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RNA-seq实验

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  • 2025年12月25日
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      上海达为科生物科技有限公司

    • 服务名称

      RNA-seq实验

    品牌 其他品牌 产地类别 国产
    应用领域 医疗卫生,生物产业,综合

    RNA-seq实验,也叫转录组测序技术,就是把mRNA,smallRNA,and NONcoding RNA等等,其中一些用高通量测序技术把它们的序列测出来,以此来检测它们的表达水平。

    RNA-seq实验原理及过程:

    转录组是某个物种或者特定细胞类型产生的所有转录本的集合。转录组研究能够从整体水平研究基因功能以及基因结构,揭示特定生物学过程以及**发生过程中的分子机理。

    先将样品提取总RNA,在这之后,除去rRNA(对于真核生物,用带有Oligo(dT)的磁珠富集mRNA,对于原核生物,用试剂盒去除rRNA),向得到的mRNA中加入Fragmentation Buffer使其片断成为短片段,再以片断后的mRNA为模板,用六碱基随机引物(random hexamers)合成cDNA**链,并加入缓冲液、dNTPs、RNase H 和DNA polymerase I 合成cDNA第二链,经过QiaQuick PCR试剂盒纯化并加 EB缓冲液洗脱经末端修复、加碱基A,加测序接头,再经琼脂糖凝胶电泳回收目的大小片段,并进行PCR扩增,从而完成整个文库制备工作,构建好的文库用Illumina HiSeq2000进行测序。

    RNA-seq实验服务内容:大数据分析,整体课题的分解,真实的实验数据,完整的实验报告及分析。
     

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      是因为其高稳态表达水平是通过转录本高稳定性的积累来实现的。 在ESCs中,多能状态主要由少量增强子相关的主要转录因子控制,包括Oct4、Sox2和Nanog,它们驱动维持ESC状态所必需的靶基因的表达。结果显示,在s4U-标记实验中,Oct4、Sox2和Nanog (OSN) 调控的靶基因在T > C reads中有很高的水平(图5b)。从全局来看,与4,994个近端不含OSN增强子的基因相比,含OSN增强子的2029个基因(>5 cpm)的转录本产生的 T> Creads显著增高 (Mann–

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