HB101 感受态细胞100ul*10

HB101 感受态细胞100ul*10

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  • 博湖
  • BH-G2048
  • 进口、国产
  • 2025年07月12日
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      28

    • 英文名

      HB101 感受态细胞

    • 保质期

      详见说明书

    • 供应商

      上海博湖

    • 保存条件

      低温冷藏

    • 规格

      100ul*10

    HB101 感受态细胞100ul*10注意事项:
    1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10--
    2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡,气泡会增加弧光放电风险。
    3.   DNA 不纯或存在盐,乙醇,蛋白及缓冲液等污染时,转化效率急剧下降。 
    4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导,增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
    5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率,推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍,转化效率下降一个 数量级。 --
    6. 对于连接产物转化,转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物,保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率,增加弧光放电的风险。
    7. 混入质粒时应轻柔操作,吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm)  避免用
    力过猛,以免剪切力过大损伤细胞膜,降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
    8.电击感受态细胞保存在-80以下,高于-80超期储存会导致转化效率会下降。
    产品名称:HB101 感受态细胞100ul*10
    规格:100ul*10
    分类:克隆感受态细胞
    保存条件(保质期):   -806个月)

    HB101 感受态细胞100ul*10
    HB101 感受态细胞100ul*10操作说明:
    1. 0.1 cm 电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上 5 分钟,待其沥干水分,正置 5 分钟,使乙醇充分挥发,
    待乙醇挥发干净立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖,冰中静置 5 分钟充分降温。
    2. -80保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟,待其融化,加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀,避免产生气泡,立即插入冰中。 --
    A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19   --
    B. 对于连接产物,请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬,DNA 浓度 不超过 100ng/μl,体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
    3. 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中,避免产生气泡,盖上杯盖--
    4. 启动电转仪,设置参数:C=25 μFPC=200 ΩV=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数,也可按所用电转仪推 荐的参数操作),将电击杯快速放入电转槽中,电击完成快速插入冰中。--
    5. 2 分钟后从冰中取出电击杯,放室温,加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基(室温),用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后,转移到 50ml 离心管(BD Falcon50ml 锥形离心管等),向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml 37225 rpm 复苏 60 分钟。--
    6. 5000rpm 离心一分钟收菌,重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上(因菌量较大,若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个)。将平板倒置放于 37培养箱过夜培养 13-17 小时。
    角膜内皮细胞Many types of cells包装:5 × 105(1ml)优级真空泵油(Viscosity Grade 100)Vacuum pump oil质量规格:Viscosity Grade 100

    小鼠骨髓间充质干细胞(EGFP标记) 人肺腺癌细胞,SW 1271[SW-1271;SW1271]细胞 LLC Lewis(肺癌细胞)优级真空泵油(Viscosity Grade 150)Vacuum pump oil质量规格:Viscosity Grade 150
    人神经母细胞瘤细胞;BE(2)-M17紫尿酸 一水合物(97%)Violuric acid monohydrate质量规格:0.97
    TIMD4 Others Mouse 小鼠 TIMD4 / TIM4 人细胞裂解液 (阳性对照) 生育酚乙酸酯(标准品)Vitamin E acetate质量规格:分析标准品
    中国仓鼠卵巢细胞;TPO-CHO-I1效唑(分析标准品97.5%)Uniconazole质量规格:分析标准品97.5%
    人小肠粘膜上皮细胞完全培养基 100mL达托霉素Daptomycin质量规格:≥930μg/mg,BR,可用于细胞培养

    P388细胞,小鼠白血病细胞 空肠弯曲杆菌 大额牛皮肤成纤维样细胞;BOS-1达托霉素(标准品)Daptomycin质量规格:效价测定
    CCL20 Protein Mouse 重组小鼠 CCL20 / MIP-3 alpha 蛋白 (His 标签)盐酸柔红霉素Daunorubicin HCl质量规格:度大于97%含量84.0-102%,USP30
    P815(小鼠肥大细胞瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 CD1B & B2M Heterodimer 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸柔红霉素(标准品)Daunorubicin HCl质量规格:HPLC98%,标准品
    人结直肠腺癌细胞;HCT 116 [HCT116]盐酸柔红霉素(进口)Daunorubicin HCl质量规格:USP,进分sigmaD8809
    硬脂酸钠(>95%,BR)  Sodium stearate  质量规格:>95%,BR 寡核苷酸探针同位素法DNA斑点杂交完全试剂盒5

