服务案例——THP-1基因敲除 Di-(2-ethylhexyl) phthalate exposure leads to ferroptosis via the HIF-1α/HO-1 signaling pathway in mouse testes. 点击查看文献解读详情>> 研究人员构建了 HIF-1α基因敲除的Leydig和Sertoli细胞系(由赛业生物提供),通过Sanger测序和Western blotting检测,确认了敲除细胞系中的HIF-1α被成功敲除。与野生型细胞相比,HIF-1α-KO的细胞系在MEHP刺激下细胞活力受损的程度有明显改善。同时,脂质过氧化和亚铁超载也受到抑制。分别使用qPCR和Western印迹法评估Hmox1和HO-1水平的表达,发现敲除Hif-1α能逆转MEHP刺激下的Hmox1和HO-1表达水平上调。此外,MEHP刺激后ROS爆发和细胞死亡程度也在敲除HIF-1α后减弱。Western印迹显示敲除HIF-1α恢复了ACSL4、FTH1和SLC7A11的表达,以及抑制GPX4的表达。由此表明,MEHP刺激以HIF-1α依赖的方式导致睾丸Leydig和Sertoli细胞的铁死亡。