细胞百科

PriCells:动物子宫颈部上皮细胞的培养实验材料：1.动物子宫颈部穿刺或切除所得组织2.3T3成纤维细胞3.0.25%胰蛋白酶/EDTA4.KCM：DMEM中添加10%FBS、0.5ug/ml氢化可的松和1×10-10mol/L霍乱毒素5.EGF：100ugEGF溶于1ml无菌的UPW中。按100ul分装，在-20℃条件下储存。用10ml的含有血清的培养液配制100ug/mlEGF ...

PriCells:动物胃黏膜上皮细胞的培养实验材料：1.动物胎体胃黏膜，胃溃疡或胃癌手术切除的正常胃黏膜组织2.1%Ⅳ胶原蛋白或1%明胶铺培养瓶，4℃冰箱内过夜，使用前在37℃培养箱内放置2h，然后用培养液浸洗1次。3.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素和200000U/L庆大霉素，pH7.44.250000U/LⅠ型胶原酶或125 ...

PriCells:动物肠黏膜上皮细胞的培养实验材料：1.动物胎体小肠黏膜或死亡胎儿的小肠黏膜2.1%Ⅳ胶原蛋白铺培养瓶，放超净工作台上干燥3.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素和200000U/L庆大霉素，pH7.44.300000U/LⅪ型胶原酶和0.1g/LⅠ型中性蛋白酶混合消化液，DMEM配置5.解剖剪、解剖镊、眼科剪，眼科镊 ...

PriCells:正常小鼠原代破骨细胞培养方案实验材料：1.正常小鼠乳鼠颅盖骨组织；2.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素，pH7.2；3.0.1%Ⅰ型胶原酶；4.培养器具：培养瓶或皿（用多聚赖氨酸包被）、200目不锈钢网筛、眼科剪、镊子等；培养方法：1.选用出生1-3天小鼠乳鼠，处死，放入75%酒精中浸泡2—3分钟，转至超净工作台 ...

PriCells:正常人组织源性鼻咽上皮细胞的培养实验材料：1.一般来自鼻咽癌活检组织或引产胚胎的鼻咽组织；2.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素，pH7.2；3.培养基：可使用ROMI1640培养液，添加20%胎牛血清、5μg/ml胰岛素、2.7×10-7mol/L氢化可的松。也可用DMEM培养液；4.低血清培养液与无血清培养液： ...

PriCells: 正常兔食管上皮细胞培养实验材料：1. 大兔的正常食管组织2. 6孔培养板：用多聚赖氨酸4℃包被过夜3. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素和200000U/L庆大霉素，pH7.44. 手术刀、解剖剪、解剖镊、眼科剪，眼科镊实验方法：1. 处死大兔，取正常食管组织放入含双抗的PBS（pH=7.2）中反复清洗3次，以洗去组织 ...

PriCells: 正常人食管黏膜上皮细胞培养实验材料：1. 一般采用活检时获得的正常食管黏膜组织2. 不含Ca2+和Mg2+的1×HBSS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素和1.5g/L庆大霉素，pH7.43. 手术刀、解剖剪、解剖镊、眼科剪，眼科镊4. 离心管（15ml、50ml）实验方法：1. 食管黏膜组织放入HBSS中，在解剖显微镜下分离黏膜与黏膜下组织，用HBSS ...

PriCells: 正常大兔脑微血管内皮细胞的培养实验材料：1. 正常兔大脑皮质组织；2. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素，pH7.2；3. M199培养液（含20%小牛血清、肝素25U/ml、HEPES 10mmol/L、100IU/ml青霉素和100μg/ml链霉素）；D-Hanks液；0.05%胰蛋白酶溶液；0.05%胶原酶溶液；1 ...

PriCells: 正常人包皮成纤维细胞的培养实验材料：1. 细胞来源：新生儿包皮；2. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素，pH7.2；3. 0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA溶液：两者比例为1：1，用D-Hanks液配制；4. 0.02%大豆胰蛋白酶抑制剂：用DMEM培养液配制；5. 生长基质：人纤维连接蛋白，按10μg/cm2包被培 ...

正常大鼠前脂肪细胞的培养实验材料：1. 细胞来源：4周龄雄性Wistar或其它品系大鼠；2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素，pH7.4；3. 消化液：2mg/ml胶原酶溶液。用DMEM培养液配制，并加入牛血清白蛋白20mg/ml；4. 培养液a：DMEM培养液，10%胎牛血清、100IU/ml青霉素、50μg/ml链霉素； ...