    硫代硫酸钠无水(>98.5%,BC)  Sodium thiosulfate anhydrous  质量规格:>98.5%,BC 寡核苷酸探针同位素法DNA南方杂交完全试剂盒5
    Sulfo NHS LC Biotin  Sulfo NHS LC Biotin  质量规格:BR 寡核苷酸探针同位素法RNA北方杂交完全试剂盒5
    Sulfo NHS SS Biotin  Sulfo NHS SS Biotin  质量规格:BR 光镜样品固着液(10%Formalin固着液)50毫升
    四乙酰核糖(>98% (HPLC),BC)  Tetraacetylribose  质量规格:>98% (HPLC),BC 胱蛋白酶抑制剂(CystatinC)定量检测试剂盒50
    酪氨酸脱羧酶  Tyrosine decarboxylase  质量规格:>0.1 U/mg,BC 果菜D-葡萄糖酸内脂比色法定量检测试剂盒20
    维多利亚蓝 R  Victoria blue R  质量规格:染料含量:>80%,BS 果菜D-葡萄糖酸盐比色法定量检测试剂盒20
    α-酮戊二酸单钾盐(>98%BR)  α-Ketoglutaric acid potassium salt  质量规格:>98%BR 果菜L-天门冬酰胺化学比色法定量检测试剂盒20
    1-环己基二乙酸单酰胺(>98%BR)  1,1-Cyclohexanediacetic acid monoamide  质量规格:>98%BR 果菜L-天门冬酰胺酶偶联反应比色法定量检测试剂盒20
    1,2-乙二硫醇(>98.5%BR)  1,2-Ethanedithiol  质量规格:>98.5%BR 果菜比色法定量检测试剂盒20
    HB101 感受态细胞100ul*10寡核苷酸探针非同位素HRP化学发光法RNA北方杂交完全试剂盒5 磷钨酸钠(>98%,BC)  Sodium phosphotungstate, hydrate  质量规格:>98%,BC

    寡核苷酸探针同位素法DNA斑点杂交完全试剂盒5 硬脂酸钠(>95%,BR)  Sodium stearate  质量规格:>95%,BR
    寡核苷酸探针同位素法DNA南方杂交完全试剂盒5 硫代硫酸钠无水(>98.5%,BC)  Sodium thiosulfate anhydrous  质量规格:>98.5%,BC
    寡核苷酸探针同位素法RNA北方杂交完全试剂盒5 Sulfo NHS LC Biotin  Sulfo NHS LC Biotin  质量规格:BR
    光镜样品固着液(10%Formalin固着液)50毫升 Sulfo NHS SS Biotin  Sulfo NHS SS Biotin  质量规格:BR
    胱蛋白酶抑制剂(CystatinC)定量检测试剂盒50 四乙酰核糖(>98% (HPLC),BC)  Tetraacetylribose  质量规格:>98% (HPLC),BC
    果菜D-葡萄糖酸内脂比色法定量检测试剂盒20 酪氨酸脱羧酶  Tyrosine decarboxylase  质量规格:>0.1 U/mg,BC
    果菜D-葡萄糖酸盐比色法定量检测试剂盒20 维多利亚蓝 R  Victoria blue R  质量规格:染料含量:>80%,BS
    果菜L-天门冬酰胺化学比色法定量检测试剂盒20 α-酮戊二酸单钾盐(>98%BR)  α-Ketoglutaric acid potassium salt  质量规格:>98%BR
    果菜L-天门冬酰胺酶偶联反应比色法定量检测试剂盒20 1-环己基二乙酸单酰胺(>98%BR)  1,1-Cyclohexanediacetic acid monoamide  质量规格:>98%BR
    HB101 感受态细胞100ul*10培养基及培养冻存条件准备:
    1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640GIBCO,货号21875-091)90%;优质胎牛血清,10%
    2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5% 温度:37,培养箱湿度为70%-80%
    3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。

     

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