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        碱性磷酸酶的染色检测

        互联网

        5599

        实验原理

         

        本试验是一个酶组织化学试验，酶组织化学是在不破坏组织细胞的条件下，检测酶的存在，定位与活性的学科，即在酶的存在，分布及其用在显微镜下变成可见的。生命是有序的，包括时间的有序及其空间的有序。其中美的空间有序性在于其细胞组织结构的精确位置，各种酶的自己的位置保证了化学活动的有效进行。
        酶的定位方法必须准确，其显示方法必须具有高度的特异性，使酶本身具有可见性，这是一种直接的方法，目前主要有免疫荧光化学法，该法敏感性高，速度快，但成本高。如果有相同的抗原决定簇时，则会有交叉反应。方法成熟，使用广泛的还是经典的组织化学方法。下面以碱性磷酸酶的显示方法来学习经典酶组织化学的理论及操作。经典酶组织化学不是显示酶本身，常采用的方法是：在一定条件下，使细胞中的酶作用于酶的底物，使其产物在原地进行捕捉、沉淀转化为有色产物。碱性磷酸酶（AKP）的显示方法最早由Gomeri（1939）提出，现在这种方法称为Gomeri法。碱性磷酸酶是指磷酸单酯酶Ⅰ，它能在pH8.6~10.0的最适条件下分解磷酸单酯，对于与磷酸相接的醇基没有特异性，Gomeri法是让该酶在碱性条件下，分解甘油磷酸钠，产生磷酸根。

        实验试剂

         

        实验设备

         

        实验材料

         

        实验步骤

         

        注意事项

         

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