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        【求助】有关wnt信号通路

        丁香园论坛

        2749
        我做的是与wnt信号通路有关的,想了解某种药物诱导成骨是否和wnt信号通路有关,如果加药后β-catenin,LEF、CyclinD增加可否说明wnt信号通路被激活?β-catenin用的是western blot方法测定核内的,LEF、CyclinD用的是PCR的方法,这样设计实验合理吗?各位高手请帮帮忙,谢谢!
        怎么没人回答呢?丁香园不是很多高手吗?自己顶!
        现在所谓的核蛋白提取试剂盒并不能完全区分胞质蛋白和胞核蛋白。β-catenin的活化通常来说应该还要做荧光素酶检测,具体方法你可以在网上查找。
        荧光素酶检测用的质粒应该叫做TOPFLASH
        这方面有很多文献可以参考的。
        加药后wnt增加,还要继续看效应因子的激活情况,我想western会更好些,单纯PCR说明不了问题吧?

        不知道你具体做什么,不好说
        有知道荧光素酶怎样获取的?

        本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴

        师兄微信号:shixiongcoming

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