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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
500
- 英文名:
EZ-Probe qPCR Master Mix for microRNA
- 供应商:
EZBioscience
- 保存条件:
-20°C保存
- 规格:
500 Rxns
EZ-Probe 探针法microRNA qPCR试剂盒是采用探针法qPCR对microRNA表达进行定量检测的专用预混型试剂。试剂盒中包含与EZ-press microRNA Reverse Transcription Kit系列试剂盒(货号:EZB-miRT4和EZB-miRT1)配套的通用型反向引物(Universal 3’ qPCR Primer)和探针(Probe)以及常用内参U6的qPCR正向引物(U6 Primer),仅需自行设计一条正向引物,就能够很好地用于microRNA的定量检测。
产品组分
| 组分 |
EZB-miProbe-S (200 Rxns, 20 μl/Rxn) |
EZB-miProbe (500 Rxns, 20 μl/Rxn) |
|
2× EZ-Probe qPCR Master Mix for microRNA |
2 ml |
5 ml |
|
Probe (10 μM) |
90 µl |
220 μl |
|
Universal 3’ qPCR Primer (10 μM) |
200 μl |
500 μl |
|
U6 Primer (10 μM) |
100 μl |
250 μl |
|
50× ROX Reference Dye 1*1 |
100 µl |
220 µl |
|
50× ROX Reference Dye 2*1 |
100 µl |
220 µl |
注:1*. 用于校正不同孔之间的荧光信号误差。
保存条件
本产品所有组分置于-20°C避光保存。过期日期详见产品标签的有效期信息。
适用的仪器型号(请根据仪器型号选择使用本产品)
|
Do Not Use ROX |
Bio-Rad CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ™5, MyiQ™, MiniOpticon™, Opticon®, Opticon 2, Chromo4™; Roche LightCycler™ 96, Roche LightCycler™ 480; Eppendorf Mastercycler® ep realplex, realplex 2s; Illumina Eco qPCR; Qiagen/Corbett Rotor-Gene® Q, Rotor-Gene® 3000, Rotor-Gene® 6000; Thermo Scientific PikoReal Cycler; Analytikjena qTOWER 3G; Cepheid SmartCycler®; Bioer Linegene 9600; HONGSHI SLAN®-96P. |
|
Use ROX1 (1×) |
ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900, 7900HT, 7900HT Fast; StepOne™, StepOne Plus™. |
|
Use ROX2 (1×) |
ABI 7500, 7500 Fast, Quant-Studio 1, 3, 5, 6, 7, 12K Flex, Dx, ViiA™7; Aligent AriaMx, Stratagene MX4000™, MX3000P™, MX3005P™. |
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文献和实验jerome520 我现在急做一批样本的microRNA检测(只检测一个指标),用茎环法,想要送去公司做。康成生物高手们有听说过吗?还有其他代做的公司推荐吗?谢谢!!! zaoyii 我知道广州伯信生物技术有限公司可以做,技术上也比较成熟,这是网站http://www.biosensechina.com/,你可以去看看或者打电话去问问:020-28069086 jerome520
荧光定量 PCR 的常见异常结果除了扩增曲线异常、融解曲线异常两类常见情况外,qPCR 实验中通常还会遇到以下三大类情况: 1. 复孔间重复性差怎么办? 复孔间重复性差一般会有以下两种情况: (1)CT 值很大,如 CT≥ 30,重复性差属于正常现象。该现象符合泊松分布,即在有效模板量很少的情况下,模板与引物的碰撞存在随机性,直接导致复孔间的 CT 值差异较大。 解决方法:如果融解曲线没有杂峰,无模板阴性对照同目的基因的 △CT 值为 3 or 5 以上,那 CT 值为准确的,可多设置
是由于体系内引物与引物纠缠比引物与模板结合更容易导致的,可以尝试提高模板浓度、退火温度或者降低引物浓度来进行改善; 另外,当目的基因表达量极低时,染料法容易形成引物二聚体产物影响实验结果,此时,建议使用探针法定量。 (2)杂峰在主峰之后,非引物二聚体 上图这种情况就是非特异性扩增,可能是引物特异性不好引起的,也可能是空气中有气溶胶污染所导致。 大家可以先增加退火温度再试试看,如果没有改善,那么就需要重新更换引物啦。为了避免这种麻烦,小 V 建议大家在进行 qPCR 实验之前,就对自己的引物