PriCells: 正常大兔骨间充质前体细胞的体外成软骨培养实验材料：1. 实验动物：5月龄兔；2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2；3. 完全培养基：DMEM培养液，补充10%胎牛血清、青霉素100IU/ml、链霉素100μg/ml4. 化学限定性培养液：基础培养基为DMEM培养基，添加胰岛素6.25&mu ...

PriCells: 正常角膜内皮细胞培养实验材料：1. 角膜材料：可以取自人眼、兔眼或者牛眼，人眼材料最好来自胎儿；2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2；3. 特殊器械：虹膜恢复器；4. 消毒液：1：5000的升汞溶液与100IU/ml的庆大霉素生理盐水；5. 消化液：0.25%胰蛋白酶-0.01%EDTA混合溶液；6. ...

PriCells:正常小梁细胞原代培养实验材料：1. 材料来源：人眼、兔眼或者猪眼等；2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2；3. 器械：小梁剪与无齿镊等；4. 消毒液：200IU/ml的庆大霉素生理盐水；5. 培养液：基础液由DMEM培养基加入HEPES 6.0g/L、NaHCO32.2 g ...

PriCells:正常视网膜色素上皮细胞原代培养实验材料：1. 材料来源：人眼、兔眼或者猪眼等；2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2；3. 特殊取材器械：眼球托与7-0尼龙线。以灭菌的白色橡胶反口胶塞作为眼球托；4. 消毒液：200IU/ml的庆大霉素生理盐水；5. 消化液：0.01%EDT ...

PriCells: 正常人骨膜内成骨细胞原代培养实验材料：1. 骨组织来源：手术切除之骨组织；2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2；3. 消化液：0.25%胰蛋白酶溶液，1mg/mlⅠ型胶原酶溶液；4. 培养液：RPMI 1640培养基，配制培养液时加入15%的小牛血清，并用5.6% NaHCO3调节至pH 7.2 ...

PriCells: 正常视网膜米勒细胞原代培养实验材料：1. 材料来源：人眼、兔眼或者猪眼等；2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2；3. 消化液：0.25%胰蛋白酶-100IU/ml透明质酸酶混合消化液；4. 消毒无菌的手术器械若干；实验方法：1. 取材（1）取自人的供体眼球； 1） 经常规消毒程序消毒后，于锯齿缘 ...

PriCells: 正常人关节软骨细胞的长期培养实验材料：1. 软骨细胞来源：20—24周自然流产胎儿的股骨和胫骨；2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2；3. 消化液Ⅰ：2mg/ml胰蛋白酶和2mg/ml胶原酶混合消化液，用PBS液配制；4. 消化液Ⅱ：0.5mg/ml胶原酶，用培养液Ⅰ配制 ...

PriCells: 正常关节软骨细胞的短期培养实验材料：1. 软骨细胞来源：动物材料可选用未成年兔的膝关节、鸡胚胸软骨。人体材料可取自引产胎儿或成年人手术切除的软骨标本；2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2；3. 消化液：0.2%胶原酶Ⅱ溶液，用PBS液配制，过滤除菌；4. 培养液：RPMI164 ...

PriCells: 细胞内糖类染色方法—过碘酸席夫反应法基本原理：过碘酸是一种强氧化剂，过碘酸的氧化作用先使糖分子的乙二醇基变为乙二醛基，乙二醛基继而与Schiff试剂结合，Schiff试剂本为无色亚硫酸品红复合物，但它与乙二醛基结合后形成紫红色反应物。颜色反应的深浅取决于组织内多糖（包括糖原、黏多糖、黏蛋白、糖蛋白、糖脂等）的乙二醇分子的多寡。基本原理：1. 席夫试剂的制备（1） 称取0.5 ...

PriCells: 原代贴壁细胞吉姆萨染色法染液制备：1. 称取0.5g吉姆萨粉和22ml甘油；2. 取少量甘油与吉姆萨粉在研钵内充分混合，研磨至无颗粒；3. 将剩余的甘油倒入研钵，于56℃保温2h；4. 加入33ml纯甲醇混匀，即为吉姆萨母液，将其保存于棕色试剂瓶内；5. 取9份pH6.80—7.38的Sorensen缓冲液和1份吉姆萨母液混合即得染色液；贴壁细胞染色步骤：1. 去除培养器皿 ...