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- 2025年12月24日
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碱性磷酸酶染色（NAP）
碱性磷酸酶染色( NAP)在临床的应用基本属于常规筛查的染色法。专门用于血液或骨髓细胞涂片的中性粒细胞的碱性磷酸酶染色，又称同时偶联法。碱性磷酸酶活性部位呈蓝色，位于胞浆中。油镜下计数101个中性粒细胞，求出百分比和积分。非特异性反应少，结果可靠。
碱性磷酸酶染色原理(偶氮偶联法)：血细胞内的碱性磷酸酶在pH 9.4-9.6的条件下将基质液中的α-磷酸萘酚钠
水解，产生α-萘酚与重氨盐偶联形成不溶性灰黑色沉淀，定位于酶活性所在之处。
结果判断：阳性结果为胞质内出现灰褐色至深黑色颗粒状或片状沉淀
①(-)灰褐色沉淀，为0分。
②(+)胞质出现灰褐色沉淀，为1分。
③(++)胞质深褐色沉淀，为2分。
④(+++)胞质中已基本充满棕黑色颗粒状沉淀，但密度较低，为3分。
⑤(++++)胞质全被深黑色团块沉淀所充满，密度高，甚至遮盖胞核为4分。
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文献和实验性血小板减少性紫癜、多发性骨髓瘤、真性红细胞增多症、急性淋巴细胞白血病、阵发性睡眠性血红蛋白尿等。 中性粒细胞碱性磷酸酶的显示方法有偶氮偶联法和钙-钴法两种。前者的染色原理是血细胞内碱性磷酸酶在pH为9.4～9.6的条件下，将基质液中的α-磷酸萘酚钠水解，产生α-萘酚与重氮盐偶联形成灰黑色沉淀，定位于细胞质内酶活性所在之处。钙-钴法染色是碱性磷酸酶在碱性条件下将基质液中的β-甘油磷酸钠水解，产生磷酸钠。磷酸钠依次与硝酸钙、硝酸钴、硫化铵发生反应，形成不溶性棕黑色的硫化钴，定位于酶活性之处。 碱性磷酸酶主要
高。如果有相同的抗原决定簇时，则会有交叉反应。方法成熟，使用广泛的还是经典的组织化学方法。下面以碱性磷酸酶的显示方法来学习经典酶组织化学的理论及操作。经典酶组织化学不是显示酶本身，常采用的方法是：在一定条件下，使细胞中的酶作用于酶的底物，使其产物在原地进行捕捉、沉淀转化为有色产物。碱性磷酸酶（AKP）的显示方法最早由Gomeri（1939）提出，现在这种方法称为Gomeri法。碱性磷酸酶是指磷酸单酯酶Ⅰ，它能在pH8.6~10.0的最适条件下分解磷酸单酯，对于与磷酸相接的醇基没有特异性，Gomeri法
Gomori染色是用于检测细胞中骨型碱性磷酸酶(bone alkaline phosphatase BALP)的一种染色法，具体内容如下： 一、主要试剂准备：PBS、丙酮（或甲醛、95乙醇）、3%β-甘油酸钠、2%巴比妥钠、2�Cl2、2%MgSO4、2%硝酸钴、1%硫化铵（纯的硫化铵也为液体，且由于其有强烈的刺激性味道，建议现配现用） 二、实验步骤： 1、将无菌玻片放在细胞的培养皿中
