站友帮助一下！发现关于wnt的文献中，几乎都要做报告基因检测实验，有的用TOPflash/FOPflash，有的用PGL3 ，请问两者之间区别是什么，最后检测都需要用荧光照度仪吗？如果实验室没有的话可以用别的仪器取代吗？或者说，用别的实验思路去取代这个实验一下可以吗？我的实验是想做某一抑癌基因对wnt经典通路的影响，可不可以使抑癌基因在某癌细胞中再表达后，直接检测靶基因Cyclin ...

Eudreamality http://www.curehunter.com/public/keywordSummaryC091648-human-TUFM-protein.do这个里面说TUFM别名也叫做placental isoferritin associated p43, 在NCBI的MESH里面好像也是。但文献看起来是两个完全不同的蛋白啊？在pubmed上查文章，输入TUFM，就会自动链接到什么placental isofer ...

clyztepp 请问各位高人，内源性co的定量检测方法，除了间接法，加Na2S2O4,利用分光光度计测COHb之外，最近有没有什么新的检测方法，最近试验要测co.谢谢了freecell 建议自己先看看文献吧。http://www.google.com/search?hl=en&client=firefox-a&rls=org.mozilla%3Azh-CN%3Aofficial&hs=MK6&newwindow=1&q=%E5%86%8 ...

weskerstar 请问分子生物学对突变是怎么描述的例如，对于GIST的D842V突变是什么东西，点突变？D是什么意思？842是什么意思，V是什么意思？Fasta921 D为天冬氨酸的缩写，V为缬氨酸的缩写。意思是第842位氨基酸由原来的天冬氨酸突变为缬氨酸。bioferry 突变也可以由商业化公司帮助完成。www.bioferry.cn 百福锐，专业加速您的科研项目！---请勿发表商业信息本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的 ...

sumu2006 Fura-2 AM 可以测细胞内钙离子浓度，请教各位高人，是什么机理？分离线粒体出来后，可以用这个染料测钙离子浓度吗？freecell Fura-2 AM是一种可以穿透细胞膜的荧光染料。Fura-2 AM的荧光比较弱，最大激发波长为369nm，最大发射波长为478nm，并且其荧光不会随钙离子浓度改变而改变。Fura-2 AM进入细胞后可以被细胞内的酯酶剪切形成Fura-2，从而被滞留在细胞内。Fura-2可以和钙离子结合，结 ...

raftcham 本人在做表遗传方面研究，主要是组蛋白修饰方面的，EZH2是我感兴趣的方向之一，另外是组蛋白磷酸化方面也是我关心的，不知道这里有没有同行？不知道有没有机会和大家交流文献。这里先推荐大家一篇文献题目：Polycomb protein Ezh2 regulates pancreatic beta-cell Ink4a/Arf expression and regeneration in diabetes mellitus期刊是Genes & Devel ...

westernblotx 最近看到一些研究转座子的文章，由于陆续有研究阐述转座与环境胁迫表达调控之间的关系，所以我比较感兴趣，但是对这方面知之甚少，请各位有相关经验的战友帮忙。1，请教一些相关技术。比如excision frequncy 的测定，我没有搞明白。2，按照大的分类，retrotransposon和其他DNA transposon的功能和调控机制研究有何不同？通常应该怎样研究？3， 转座活性的鉴定通常有哪些方法？4, 如何改造 ...

licanming 请问有无人将AKT用作处理因素的，即将AKT作用于细胞后检测下游分子的变化，或者有无看过相关的文献啊？怎么确定用量和作用时间？licanming 是不是没有人会这样做的？或者说这样做是行不通的？再请问大家有无AKT的激动剂，能够激活细胞内的AKT活性？wangke80 我也想了解，包括erklicanming 我看过有些文献是用转染的方法将带有激活型的AKT转到细胞内，让AKT持续高表达，但这样做比较麻烦 ...

hhyy601 如果用分子生物学对一蛋白在转录水平上是升高，在蛋白水平下降，说明什么问题？怎么解释？zjubell 1.首先证明你的实验做的没错。（你基因水平是怎么检测的，蛋白水平是怎么检测的）2.你做基因水平时，做的是全转录本的检测，还是只检测了一小部分，比如3末端。因为有一些基因会有多种转录本。3.考虑一下是否有其他修饰，如甲基化，糖基化，以及3‘，5’端的增强子之类的。我觉的问题出在1,2的可能性最大。naobeir 是单纯的 ...

zhanghaopeng 大家是按照什么浓度稀释、给药的呢？zhanghaopeng 自己顶一下吧！doctormy DAPT在体外的应用浓度从50 nM至50µM 不等，要根据细胞类型，作用时间等因素综合考虑，最重要的是参考文献，要有据可依。通常DAPT用DMSO溶解配置成10 mM的 stock solution ，溶解后保存在−70°C ，并在1个月内用完。zhanghaopeng 好的，谢谢啦！elegance_janet 请问DAPT是否可以通过血 ...

jeremyking 前几天订购了FLUO-4 AM, 因为五一放假，同事就放到4度的冰箱中了，第二天才知道这个事。不知道还能不能用，请各位指教，不然要重新定试剂了。谢谢jeremyking 自己顶一下，希望有人知道答案moxucheng 可以用，没问题本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

trick 现在大部分的文章做到PKC的活化都是通过western检测磷酸化，这个我也做过，但是不太明显，所以想从pkc转位这个角度做它的活化研究。。但是看了一些文献和综述，conventional pkc和novel pkc这样检测他们的活化都是没有问题的，但是有的综述上说atypical pkc的活化是不发生转位的，因为它相对与前2者缺乏一个佛波酯激活域，但是我也看到一些文献做atypical pkc的活化也是通过做他的 ...

vacancy 用刺激物刺激引起某个细胞因子的激活，克隆它的启动子到荧光素酶报告质粒上，实验证明有10倍以上的激活。但是用荧光定量（相对）却检测不到它RNA的表达变化。请问大家有什么调控机制参与到其中，有的话怎么验证呢？tonycat 荧光报告系统的实验是证明了该刺激物能激活该细胞因子的转录，但如果该刺激物同时会加快该细胞因子RNA降解的话，可能会出现上述情况，所以它的时间效应你要看一下summityoung 荧光素酶 ...

紫苑宝贝 总ERK在哪买？我在santa公司只看到有erk1、erk2和erk5，但没有erk啊？是不是用erk1+erk2来代替啊？2006010035 这个公司的，我用过比较可以p44/42 MAPK (Erk1/2) Antibody #9102www.cell signaling .com无名mm 我也用的cell signaling ，有结果。紫苑宝贝 谢谢两位，有多余的可转让吗？本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验 ...