• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        【求助】用实时定量PCR,还是western blot方法。

        丁香园论坛

        3528
        我的实验中要检测ATF4,ATF6的表达情况是上调还是下调,是应用western blot方法检测,还是应用实时定量PCR来检测合适,哪个更加有说服力,我想节约时间和试剂。
        谢谢各位大侠指点迷津!!
        realtime PCR
        1,western blot,实时定量PCR都是比较好的实验方法,只是一个从蛋白一个从核酸水平验证,可以同时做。实时定量PCR如果要买全进口的然后用荧光探针的话比较贵,一块板算下来可能要1000多,而且对手感要求比较高,不然复孔的值会相差比较大。Western相对粗糙一点,就是抗体要钱,还有转膜条件要摸索一下。如果要论更有说服力的话,应该是蛋白水平,因为这些转录因子都是以蛋白形式发挥作用的。
        2,ATF系列的转录因子是应激反应基因,属于ATF/CREB家族,共同特征是其参与细胞对细胞外信号的反应。所以如果LZ是要刺激以后测ATF的话,应该注意要尽量早,我们实验室是加入刺激因素后从30min开始测,1h,3h,6h,12h,24h,48h,72h,可能到后来就没有要的趋势了。而且刺激因素条件也要慢慢摸索,我们做的时候细胞很容易会飘起来,不是很好做,要多摸索处理因素。呵呵,祝好运!
        谢谢ecust小熊和zhuqueleee战友,我很受启发,准备先着手做western blot,有了结果后再跟各位交流一下。

        本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴

        师兄微信号:shixiongcoming

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序