Rosetta-gami B(DE3) 感受态细胞100ul

Rosetta-gami B(DE3) 感受态细胞100ul*10注意事项：
1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化，插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。 
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。 
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
产品描述：

产品名称	包装	分类
Rosetta-gami B(DE3) 感受态细胞100ul*10	100ul*10	表达感受态细胞

Rosetta-gami B(DE3) 感受态细胞100ul*10操作方法：
1. DH5α感受态细胞从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA（质粒或连接产物）并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰中并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB)，混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放37℃培养至少15小时。
同一批感受态细胞，用含目的片段的T载体质粒转化（阳性对照）能长出密密麻麻的菌落，而用另一种载体和目的片段的连接产物转化，却一个菌都没长出来，重复了三次都这样。请问这是感受态细胞的制作不过关，还是连接出了问题？哪个可能性大些？
答：应该是连接的问题。所有连接反应建议同时转化酶切后的质粒作为另一个阴性对照，确定酶切是否完全。同时连接前请确定质粒和片段浓度达到最小连接量的要求。
感受态细胞放到-80冰箱了有半年了，还能用来转化质粒吗？
答：如-80冰箱储存过程中没有发生冻融的情况，是可以用来转化的，但是由于冻存时间过长，转化效率会有所下降，如果用于普通的质粒重转或TA克隆等高效连接体系也是可以的，如珍贵的样品请选用较为新鲜的感受态细胞。
杂交瘤(B类);Z172A4C4C6F3G12盐酸左氧氟沙星Levofloxacin HCl质量规格：>98.5%,BR,可用于细胞培养
心房成纤维细胞 (HCFaa)( 5×105 )盐酸左氧氟沙星(标准品)Levofloxacin HCl质量规格：>98%,标准品
CM-M121小鼠角膜内皮细胞完全培养基100mL俾士麦棕,俾士麦棕RBismarck Brown R质量规格：BS
野生型人c-kit受体细胞株;A7d 小鼠肺动脉成纤维细胞完全培养基 100mL1酸泰乐菌素,1酸泰洛星Tylosin Tartrate质量规格：BR
小鼠骨髓间充质干细胞(EGFP标记) Mouse1酸泰乐菌素(标准品)Tylosin Tartrate质量规格：含量测定
人骨骼肌卫星细胞cDNAHSkMSC cDNA苯甲酰乌头原碱（标准品）Benzoylhypacoitine质量规格：HPLC≥98%，标准品
IL12A Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 IL12A / NKSF1 人细胞裂解液 (阳性对照) 苯甲酰乌头原碱（标准品）Benzoylaconine质量规格：HPLC≥98%，标准品
tTA基因修饰的小鼠畸胎瘤细胞(B类);P19-CAG-tTA-3C8蝙蝠葛碱(标准品)Dauricine质量规格：HPLC≥98%，标准品
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-A5 胰蛋白酶(含100mL 酶解缓冲液) 10mL表白桦脂酸(标准品)Epibetulinic acid质量规格：HPLC≥99%，标准品
细胞名称 种属表儿茶素(标准品)Epicatechin (EC)质量规格：HPLC≥98%，标准品
米帕明/丙咪嗪（标准品）  Clomipramine HCL   质量规格：HPLC>98%,标准品 超氧化物歧化酶(SOD)酵母/真菌裂解样品制备试剂盒50
硫酸氢氯吡格雷 I型  Clopidogrel Bisulfate  质量规格：>98%,I型 超氧化物歧化酶(SOD)细胞裂解样品制备试剂盒50
硫酸氢氯吡格雷 II型(标准品)  Clopidogrel Bisulfate  质量规格：>98%,标准品 超氧化物歧化酶(SOD)细胞裂解样品制备试剂盒50
硫酸氢氯吡格雷 II型  Clopidogrel Bisulfate  质量规格：含量97.0%-101.5%，II型 超氧化物歧化酶(SOD)细菌裂解样品制备试剂盒50
萘丁美酮/萘普酮  Nabumetone  质量规格：>99% 超氧化物歧化酶(SOD)植物裂解样品制备试剂盒50
萘丁美酮/萘普酮（标准品）  Nabumetone  质量规格：HPLC>98%,标准品 超氧化物歧化酶(SOD)植物裂解样品制备试剂盒50
地瑞拉韦  Darunavir  质量规格：>98% 超氧化物歧化酶(SOD)组织裂解样品制备试剂盒50
沃氏物  Methoxydienone  质量规格：含量≥85% 超氧化物歧化酶(SOD)组织裂解样品制备试剂盒50
DL-α-羟基戊二酸二钠  DL-α-Hydroxyglutaric acid disodium salt   质量规格：98%,GC,进分sigma 94577 超氧阴离子清除剂TEMPOL溶液1毫升/500毫摩尔
地美胺  Demecarium Bromide   质量规格：>99%,BR 沉淀法去内毒素试剂盒20
Rosetta-gami B(DE3) 感受态细胞100ul*10超氧化物歧化酶(SOD)活性酶动力比色法定量检测试剂盒(含标准样)50 米帕明/丙咪嗪  Clomipramine HCL   质量规格：>99%,BR
超氧化物歧化酶(SOD)酵母/真菌裂解样品制备试剂盒50 米帕明/丙咪嗪（标准品）  Clomipramine HCL   质量规格：HPLC>98%,标准品
超氧化物歧化酶(SOD)细胞裂解样品制备试剂盒50 硫酸氢氯吡格雷 I型  Clopidogrel Bisulfate  质量规格：>98%,I型
超氧化物歧化酶(SOD)细胞裂解样品制备试剂盒50 硫酸氢氯吡格雷 II型(标准品)  Clopidogrel Bisulfate  质量规格：>98%,标准品
超氧化物歧化酶(SOD)细菌裂解样品制备试剂盒50 硫酸氢氯吡格雷 II型  Clopidogrel Bisulfate  质量规格：含量97.0%-101.5%，II型
超氧化物歧化酶(SOD)植物裂解样品制备试剂盒50 萘丁美酮/萘普酮  Nabumetone  质量规格：>99%
超氧化物歧化酶(SOD)植物裂解样品制备试剂盒50 萘丁美酮/萘普酮（标准品）  Nabumetone  质量规格：HPLC>98%,标准品
超氧化物歧化酶(SOD)组织裂解样品制备试剂盒50 地瑞拉韦  Darunavir  质量规格：>98%
超氧化物歧化酶(SOD)组织裂解样品制备试剂盒50 沃氏物  Methoxydienone  质量规格：含量≥85%
超氧阴离子清除剂TEMPOL溶液1毫升/500毫摩尔 DL-α-羟基戊二酸二钠  DL-α-Hydroxyglutaric acid disodium salt   质量规格：98%,GC,进分sigma 94577