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锐博生物
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核质分离及qRT-PCR检测
细胞核质分离是根据细胞膜和核膜裂解的难易程度用不同强度的裂解液裂解细胞,达到细胞质和细胞核物质分离的效果。锐博生物提供核质分离及qRT-PCR检测服务,可进行lncRNA或其它RNA亚细胞定位研究,为lncRNA或其它RNA功能和机制研究提供相关的铺垫和信息,分离的产物可通过qRT-PCR的方法检测目的RNA在细胞质和细胞核中的含量。
产品或服务优势:
1、核质分离纯度高;
2、交叉污染少,一般细胞核质交叉污染在10%以下;
3、可准确检测RNA胞质胞核定位
技术支持或应用实例

注: 分离A细胞和B细胞的胞质RNA及胞核RNA后使用qRT-PCR方法检测GAPDH、MT-CO2、RNU6-1、SNORD48的RNA水平,以胞质及胞核累加表达水平为1计算胞质及胞核各自的占比;数据以Mean ± SD展示,n=3。
了解更多详细信息请登录锐博生物官网 https://www.ribobio.com/
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文献和实验【求助】miRNA mimic qRT-PCR检测可以提高多少倍?
nvonne 我购买的miRNA mimic 带FAM标记,本打算用流式检测转染效率,但发现荧光信号很弱,转染后采用定量PCR检测miRNA的表达变化,相对定量分析,发现mimic组比NC阴性对照组的miRNA表达量提高了100多倍,这虽然表明转染mimic成功,但总感觉这么高的变化有点太离谱了是不是?也没查到相关文献,谁能给我一些参考?非常感谢 zhujoker 顺转就是这么高,我的也是这样,有的能够上调1000倍
大家都在说 qRT-PCR 实验原理、引物设计、结果解读等,而我觉得我应该和大家分享一下 qRT-PCR 的实验操作事项。虽小,但是关乎结果。在做 qRT-PCR 之前,我们需要对自己的 RNA 以及操作方法有清楚的了解,毕竟我们的努力是希望得到结果的,而不是简单的练练手。所以在做 qRT-PCR 之前,我们需要确定以下问题(部分内容仅适用于 SYBR)。你确定你的 RNA 没有降解吗?NanoDrop 2000 只能检测 RNA 的浓度以及纯度,而对于 RNA 的完整性是没法检测的。RNA
-FISH 原位杂交技术定位;或者通过细胞核质分离试剂盒得到 RNA,qRT-PCR 检测其分布;(2)全长序列试验方法:通过 5′RACE 获取 lncRNA5′ 全长, 3′RACE 获取 lncRNA3′ 全长,最终得到 lncRNA 完整的全长序列。 第三步lncRNA的功能研究lncRNA 较长,承载的信息量多,更容易形成高级结构,其功能具有多样化和特异性强的特点。类似于 miRNA,探讨 lncRNA 功能可用 gain/loss of function 策略,过表达或沉默 lncRNA
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