MC1061F- 感受态细胞100ul*10

产品名称：MC1061F- 感受态细胞100ul*10
规格：100ul*10
分类：克隆感受态细胞
保存条件（保质期）：   -80℃（6个月）

MC1061F- 感受态细胞100ul*10培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
MC1061F- 感受态细胞100ul*10注意事项：
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10。--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡，气泡会增加弧光放电风险。
3.  当 DNA 不纯或存在盐，乙醇，蛋白及缓冲液等污染时，转化效率急剧下降。 
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导，增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率，推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍，转化效率下降一个 数量级。 --
6. 对于连接产物转化，转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物，保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率，增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作，吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm)  避免用
力过猛，以免剪切力过大损伤细胞膜，降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80℃以下，高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
MC1061F- 感受态细胞100ul*10操作说明：
1. 0.1 cm 电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上 5 分钟，待其沥干水分，正置 5 分钟，使乙醇充分挥发，
待乙醇挥发干净立即插入冰中，压实冰面，电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖，冰中静置 5 分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟，待其融化，加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀，避免产生气泡，立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19；   --
B. 对于连接产物，请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬，DNA 浓度 不超过 100ng/μl，体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 用 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中，避免产生气泡，盖上杯盖--。
4. 启动电转仪，设置参数：C=25 μF，PC=200 Ω，V=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数，也可按所用电转仪推 荐的参数操作），将电击杯快速放入电转槽中，电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯，放室温，加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基（室温），用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后，转移到 50ml 离心管（BD Falcon50ml 锥形离心管等），向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml。 37℃，225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌，重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上（因菌量较大，若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个）。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养 13-17 小时。
中国仓鼠肺细胞;CHL乙硫异烟胺,硫异烟胺（标准品）Ethionamide质量规格：HPLC>98%,标准品
人髓核细胞(HNPC)(5×105)依曲韦林Etravirine质量规格：>98%
CL-0083FaDu(人咽鳞癌细胞)5×106cells/瓶×2法莫替丁Famotidine质量规格：>98%
小鼠垂体瘤细胞;GT1-1 大鼠角膜成纤维细胞完全培养基 100mL法莫替丁(标准品)Famotidine质量规格：含量测定
BIU-87/Adr 人膀胱癌阿霉素耐药株非布索坦Febuxostat质量规格：≥99%
人急性淋巴母细胞性白血病细胞;MOLT-4布地奈德（标准品）Budesonide质量规格：HPLC>98%,标准品
FGFR1 Others Human 人 FGFR1 / CD331 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 亚叶酸钙Calcium Folinate质量规格：>98%，水合物,BR
CM-H110人皮肤肥大细胞完全培养基100mL亚叶酸钙（标准品）Calcium Folinate质量规格：>98%,含量测定
5-8F, 人高转移鼻咽癌细胞系 淋巴瘤,EL4IL-2细胞 PC-12(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤)喜树碱Camptothecin质量规格：> 99%,喜树提取
