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- 详细信息
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- 技术资料
- 库存:
47
- 英文名:
MSU440 电击感受态细胞
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海博湖
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
50ul*10
MSU440 电击感受态细胞50ul*10注意事项:
1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
产品描述:
MSU440 电击感受态细胞50ul*10操作方法:
1. DH5α感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰中并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少15小时。
同一批感受态细胞,用含目的片段的T载体质粒转化(阳性对照)能长出密密麻麻的菌落,而用另一种载体和目的片段的连接产物转化,却一个菌都没长出来,重复了三次都这样。请问这是感受态细胞的制作不过关,还是连接出了问题?哪个可能性大些?
答:应该是连接的问题。所有连接反应建议同时转化酶切后的质粒作为另一个阴性对照,确定酶切是否完全。同时连接前请确定质粒和片段浓度达到最小连接量的要求。
感受态细胞放到-80冰箱了有半年了,还能用来转化质粒吗?
答:如-80冰箱储存过程中没有发生冻融的情况,是可以用来转化的,但是由于冻存时间过长,转化效率会有所下降,如果用于普通的质粒重转或TA克隆等高效连接体系也是可以的,如珍贵的样品请选用较为新鲜的感受态细胞。
TNFSF9 Others Rat 大鼠 4-1BBL / CD137L / TNFSF9 人细胞裂解液 (阳性对照) 溴螨酯标准溶液(100μg/ml,u=2%)Bromopropylate solution质量规格:100μg/ml,u=2%
大鼠肺微血管内皮细胞完全培养基 100mL溴螨酯标准溶液(10μg/ml,u=2%)Bromopropylate solution质量规格:10μg/ml,u=2%
A9细胞,小鼠皮下结缔组织细胞 HCC1428(人癌细胞) 非洲绿猴肾细胞系/HCV-C;Vero-HCV-C溴硝醇(标准品)Bronopol质量规格:分析标准品
表皮生长因子氟草胺(标准品)Benfluralin质量规格:分析标准品
Ishikawa(人子宫内膜癌细胞) 5×106cells/瓶×2 滑膜细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)苯并(k)荧蒽(标准品)Benzo(k)fluoranthene质量规格:分析标准品
ERBB2 Others Human 人 HER2 / ErbB2 / CD340 (676-1255) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 胡萝卜苷(标准品)Daucosterol质量规格:HPLC≥98%,标准品
CM-R062大鼠肾小管上皮细胞完全培养基100mLVX11eVX-11e质量规格:>98%,BR
JEC, 人子宫内膜腺癌细胞系 胚肺细胞,SL-7细胞 SNU-182(人肝癌细胞)阿格列汀;阿洛利停Alogliptin(SYR-322)质量规格:>98%,BR
小鼠B淋巴细胞杂交瘤细胞;SH3莪术1醇(标准品)Curcumenol质量规格:HPLC≥98%,标准品
IL22RA2 Others Human 人 IL22BP / IL22RA2 人细胞裂解液 (阳性对照) BYL719BYL-719质量规格:>98%,选择性的PI3Kα抑制剂
外消旋心得安-d7 rac Propranolol-d7 质量规格:美国进口 英文名称RatVWFELISAKit大鼠血管性血友病因子(VWF)规格:96T/48T
5-羟基盐酸心得安 5-Hydroxy Propranolol Hydrochloride 质量规格:美国进口 英文名称Ratβ-HCGELISAKit大鼠绒毛膜促性腺激素β(β-HCG)规格:96T/48T
(R)-4-羟基盐酸心得安 (R)-4-Hydroxy Propranolol Hydrochloride 质量规格:美国进口 英文名称Ratβ-HCGELISAKit大鼠绒毛膜促性腺激素β(β-HCG)规格:96T/48T
(S)-4-羟基盐酸心得安 (S)-4-Hydroxy Propranolol Hydrochloride 质量规格:美国进口 英文名称RvatPhospholipidaseA2elisakit大鼠0脂酶A2(sPLA2)规格:96T/48T
