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- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商:
赛业生物
- 服务名称:
点突变细胞系
点突变细胞系定制服务
基于Cell iGeneEditor™细胞基因编辑系统,我们可提供精准、高效的基因定点突变细胞定制服务。依托赛业生物自研优化的α-donor体系,将人源化编辑引导组分转染至靶细胞,实现高效同源重组,可交付细胞鉴定报告、实验报告(含载体报告、实验流程、测序原始数据等)、点突变单克隆纯合子细胞系,项目周期快至7周。
点突变细胞系实验流程
基因/细胞分析→引导分子设计与合成→细胞转染与KI效果鉴定→单克隆化→测序分析→复检及扩增
点突变细胞系服务特色
|
行业技术难点 |
赛业生物解决方案 |
|
引导分子和donor设计不合理,同源重组效率低 |
智能的Cell iGeneEditor™细胞基因编辑系统:可科学设计高效率、低脱靶的引导分子,编辑效率高达90% 自研的α-donor系统:HDR效率高达87%,远高于市面上的编辑效率,可实现无痕修复(footprint-free) |
|
细胞转染方式不当导致效率低 |
多类型细胞(肿瘤、非肿瘤、干细胞和iPS细胞等)均能在转染前调整至对数生长期状态; 多种转染技术支持,包括磷酸钙共沉淀、人工脂质体法、电穿孔法、病毒感染等 |
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递送载体选择不当,转染后细胞大量死亡 |
所用的RNP递送方式使得细胞活率高达90%,悬浮细胞基因编辑效率显著提升 |
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单克隆生长时间长、制备难以成功 |
掌握多种独特的制备方法,单克隆形成率可达30%以上,通过筛选一轮即可获得足够的阳性克隆 |
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单克隆数据杂乱 |
快至1min分析和鉴定点突变效率及纯合子克隆 |
|
iPSC细胞在编辑过程中容易分化,失去干性 |
20年干细胞项目经验,可培养出理想的iPSC集落:内部紧实、大小均匀且边缘清晰 |
|
体外细胞模型存在局限性,与临床结果偏差较大 |
拥有点突变大小鼠模型,能更好地模拟复杂生物学环境,便于研究疾病机制与药物疗效 |
点突变细胞系服务优势
1. 高HDR编辑效率,支持无痕点突变
依托自研α-donor载体系统,优化同源臂、递送及转染方案,HDR效率最高87%,优于行业水平,支持footprint-free无痕修复,平台整体编辑效率可达90%,可高效完成精准点突变构建。
2. 极速项目响应与交付周期
24小时输出专属实验方案,项目周期节点定期同步反馈,点突变细胞株快至7周即可完成交付。
3. 高纯合子得率,稳定交付单克隆纯合子
提供有限稀释、挑克隆等多种单克隆筛选策略,搭配定制化培养基优化,纯合子率最高70%,保障获得定点突变单克隆纯合子细胞株。
4. 成熟平台,可提供上下游全链条服务
20 年基因编辑技术积累,年完成体内外模型超万例,已有大量文献引用。可承接细胞基因表达调控、细胞功能验证、小鼠疾病模型构建及表型分析,实现从体外细胞到体内动物实验一站式服务。
5. 优质细胞资源,减少编辑带来的细胞损伤
自建参数完整、性能稳定的科研细胞库,降低基因编辑操作对细胞本身造成的负面影响。
6. 多重严格质控,交付合格细胞产品
细菌、支原体双重微生物检测,杜绝污染,完成基因编辑效果鉴定、细胞活率检测,多维度把控交付细胞品质。
点突变细胞系服务案例
1. 自研的α-donor系统在不同细胞中的编辑效率
|
细胞类型 |
Cell Pool HDR效率 |
测序峰图 |
纯合子阳性率 |
|
A549人非小细胞肺癌细胞 |
87% |
WT序列:CATCATGAAGAAGGGGTACAAGGTG 点突变序列:CATCATGAAGAAAGGGGCCAAGGTG
|
70% |
|
HEK 293人胚胎肾细胞 |
80% |
WT序列:TGTGAAAATTTACCGAGCAGA 点突变序列:TGTGAAAATTTACTGAGCAGA
|
50% |
|
HCT-15人结肠癌细胞系 |
57% |
WT序列:CCTGGACAGAGAACATCCAAG 点突变序列:CCTGGACAAAGAACATTCAAG
|
41% |
|
iPSC人诱导多能干细胞 |
62% |
WT序列:TGACTGCTGACAAAG 点突变序列:TGACTGCTGATAAAG
|
50% |
2. SCARB1(p.K500N, K508N)双位点突变
SCARB1是高密度脂蛋白(HDL)的主要受体,促进肝脏从HDL摄取胆固醇。通过基因编辑技术,将肝癌细胞的SCARB1突变成SCARB1(p.K500N, K508N)。

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的一种即可!是的,你没有看错,只要一种!方案概述:第一年 4 个地方,每个地方分别种植 5000 株 Shoepeg(玉米的一个地方品种),每个地方随机挑选 96 株进行基因型和表型分析。按照表型分别挑选两个地方 5% 极端高和矮的单株。第二年将 4 个地方分别挑选的极端个体在相同的地方再分别种 5000 株。然后分别从高和矮的两个种植点分别随机各挑选 96 个极端个体进行表型鉴定和 BSA 测序分析。GWAS+BSA 定位玉米株高 QTLGWAS 和 BSA 对玉米株高定位结果(其中 GWAS
activation mediator) 哦~~ 有时候,我们想知道基因产物定位怎么办?融合标签啊!怎么融合?同源重组修复能帮到你!Cas9 引入双链 DNA 断裂,同源介导修复(HDR)就能帮你把转进细胞的同源片段插入切割位点上!如果你转入细胞的同源片段包含荧光标签,几天过后你的细胞就可以亮了!如果你转入细胞的同源片段包含点突变,duang!一个目的基因突变细胞株也就这么构建成了! 这只是 Cas9 技术的冰山一角,更多技术等待着你去了解,更更多的应用也等待着你去开发!
受体钝化(receptor desensitization)
。体外培养时,加入PGE1后,cAMP升高后又下降,细胞发生钝化,同时也对其他cAMP途径的信号失去敏感。若将适应后的Gs和正常的Gs分别转移到Gs缺陷的突变细胞株的膜上进行对比观察,发现前者仍然钝化,而后者具有敏感性,因此,提示Gs发生了改变。