小鼠浆细胞瘤;MPC-11喜树碱（标准品）Camptothecin质量规格：HPLC≥99%,标准品
乙二醇双[4-(乙氧羰基)苯基]醚(>98.0%(GC))  Ethylene Glycol Bis[4-(ethoxycarbonyl)phenyl] Ether  质量规格：>98.0%(GC) 英文名称HumanangiotensinogenELISAKit人血管紧张素原(aGT)规格：96T/48T
乙二醇双(4-羧苯基)醚(>95.0%(T))  Ethylene Glycol Bis(4-carboxyphenyl) Ether  质量规格：>95.0%(T) 英文名称HumanangiotensionⅠELISAKit人血管紧张素I(AngI)规格：96T/48T
9,9-双[4-(2-羟乙氧基)苯基]芴(>98.0%(GC))  9,9-Bis[4-(2-hydroxyethoxy)phenyl]fluorene  质量规格：>98.0%(GC) 英文名称HumanangiotensionIIELISAKit人血管紧张素II(ANGII)规格：96T/48T
pre-ELM-11(>98.0%(T))  pre-ELM-11  质量规格：>98.0%(T) 英文名称HumanansferrieceptorELISAKit人转铁蛋白受体(TFR)ELISA试剂盒规格：96T/48T
苯均四酸(>98.0%(T))  Pyromellitic Acid  质量规格：>98.0%(T) 英文名称HumanansformingGrowthfactorαELISAKIT人转化生长因子α(TGFα)规格：96T/48T
1,4-双[(1H-咪唑-1-基)甲基]苯(>98.0%(GC))  1,4-Bis[(1H-imidazol-1-yl)methyl]benzene  质量规格：>98.0%(GC) 英文名称HumanansformingGrowthfactorβ1ELISAkit人转化生长因子β1(TGFβ1)规格：96T/48T
2,2'-二氨基-4,4'-双噻唑(>98.0%(HPLC)(T))  2,2'-Diamino-4,4'-bithiazole  质量规格：>98.0%(HPLC)(T) 英文名称HumanAOPPELISAKit人晚期氧化蛋白(AOPP)规格：96T/48T
1H-咪唑-4,5-二羧酸(>97.0%(HPLC)(T))  1H-Imidazole-4,5-dicarboxylic Acid  质量规格：>97.0%(HPLC)(T) 英文名称Humanapelin-12ELISAKit人apelin-12(apelin-12)规格：96T/48T
2,6-萘二羧酸(>98.0%(GC)(T))  2,6-Naphthalenedicarboxylic Acid  质量规格：>98.0%(GC)(T) 英文名称HumanApelin-12ELISAKIT人Apelin-12规格：96T/48T
1,4-萘二羧酸(>95.0%(T))  1,4-Naphthalenedicarboxylic Acid  质量规格：>95.0%(T) 英文名称HumanApelin-12ELISAKit人Apelin-12规格：96T/48T
MC1061F- 感受态细胞100ul*10英文名称HumanAngiopoietin-1人血管生成素-1(ANG-1)规格：96T/48T 2,4-二氨基-1,3,5-三嗪(>98.0%(T))  2,4-Diamino-1,3,5-triazine  质量规格：>98.0%(T)
英文名称HumanAngiopoietin-2人血管生成素-2(ANG-2)规格：96T/48T 2,4-氨基-6-甲氧基-1,3,5-三嗪(>98.0%(T))  2,4-Diamino-6-methoxy-1,3,5-triazine  质量规格：>98.0%(T)
英文名称HumanAngiotensinIconveingenzyme人血管紧张素I转化酶(ACE)规格：96T/48T 2,4-二氨基-6-二甲氨基-1,3,5-三嗪(>98.0%(T))  2,4-Diamino-6-dimethylamino-1,3,5-triazine  质量规格：>98.0%(T)
英文名称Humanangiotensinogen人血管紧张素原(aGT)规格：96T/48T 乙二醇双[4-(乙氧羰基)苯基]醚(>98.0%(GC))  Ethylene Glycol Bis[4-(ethoxycarbonyl)phenyl] Ether  质量规格：>98.0%(GC)
英文名称HumanangiotensionⅠ人血管紧张素I(AngI)规格：96T/48T 乙二醇双(4-羧苯基)醚(>95.0%(T))  Ethylene Glycol Bis(4-carboxyphenyl) Ether  质量规格：>95.0%(T)
英文名称HumanangiotensionII人血管紧张素II(ANGII)规格：96T/48T 9,9-双[4-(2-羟乙氧基)苯基]芴(>98.0%(GC))  9,9-Bis[4-(2-hydroxyethoxy)phenyl]fluorene  质量规格：>98.0%(GC)
英文名称Humanansferrieceptor人转铁蛋白受体(TFR)ELISA试剂盒规格：96T/48T pre-ELM-11(>98.0%(T))  pre-ELM-11  质量规格：>98.0%(T)
英文名称HumanansformingGrowthfactorα人转化生长因子α(TGFα)规格：96T/48T 苯均四酸(>98.0%(T))  Pyromellitic Acid  质量规格：>98.0%(T)
英文名称HumanansformingGrowthfactorβ1人转化生长因子β1(TGFβ1)规格：96T/48T 1,4-双[(1H-咪唑-1-基)甲基]苯(>98.0%(GC))  1,4-Bis[(1H-imidazol-1-yl)methyl]benzene  质量规格：>98.0%(GC)
英文名称HumanAOPP人晚期氧化蛋白(AOPP)规格：96T/48T 2,2'-二氨基-4,4'-双噻唑(>98.0%(HPLC)(T))  2,2'-Diamino-4,4'-bithiazole  质量规格：>98.0%(HPLC)(T)