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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
500
- 英文名:
EZ-press One Step qRT-PCR Kit
- 供应商:
EZBioscience
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
100 Rxns×20μl
EZ-press One Step qRT-PCR Kit是专门以RNA为模板进行荧光染料法定量PCR检测的试剂盒。本试剂盒含有四管试剂:10× One Step qRT Enzyme Mix、2× One Step qRT Buffer、ROX1和ROX2,使逆转录和qPCR反应在同一个反应体系中完成,不需要额外的开管和移液,这大大提高了检测的通量、降低了检测的时间及污染的风险。
本试剂盒的10× One Step qRT Enzyme Mix包含M-MLV突变体逆转录酶、热启动DNA聚合酶和RNase Inhibitor,2× One Step qRT Buffe包含SYBR Green I、dNTPs、高度优化的缓冲液体系,使之具备了更强的扩增效率、抗干扰能力,检测灵敏度可达到0.1 pg总RNA或低至10拷贝的靶基因。同时,本试剂盒中含有两管ROX参比染料,适用于任何仪器类型;使用时,只需根据仪器类型选用合适的ROX,再在配制的反应体系中加入模板RNA及引物,最后加水至指定体积即可,十分便于使用。
产品组分
|
组分 |
EZB-qRT-S (100 Rxns, 20 μl/Rxn) |
EZB-qRT (500 Rxns, 20 μl/Rxn) |
|
10× One Step qRT Enzyme Mix*1 |
200 μl |
1 ml |
|
2× One Step qRT Buffer*2 |
1 ml |
5 ml |
|
50× ROX Reference Dye 1*3 |
44 µl |
220 µl |
|
50× ROX Reference Dye 2*3 |
44 µl |
220 µl |
注:*1.包含逆转录酶,RNA酶抑制剂和热启动DNA聚合酶。
*2.包含SYBR Green I、dNTPs、高度优化的缓冲液。
*3.用于校正不同孔之间的荧光信号误差。
保存条件
本产品所有组分置于-20°C避光保存。过期日期详见产品标签的有效期信息。
适用的仪器型号
|
Do Not Use ROX |
Bio-Rad CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ™5, MyiQ™, MiniOpticon™, Opticon®, Opticon 2, Chromo4™; Roche LightCyclerTM 96, Roche LightCyclerTM 480; Eppendorf Mastercycler® ep realplex, realplex 2s; Illumina Eco qPCR; Qiagen/Corbett Rotor-Gene® Q, Rotor-Gene® 3000, Rotor-Gene® 6000; Thermo Scientific PikoReal Cycler; Analytikjena qTOWER 3G; Cepheid SmartCycler®; Bioer Linegene 9600; HONGSHI SLAN®-96P. |
|
Use ROX 1 (1×) |
ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900, 7900HT, 7900HT Fast; StepOne™, StepOne Plus™. |
|
Use ROX 2 (1×) |
ABI 7500, 7500 Fast, Quant-Studio 1, 3, 5, 6, 7, 12K Flex, Dx, ViiA™7; Stratagene MX4000™, MX3000P™, MX3005P™. |
注意事项
1、10× One Step qRT Enzyme Mix试剂含有高浓度的甘油,使用前请充分混匀后再短暂离心至管底;
2、反应液的配制请使用RNase-free或者灭过菌的枪头、EP管等,尽量避免污染。
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文献和实验%,避免引物内含有互补序列,3』端尽量不要出现含有连续三个以上的 G 或 C 的片段,真核基因设计引物时最好跨内含子哦。 选择合适 ROX 参照染料 各位同学在选购产品、做实验时,首先要弄清自己实验室的仪器对应哪种 ROX(High 还是 Low)!试剂买回来,样也加好了,最后发现不能用在自家仪器上,内心也一定是很崩溃。诺唯赞的染料法荧光定量专用预混液提供各种 ROX 供选择,如果不想这么麻烦,ChamQTM Universal SYBR® qPCR Master Mix (Q711)那是极好
增加循环数或选择适合低丰度基因定量的产品。 3.复孔重复性差 可能原因与解决方案: 1)加样误差导致,建议移液器定期校准,另外可通过扩大反应体系或提前配制好预混液优化。 2)模板量低,建议提高模板量,使Ct值落在15-30之间。 3)仪器长时间未校准,建议定期进行仪器校准保养。 4.无扩增曲线 可能原因与解决方案: 1)反转录失败、cDNA 模板降解或缺失、引物降解失效、qPCR 预混液酶活性丧失,看阳性对照模板是否可以扩增,排除试剂模板问题。 2)荧光定量仪器参数设置错误,上机
NAR新突破:CliPEdit调控RNA功能与m⁶A甲基化,翌圣试剂助力
® Flash Cell/Tissue Total RNA Kit 快速细胞/组织总 RNA 提取试剂盒 19221ES 反转录 5 min高效高产反转 预混液(含gDNA去除) Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (DNA digester plus) 11155ES qPCR染料法 高灵敏显色示踪荧光定量预混液 Hieff UNICON® ColorGPS
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资料下载:
EZ-press One Step qRT-PCR Kit (EZB-qRT).pdf 附 (下载 0 次)
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