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- 2025年12月29日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商：
上海达为科生物科技有限公司
- 服务名称：
上海TUNEL检测服务
一、原理
TUNEL（TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling）检测是一种基于末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）标记DNA断裂末端的原位检测技术。其核心原理如下：
- DNA断裂特征：细胞凋亡时，染色体DNA发生双链或单链断裂，产生大量3’-OH末端。
- 标记反应：TdT酶催化荧光素、生物素或酶标记的dUTP连接到3’-OH末端，通过显微镜或流式细胞仪检测标记信号，特异性识别凋亡细胞。
- 技术优势：无需放射性标记，灵敏度高，可检测单个凋亡细胞，适用于石蜡切片、冰冻切片及培养细胞。
二、应用领域
- 病理学研究：评估肿瘤、神经退行性疾病（如阿尔茨海默病）等疾病中的细胞凋亡情况。
- 药物筛选：检测化疗药物或基因治疗对细胞凋亡的诱导效果。
- 发育生物学：研究器官发育过程中的程序性细胞死亡。
三、操作步骤
- 样本处理：
- 固定：使用4%多ju甲醛或福尔马林固定样本，保留细胞结构。
- 通透：Triton X-100或蛋白酶K处理，增强细胞膜通透性，便于试剂进入。
- TUNEL反应：
- 按试剂盒配制TUNEL检测液（含TdT酶和标记dUTP），37℃避光孵育60分钟。
- 显色/荧光检测：
- 荧光法：使用Cy3、FITC等荧光标记，荧光显微镜或流式细胞仪观察。
- 显色法：DAB显色，苏木素复染后光镜观察。
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文献和实验和基础，它在整个与个人生老病死的生物产业链中起着基础性的作用，这就好比电信网络和设备是电信市场的基础一样。疾病易感基因检测使人们清楚预知自己可能得什么重大疾病，从而能提前进行预防，将彻底颠覆传统医院被动治疗的局面。因此，疾病易感基因检测的推广将拉开生物科技产业化的序幕。上海荣健生物技术有限公司经《中国人口健康基因检测科学社会工程》授权，是该工程首家“科普教育中心”和首家“就业培训基地”的承担单位，负责“主动健康™基因检测服务”产品的销售、推广、咨询、培训和服务等工作。服务采用的检测标准和服务标准
Agilent基因芯片分析基因组转录谱服务由上海伯豪生物技术有限公司提供）。基因芯片研究修饰基因缺失突变株的基因组转录谱发现，共有600多个基因与野生型相比发生明显变化，其中主要为上调基因，包括细菌噬菌体基因、DNA 损伤修复系统、SOS 应激反应系统等。这些基因编码的功能与宿主所呈现的异常生理表型非常吻合。其中，基因芯片揭示的DNA 损伤修复系统、SOS 应激反应系统的启动，暗示了菌株中DNA损伤的发生。 最后，TUNEL实验检测到修饰基因缺失突变株中，限制基因导致了细胞内DNA断裂损伤的出现
科主任简介： 沈立松 医学博士，主任医师，博士研究生导师。1984年毕业于中国医科大学，同年进入新华医院工作。现任上海交通大学医学院附属新华医院检验科主任，新华临床医学院检验学教研室主任。曾先后在日本国立小儿病院/国立小儿医疗研究中心、美国华盛顿大学儿童医院访问学习。 主要研究方向为恶性肿瘤发病机制的基础及临床研究。近年以第一作者和通讯作者发表论文80余篇，其中SCI收录10余篇。已培养研究生10名，正在培养5名。近5年作为第一负责人承担国家
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