【求助】wnt信号通路关键分子表达无法解释现象求助
丁香园论坛
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研究A药处理对经典Wnt/beta-catenin信号通路的影响，结果发现A处理以后gsk-3 beta 总蛋白量减少，磷酸化gsk-3 beta也减少，而beta-catenin总蛋白增加，磷酸化beta-catenin也增加，这该怎么解释呢？不能说明beta-catenin的增加是由于gsk-3bata的减少吧？我该怎么解释这两个分子之间的关系呢？焦急等待中！望高手指点，谢谢了！！
有没有知道呀？焦急等待中! 多谢了!!!
楼主有没有尝试一下利用gsk-3 beta 的特异性抑制剂，如CHIR-99021 (CT99021) ，TWS119 来作为阳性对照实验呢~
如果阳性对照没有出现这种情况，可能是因为你的药物可能同时作用了其他的通路或因子~
如果阳性对照没有出现这种情况，可能是因为你的药物可能同时作用了其他的通路或因子~
非常谢谢 selleckchem01的建议。如果用wnt信号通路的特异性抑制剂（抑制beta-catenin），如果发现gsk-3 beta增加是不是也说明Wnt/beta-catenin信号通路起作用，如果gsk-3 beta表达不变呢，说明什么呢？
Wnt蛋白与相应受体结合后将其激活，并抑制下游蛋白质复合物，包括axin、GSK-3、与APC蛋白。axin/GSK-3/APC 复合体可促进细胞内信号分子β-catenin的降解。当“β-catenin 降解复合物”被抑制后，胞浆内的β-catenin得以稳定存在，部分 β-catenin进入细胞核与TCF/LEF转录因子家族作用并促进特定基因的表达。
因此，用wnt信号通路的特异性抑制剂处理后，gsk-3 beta增加，β-catenin减少，说明Wnt/beta-catenin信号通路起作用；并且利用gsk-3beta的特异性抑制剂可以缓解这一现象。如果gsk-3 beta表达不变，只能说明并不影响这条通路~
因此，用wnt信号通路的特异性抑制剂处理后，gsk-3 beta增加，β-catenin减少，说明Wnt/beta-catenin信号通路起作用；并且利用gsk-3beta的特异性抑制剂可以缓解这一现象。如果gsk-3 beta表达不变，只能说明并不影响这条通路~
再次谢谢selleckchem01。还有一个疑问，用wnt信号通路的特异性抑制剂处理后，gsk-3 beta增加，p-gsk-3 beta也增加；β-catenin减少，p-β-catenin也减少，是否也可以说明Wnt/beta-catenin信号通路起作用？最近也看了一些有关这方面的内容，越看越迷糊。多谢指点！！！
zhangyinghua8106 wrote:
再次谢谢selleckchem01。还有一个疑问，用wnt信号通路的特异性抑制剂处理后，gsk-3 beta增加，p-gsk-3 beta也增加；β-catenin减少，p-β-catenin也减少，是否也可以说明Wnt/beta-catenin信号通路起作用？最近也看了一些有关这方面的内容，越看越迷糊。多谢指点！！！
如果p-gsk-3 beta增加,说明GSK-3 beta激酶活性增加，或者说GSK-3β被激活，那么β-catenin应该减少，这样理解对吧？
zhangyinghua8106 wrote:
如果p-gsk-3 beta增加,说明GSK-3 beta激酶活性增加，或者说GSK-3β被激活，那么β-catenin应该减少，这样理解对吧？
对的~
我是selleckchem中国分公司的技术支持，有关信号转导的问题，以后可以常交流~
多谢selleckchem01的解疑。但是我看到“GSK-3是PI3 kinase/Akt信号通路的关键下游蛋白，Akt可以磷酸化GSK-3α的Ser21和GSK-3β的Ser9，并抑制它们的酶活性。”这样的说法，也就是说GSK-3β的Ser9的磷酸化位点被激活后（即p-GSK-3β增加，这样理解对吧？），GSK-3β酶活性被抑制吗？如果酶活性被抑制，那么其下游的β-catenin是不是应该增加呀。感觉有点矛盾了。
又看了一些相关内容，说 GSK-3β的Ser9是没有活性的位点，GSK-3β总蛋白增加，如果p-GSK-3β（ser 9）增加，但是有活性的p-GSK-3β(tyr 216)是增加还是减少没法判断对吧？是不是还必须检测p-GSK-3β(tyr 216)。只有p-GSK-3β(tyr 216)增加了是不是才足以说明β-catenin减少是由于GSK-3β的原因。
楼主可以参看一下信号通路图：http://www.selleckbio.com/pharmacological-pi3k-akt-mtor.html
AKT对GSK-3β的磷酸化结果是抑制其活性的~因此这条通路作用的结果是抑制，不同于Wnt信号途径的作用结果~
AKT对GSK-3β的磷酸化结果是抑制其活性的~因此这条通路作用的结果是抑制，不同于Wnt信号途径的作用结果~
研究A药处理对经典Wnt/beta-catenin信号通路的影响，结果发现A处理以后gsk-3 beta 总蛋白量减少，磷酸化gsk-3 beta也减少 (总量少了,自然可以磷酸化的东西少了...)，
而beta-catenin总蛋白增加，磷酸化beta-catenin也增加 (总量多了,自然可以磷酸化的东西也多了...) ，
这该怎么解释呢？不能说明beta-catenin的增加是由于gsk-3bata的减少吧？我该怎么解释这两个分子之间的关系呢？焦急等待中！望高手指点，谢谢了！！
而beta-catenin总蛋白增加，磷酸化beta-catenin也增加 (总量多了,自然可以磷酸化的东西也多了...) ，
这该怎么解释呢？不能说明beta-catenin的增加是由于gsk-3bata的减少吧？我该怎么解释这两个分子之间的关系呢？焦急等待中！望高手指点，谢谢了！！
但是也看到gsk-3 beta 总蛋白量减少，磷酸化gsk-3 beta增加的例子，该怎么解释呢？
我也在研究这个关系问题，看得我好迷糊啊！
同样呀，越看越迷糊。。。
楼主你好 请问你用的什么牌子的tyr216的抗体？我遇到了跟你一样的情况，总gsk-3b减少，磷酸化的ser9也减少。。。
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