(+/-)-4-羟基盐酸心得安 (+/-)-4-Hydroxy Propranolol Hydrochloride 质量规格:美国进口 英文名称RvatPhospholipidaseA2elisakit大鼠0脂酶A2(sPLA2)规格:96T/48T
(+/-)-4'-羟基硫酸心得安 (+/-)-4'-Hydroxy Propranolol Sulfate 质量规格:美国进口 英文名称TGF-β1转移生长因子-β1规格:96T/48T
4-羟基心得安β-D-葡萄糖苷酸 4-Hydroxy Propranolol β-D-Glucuronide 质量规格:美国进口 英文名称ThromboxaneB2人血栓素(TXB2)规格:96T/48T
S(-)-盐酸心得安 S(-)-Propranolol • HCl 质量规格:美国进口 英文名称TIMP-1金属蛋白酶组织抑制因子-1规格:96T/48T
雷洛昔芬-d4 Raloxifene-d4 质量规格:美国进口 英文名称谷氨酸脱羧酶抗体规格:96T/48T
雷洛昔芬6-葡萄糖苷酸 Raloxifene 6-Glucuronide 质量规格:美国进口 英文名称核糖体、P抗体、IgG/M/A规格:96T/48T
MSU440 电击感受态细胞50ul*10英文名称RatVitaminB6大鼠维生素B6(VB6)规格:96T/48T (R)-(+)-盐酸心得安 (R)-(+)-Propranolol hydrochloride 质量规格:美国进口
英文名称RatVitaminC大鼠维生素C(VC)规格:96T/48T 外消旋心得安β-D-葡萄糖苷酸钠盐 rac Propranolol β-D-Glucuronide Sodium Salt 质量规格:美国进口
英文名称RatVWF大鼠血管性血友病因子(VWF)规格:96T/48T 外消旋7-羟基心得安 rac 7-Hydroxy Propranolol 质量规格:美国进口
英文名称RatVWF大鼠血管性血友病因子(VWF)规格:96T/48T 外消旋心得安-d7 rac Propranolol-d7 质量规格:美国进口
英文名称Ratβ-HCG大鼠绒毛膜促性腺激素β(β-HCG)规格:96T/48T 5-羟基盐酸心得安 5-Hydroxy Propranolol Hydrochloride 质量规格:美国进口
英文名称Ratβ-HCG大鼠绒毛膜促性腺激素β(β-HCG)规格:96T/48T (R)-4-羟基盐酸心得安 (R)-4-Hydroxy Propranolol Hydrochloride 质量规格:美国进口
英文名称RvatPhospholipidaseA2大鼠0脂酶A2(sPLA2)规格:96T/48T (S)-4-羟基盐酸心得安 (S)-4-Hydroxy Propranolol Hydrochloride 质量规格:美国进口
英文名称RvatPhospholipidaseA2大鼠0脂酶A2(sPLA2)规格:96T/48T (+/-)-4-羟基盐酸心得安 (+/-)-4-Hydroxy Propranolol Hydrochloride 质量规格:美国进口
英文名称TGF-β1转移生长因子-β1规格:96T/48T (+/-)-4'-羟基硫酸心得安 (+/-)-4'-Hydroxy Propranolol Sulfate 质量规格:美国进口
英文名称ThromboxaneB2人血栓素(TXB2)规格:96T/48T 4-羟基心得安β-D-葡萄糖苷酸 4-Hydroxy Propranolol β-D-Glucuronide 质量规格:美国进口
1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
产品描述:
| 产品名称 | 包装 | 分类 |
| MSU440 电击感受态细胞50ul*10 | 50ul*10 | 发根农杆菌感受态细胞 |
MSU440 电击感受态细胞50ul*10操作方法:
1. DH5α感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰中并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少15小时。
同一批感受态细胞,用含目的片段的T载体质粒转化(阳性对照)能长出密密麻麻的菌落,而用另一种载体和目的片段的连接产物转化,却一个菌都没长出来,重复了三次都这样。请问这是感受态细胞的制作不过关,还是连接出了问题?哪个可能性大些?
答:应该是连接的问题。所有连接反应建议同时转化酶切后的质粒作为另一个阴性对照,确定酶切是否完全。同时连接前请确定质粒和片段浓度达到最小连接量的要求。
感受态细胞放到-80冰箱了有半年了,还能用来转化质粒吗?
