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- 2025年07月08日
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22
- 英文名：
详见说明书
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详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
1mL(10mM)|5mg
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。
产品名称：MMP9和ADAM10抑制剂(GI254023X)说明
英文名称：GI254023X
产品规格：1mL(10mM)|5mg
发货周期：1～3天
GI254023X是一种有效的MMP9和ADAM10抑制剂,IC50s分别为2.5和5.3nM。
注：本品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他用途！
CAS号：260264-93-5
别名：GI4023;SRI028594
纯度：99.67%
分子量：391.5
储存条件：-20℃，有效期2年，溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
使用方法:
1. 悬浮细胞，2000rpm离心5min收集细胞;对于贴壁细胞，要用不含EDTA的胰酶消化细胞，胰酶消化时间不宜过长或过短(过长细胞膜破碎，造成假阳性，过短，细胞黏连影响检测)最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时，吸除胰酶消化液，加入细胞培养液终止消化，2000rpm离心5min收集细胞。
2. 4℃预冷PBS，洗涤细胞2次（2000rpm x 5min）,收集细胞2～5×105 。
3. 离心弃上清，加入500μL结合缓冲液，轻轻吹打重悬细胞。
4. 加入5μL Annexin V-FITC，轻轻吹打混匀，加入5μL PI 轻轻吹打混匀,室温避光孵育5-15min。(PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,时间允许，可以在检测前5分钟加入PI)
5. 流式细胞仪检测或荧光显微镜观察。最好在1h内检测。
注意事项：
MMP9和ADAM10抑制剂(GI254023X)说明尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
硬脂基基化，英文名或英文缩写：STAB，级别：色谱用，26～35目，规格：1克
拂化银 Silvqr fluoridq 7
9HFluorene9carboxamide 7
天麻素 Gastrodin (≥98%,HPLC) 62 20MG 标准品
DL酸/DLα酸/ DL初油基酸/DLα丝析酸/DLAlanine BR，98.5% 25克 国产/进口
硬脂酸25克
2303间紫;间酚紫;间磺酞MCresol purple
柠檬酸钠shēng huà shì jì容量：25克
土槿D Pseudolaric acid D (HPLC,≥98%) 10286 5MG 通用试剂
依思明蓝 IscMin bluq;Brillicnt sky bluq 5G;C.I. 700 63
AGAROSEGELLOADINGDYE,6X6X核酸电泳上样缓冲液,%可超级5MLRT
37L高本酸LHomopxenylalanine
乳白蛋白，英文名或英文缩写：αLactalbumin，级别：BR，50u/mg，规格：1克
1,1,2三录烷 1,1,2Trichloroqthcnq;Vinyl trichloridq;βTrichloroqthcnq 002
麦芽糖糊精 Mcltodqxtrin 9020366
人蛋白S(Protein S)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠B细胞淋巴瘤-XL(Bcl-xl)免疫试剂盒 Mouse B-cell lymphoma-exa large,Bcl-xl ELISA kit
脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)ELISA试剂盒 ，英文名： DNase-Ⅰ ELISA Kit
MouseProAialNaiureticPeptide,Pro-ANPELISA试剂盒小鼠前心肽(Pro-ANP)ELISA试剂盒规格：96T/48T
ChickenEpid
MMP9和ADAM10抑制剂(GI254023X)说明人抗补体1q抗体(C1q)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠基质金属蛋白酶13(MMP-13)免疫试剂盒 Mouse maix metalloproteinase 13,MMP-13 ELISA kit
乙醇脱氢酶(ADH)ELISA试剂盒 ，英文名： ADH ELISA Kit
Mouseangiotensinogen,aGTELISA试剂盒小鼠血管紧张素原(aGT)ELISA试剂盒规格：96T/48T
ELISAKitGH小鼠促性腺激素释放激素规格：48T/96T
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培养操作：
1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.
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文献和实验之一。下面简介说明一下什么是FASTA格式。 Fasta格式开始于一个标识符：">"，然后是一行描述，下面是一行行的序列。每一行最好不要超过80个字母。 如： >gi|532319|pir|TVFV2E|TVFV2E envelope protein ELRLRYCAPAGFALLKCNDADYDGFKTNCSNVSVVHCTNLMNTTVTTGLLLNGSYSENRT
Cell Metabo: 另辟蹊径！武汉大学李红良等团队合作发现 2 型糖尿病治疗新靶点
化突变体工具和染色质免疫沉淀技术，发现 NLK 的磷酸化功能可以促进 CRTC2 和 FOXO1 的核输出，导致 CRTC2 的蛋白酶依赖性降解，抑制 FOXO1 的自我转录活性和表达，从而降低糖异生关键酶基因表达。图片来源： Cell Metabolism 3. NLK 在体内葡萄糖稳态的生理和病理调节中充当重要角色 随后，研究团队使用 Ad-GFP、Ad-NLK 或 Ad-K167M 的过表达腺病毒处理 C57BL/6 小鼠。体内实验结果说明，过表达 NLK 足以抑制肝糖异生，并以激酶依赖的方式
°C ）中进行。细胞培养基为生长培养基，细胞接种密度是 1-2 x 104 细胞每孔，接种于96孔E-Plates 中，并通过xCELLigence 系统进行过夜监测，直至细胞生长至接近满板，复孔检测。预先在另一普通96孔板中每孔中添加 2 µl 药物，并储存于 -20℃。待细胞培养 18-24 小时后，进行药物稀释反应。将药物融解，并添加 132 µl 检测缓冲液（1 x HBSS，Sigma H8264、20mM HEPES，Cellgro 25-060-Cl、0.1% BSA，Fisher
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