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赛业生物
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KO细胞株
全基因组敲除细胞库(细胞系复苏服务)
为方便科研人员快速地用上丰富优质的细胞系,扩大细胞库资源,赛业生物依托成熟的Cell iGeneEditor™细胞基因编辑系统和完备的细胞培养体系,持续推进全基因组敲除细胞库构建计划,致力于为基础研究、药物开发及临床转化提供更丰富的模型资源。KO细胞库涵盖肿瘤、心血管、神经等20多种研究领域,交付单克隆纯合子,快至24小时发货!
基因敲除细胞系定制服务
基于iGeneEditor™细胞基因编辑系统,赛业生物新升级的KO细胞定制服务,可交付单克隆纯合子,快至1个月交付,满足您的早期筛选实验需求。我们使用优化的转染体系将核酸酶和引导分子直接递送到细胞内,脱靶效率降低明显,能更精准地切割目标DNA序列。
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类型 |
典型细胞系 |
交付标准 |
质控标准 |
周期 |
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肿瘤免疫细胞 |
Jurkat、HepG2、SK-MES-1等 |
Cell Pool或单克隆纯合子细胞系2管(1×106细胞/管),实验报告
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PCR检测 Sanger测序 |
4周起
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非癌永生化细胞 |
HK-2、AC16等 |
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干细胞 |
H1、H9、iPSC |
PCR检测 Sanger测序 干性检测 |
基因敲除细胞系实验流程
基因/细胞分析→引导分子设计与合成→细胞转染与KO效果鉴定→单克隆化→测序分析→复检及扩增
多重策略保障蛋白敲除
很多KO失败根源,只做到基因组敲除,忽略蛋白层面的彻底失活。赛业生物四重体系保障蛋白有效敲除:
1. KO验证的特异性抗体库:使用不表达目标蛋白的KO细胞作为阴性对照,确保抗体特异性,乃至实验结果的可重复性,我们拥有全球数量最多的KO抗体验证(4400+种),相关验证数据齐全
2. 自研RNA剪接模型工具:预测碱基序列突变后mRNA序列可能发生的剪切情况,辅助筛选ORF移码的单克隆
3. Cell iGeneEditor™细胞基因编辑系统:方案设计全面专业,优先片段敲除方案、敲除抗体结合位点
4. KO细胞库:涵盖肿瘤、心血管、神经等20多种研究领域,启动近2万个全基因组敲除细胞库构建计划
我们的核心优势
1. 高编辑特异性与效率:核酸酶系统升级,切割效率>90%,可实现 10kb 以上大片段敲除,显著降低脱靶风险。
2. 快速交付:现货24小时发货,定制KO细胞快至1个月拿到单克隆纯合子。
3. 20年基因编辑技术沉淀:每年完成上万例体内、体外基因编辑模型,大量客户成果登上高分期刊。
4. 全链条科研支持:不止细胞模型,可承接细胞功能验证、小鼠疾病模型构建、表型分析,打通体外细胞到体内动物完整研究链路。
基因敲除细胞系真实项目案例
案例 1|Huh-7细胞SOX9基因敲除
通过基因编辑技术敲除人肝癌细胞Huh-7中SOX9基因。通过电转法向Huh7细胞中转入RNP复合物,筛选出单克隆测序验证插入了1bp碱基,造成移码敲除,最终成功敲除Huh-7细胞中的SOX9基因。

Huh-7-KO-Human SOX9构建策略图

纯合子单克隆进行Sanger测序,插入1bp
案例2|HK-2细胞大片段敲除
在人肾皮质近曲小管上皮细胞(HK-2)中设计一对引导分子靶定基因组上的基因进行全基因缺失。对引导分子进行技术优化,提高对HK-2细胞的切割效率,Cell Pool进行Sanger测序。配对的引导分子共转染到HK-2细胞中,并筛选单克隆,对纯合子单克隆进行PCR和Sanger测序验证。

HK-2细胞敲除方案。

对细胞群进行Sanger测序和软件分析,显示两条引导分子有效切割效率分别为86.3%和96.2%。

纯合子单克隆进行Sanger测序,单克隆一条链敲除11323bp,另一条链敲除11325bp。
多篇高分文献引用,实力看得见
我们交付的KO细胞助力客户发表多篇高质量文章,包括 Cancer Communications、Cell Death & Disease、Advanced Science、Signal Transduction and Targeted Therapy、Nature Communications 等期刊,覆盖肿瘤免疫、神经毒性、代谢、铁死亡等多个热门方向。
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之降解,是在 RNA 水平上的降低目的基因的表达。此时,基因敲除稳转株可以很大程度上规避这个问题。因为基因敲除稳转株是在基因组水平上通过基因序列的改变使其基因功能丧失,在敲除细胞中通常不会检测到靶蛋白的表达,而且敲除效果稳定,不能恢复,也就是永久性敲除了。但是基因敲除稳转株缺点是操作周期长,费用多,效率低。如何选择基因下调表达的方式,就要综合考虑了。那么同样是稳定株,单克隆?混合克隆?要怎么选?细胞:当需要去除细胞群体干扰因素的时候,推荐使用单克隆稳定细胞株,其基因组背景相对单一,对实验
【原创】基因组编辑三大工具ZFN、TALEN、CRISPR/Cas9筛选基因敲除细胞系阳性克隆Protocol
们。也欢迎跟帖提问。我不定期回答大家的疑问。欢迎分享、转发、收藏给您的好友、同事、同学及QQ群等。好东西请别自己独自藏着掖着。预祝您实验顺利! 这个部分的PS也很重要,希望能够引起,特别是土豪们的注意。那就是关于癌细胞株用来从事科学研究之我见,供参考。欢迎战友们补充。土豪我们做朋友吧。嘻嘻!PS一三事:(土豪请重视) 1. 在癌细胞系上做基因敲除,科学家有此想法由来已久。HGP后,科学家能够读取基因信息,RNAi现象的发现被很快开发并运用到基因的敲低工作中来,虽然不能达到彻底敲除的目的,但至少在那个时代
Cas 9 技术 从细菌的免疫系统,到一个众所周知的生物技术工具;从单一的一项敲除技术,到应用领域遍地开花,Cas9 技术发展不可谓不快。到底有多快?看到 13 年 14 年那么多关于 Cas9 的 nature、science、cell,我和我的小伙伴都惊呆了! Cas9 技术广泛用于基因功能研究,到底有多广泛?说全能,我想不过分吧。不信?那就听我说说。 研究基因功能,最常用的方法就是基因敲除、上调表达、下调表达、融合蛋白及做突变。说到基因敲除,这是
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