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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
56
- 英文名:
BL21(AI) 感受态细胞
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海博湖
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
100ul*50
1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
产品描述:
| 产品名称 | 包装 | 分类 |
| BL21(AI) 感受态细胞100ul*50 | 100ul*50 | 表达感受态细胞 |
BL21(AI) 感受态细胞100ul*50操作方法:
1. DH5α感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰中并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少15小时。
同一批感受态细胞,用含目的片段的T载体质粒转化(阳性对照)能长出密密麻麻的菌落,而用另一种载体和目的片段的连接产物转化,却一个菌都没长出来,重复了三次都这样。请问这是感受态细胞的制作不过关,还是连接出了问题?哪个可能性大些?
答:应该是连接的问题。所有连接反应建议同时转化酶切后的质粒作为另一个阴性对照,确定酶切是否完全。同时连接前请确定质粒和片段浓度达到最小连接量的要求。
感受态细胞放到-80冰箱了有半年了,还能用来转化质粒吗?
答:如-80冰箱储存过程中没有发生冻融的情况,是可以用来转化的,但是由于冻存时间过长,转化效率会有所下降,如果用于普通的质粒重转或TA克隆等高效连接体系也是可以的,如珍贵的样品请选用较为新鲜的感受态细胞。
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Hurt-78细胞,人T细胞淋巴瘤 小鼠胚胎成纤维细胞,3T3-swiss albino细胞 人肺泡上皮细胞cDNAHPAEpiC cDNA蛋白激酶仰制剂KT5823(>97%(HPLC),BC)KT-5823质量规格:>97%(HPLC),BC
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LAMP3 Others Cynomolgus 食蟹猴 LAMP3 / DC-LAMP 人细胞裂解液 (阳性对照) 吡哌酸(标准品)Pipemidic acid质量规格:供检查用
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SPC-A1细胞,人肺腺癌细胞 绿猴肾细胞,Vero细胞 CM-M034小鼠肝动脉内皮细胞完全培养基100mL鸦胆子苦醇(标准品)(+)-Brusatol质量规格:HPLC>98%,标准品
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维生素 E, 生育酚 Vitamin E,dl-α-tocopherol 质量规格:>98%,油状 大鼠糖化血红蛋白A1c(GHbA1c)免疫试剂盒 Rat Glycated hemoglobin A1c,GHbA1c ELISA Kit
司他夫定 Stavudine 质量规格:>98,BR,可用于细胞培养 大鼠糖类抗原125(CA125)免疫试剂盒 Rat Carbonhydrate Aigen 125,CA125 ELISA Kit
司他夫定(标准品) Stavudine 质量规格:>98,标准品 大鼠糖类抗原199(CA199)免疫试剂盒 Rat Carbonhydrate Aigen,CA199 ELISA Kit
吗氯贝胺 Moclobemide 质量规格:>99%,BR,可用于细胞培养 大鼠糖皮质激素受体α(GR-α)ELISA检测试剂盒Ratglucocoicoidreceptor-α,GR-αELISAKit 96T/48T
吗氯贝胺(标准品) Moclobemide 质量规格:>98%,标准品 大鼠糖皮质激素受体β(GR-β)ELISA检测试剂盒Ratglucocoicoidreceptor-β,GR-βELISAKit 96T/48T
黄芪甲苷(标准品) Astragaloside IV 质量规格:>98%,分析标准品 大鼠糖皮质类受体(GR)ELISA检测试剂盒Ratglucocoicoidreceptor,GRELISAKit 96T/48T
黄芪甲苷 Astragaloside IV 质量规格:>98%,BR 大鼠糖皮质类受体(GR)免疫试剂盒 Rat glucocoicoid receptor,GR ELISA Kit
那格列奈(标准品) Nateglinide 质量规格:HPLC>99%,标准品 大鼠糖缺失性转铁蛋白(CDT)免疫试剂盒 Rat carbohydrate-deficie ansferrin,CDT ELISA Kit
BL21(AI) 感受态细胞100ul*50大鼠糖蛋白130(gp130)ELISA检测试剂盒Ratglucoprotein130,gp130 96T/48T 盐酸替罗非班 Tirofiban HCl 质量规格:>99%,一水物,BR
大鼠糖蛋白130(gp130)免疫试剂盒 Rat glucoprotein 130,gp130 ELISA KIT 盐酸替罗非班(标准品) Tirofiban HCl 质量规格:HPLC>99,标准品
大鼠糖化血红蛋白A1c(GHbA1c)ELISA检测试剂盒RatGlycatedhemoglobinA1c,GHbA1c 96T/48T 普鲁兰糖;普鲁兰多糖 Pullulan 质量规格:Viscosity100-180 mPa-s;BR
大鼠糖化血红蛋白A1c(GHbA1c)免疫试剂盒 Rat Glycated hemoglobin A1c,GHbA1c ELISA Kit 维生素 E, 生育酚 Vitamin E,dl-α-tocopherol 质量规格:>98%,油状
大鼠糖类抗原125(CA125)免疫试剂盒 Rat Carbonhydrate Aigen 125,CA125 ELISA Kit 司他夫定 Stavudine 质量规格:>98,BR,可用于细胞培养
大鼠糖类抗原199(CA199)免疫试剂盒 Rat Carbonhydrate Aigen,CA199 ELISA Kit 司他夫定(标准品) Stavudine 质量规格:>98,标准品
大鼠糖皮质激素受体α(GR-α)ELISA检测试剂盒Ratglucocoicoidreceptor-α,GR-α 96T/48T 吗氯贝胺 Moclobemide 质量规格:>99%,BR,可用于细胞培养
大鼠糖皮质激素受体β(GR-β)ELISA检测试剂盒Ratglucocoicoidreceptor-β,GR-β 96T/48T 吗氯贝胺(标准品) Moclobemide 质量规格:>98%,标准品
大鼠糖皮质类受体(GR)ELISA检测试剂盒Ratglucocoicoidreceptor,GR 96T/48T 黄芪甲苷(标准品) Astragaloside IV 质量规格:>98%,分析标准品
大鼠糖皮质类受体(GR)免疫试剂盒 Rat glucocoicoid receptor,GR ELISA Kit 黄芪甲苷 Astragaloside IV 质量规格:>98%,BR
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【交流】转载:JM109,DH5a,BL21这些感受态有何区别
1:DH5a菌株 DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时,可与载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α-互补。可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。 基因型:F-,φ80dlacZΔM15,Δ(lacZYA-argF)U169,deoR,recA1,endA1,hsdR17(rk-,mk+),phoA,supE44,λ-,thi-1,gyrA96,relA1 2:BL21(DE3) 菌株 该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动
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