答:如-80冰箱储存过程中没有发生冻融的情况,是可以用来转化的,但是由于冻存时间过长,转化效率会有所下降,如果用于普通的质粒重转或TA克隆等高效连接体系也是可以的,如珍贵的样品请选用较为新鲜的感受态细胞。
TNFSF9 Others Rat 大鼠 4-1BBL / CD137L / TNFSF9 人细胞裂解液 (阳性对照) 溴螨酯标准溶液(100μg/ml,u=2%)Bromopropylate solution质量规格:100μg/ml,u=2%
大鼠肺微血管内皮细胞完全培养基 100mL溴螨酯标准溶液(10μg/ml,u=2%)Bromopropylate solution质量规格:10μg/ml,u=2%
A9细胞,小鼠皮下结缔组织细胞 HCC1428(人癌细胞) 非洲绿猴肾细胞系/HCV-C;Vero-HCV-C溴硝醇(标准品)Bronopol质量规格:分析标准品
表皮生长因子氟草胺(标准品)Benfluralin质量规格:分析标准品
Ishikawa(人子宫内膜癌细胞) 5×106cells/瓶×2 滑膜细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)苯并(k)荧蒽(标准品)Benzo(k)fluoranthene质量规格:分析标准品
ERBB2 Others Human 人 HER2 / ErbB2 / CD340 (676-1255) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 胡萝卜苷(标准品)Daucosterol质量规格:HPLC≥98%,标准品
CM-R062大鼠肾小管上皮细胞完全培养基100mLVX11eVX-11e质量规格:>98%,BR
JEC, 人子宫内膜腺癌细胞系 胚肺细胞,SL-7细胞 SNU-182(人肝癌细胞)阿格列汀;阿洛利停Alogliptin(SYR-322)质量规格:>98%,BR
小鼠B淋巴细胞杂交瘤细胞;SH3莪术1醇(标准品)Curcumenol质量规格:HPLC≥98%,标准品
IL22RA2 Others Human 人 IL22BP / IL22RA2 人细胞裂解液 (阳性对照) BYL719BYL-719质量规格:>98%,选择性的PI3Kα抑制剂
外消旋心得安-d7 rac Propranolol-d7 质量规格:美国进口 英文名称RatVWFELISAKit大鼠血管性血友病因子(VWF)规格:96T/48T
5-羟基盐酸心得安 5-Hydroxy Propranolol Hydrochloride 质量规格:美国进口 英文名称Ratβ-HCGELISAKit大鼠绒毛膜促性腺激素β(β-HCG)规格:96T/48T
(R)-4-羟基盐酸心得安 (R)-4-Hydroxy Propranolol Hydrochloride 质量规格:美国进口 英文名称Ratβ-HCGELISAKit大鼠绒毛膜促性腺激素β(β-HCG)规格:96T/48T
(S)-4-羟基盐酸心得安 (S)-4-Hydroxy Propranolol Hydrochloride 质量规格:美国进口 英文名称RvatPhospholipidaseA2elisakit大鼠0脂酶A2(sPLA2)规格:96T/48T
(+/-)-4-羟基盐酸心得安 (+/-)-4-Hydroxy Propranolol Hydrochloride 质量规格:美国进口 英文名称RvatPhospholipidaseA2elisakit大鼠0脂酶A2(sPLA2)规格:96T/48T
(+/-)-4'-羟基硫酸心得安 (+/-)-4'-Hydroxy Propranolol Sulfate 质量规格:美国进口 英文名称TGF-β1转移生长因子-β1规格:96T/48T
4-羟基心得安β-D-葡萄糖苷酸 4-Hydroxy Propranolol β-D-Glucuronide 质量规格:美国进口 英文名称ThromboxaneB2人血栓素(TXB2)规格:96T/48T
S(-)-盐酸心得安 S(-)-Propranolol • HCl 质量规格:美国进口 英文名称TIMP-1金属蛋白酶组织抑制因子-1规格:96T/48T
雷洛昔芬-d4 Raloxifene-d4 质量规格:美国进口 英文名称谷氨酸脱羧酶抗体规格:96T/48T
雷洛昔芬6-葡萄糖苷酸 Raloxifene 6-Glucuronide 质量规格:美国进口 英文名称核糖体、P抗体、IgG/M/A规格:96T/48T
MSU440 电击感受态细胞50ul*10英文名称RatVitaminB6大鼠维生素B6(VB6)规格:96T/48T (R)-(+)-盐酸心得安 (R)-(+)-Propranolol hydrochloride 质量规格:美国进口
英文名称RatVitaminC大鼠维生素C(VC)规格:96T/48T 外消旋心得安β-D-葡萄糖苷酸钠盐 rac Propranolol β-D-Glucuronide Sodium Salt 质量规格:美国进口
英文名称RatVWF大鼠血管性血友病因子(VWF)规格:96T/48T 外消旋7-羟基心得安 rac 7-Hydroxy Propranolol 质量规格:美国进口
英文名称RatVWF大鼠血管性血友病因子(VWF)规格:96T/48T 外消旋心得安-d7 rac Propranolol-d7 质量规格:美国进口
英文名称Ratβ-HCG大鼠绒毛膜促性腺激素β(β-HCG)规格:96T/48T 5-羟基盐酸心得安 5-Hydroxy Propranolol Hydrochloride 质量规格:美国进口
英文名称Ratβ-HCG大鼠绒毛膜促性腺激素β(β-HCG)规格:96T/48T (R)-4-羟基盐酸心得安 (R)-4-Hydroxy Propranolol Hydrochloride 质量规格:美国进口
英文名称RvatPhospholipidaseA2大鼠0脂酶A2(sPLA2)规格:96T/48T (S)-4-羟基盐酸心得安 (S)-4-Hydroxy Propranolol Hydrochloride 质量规格:美国进口
英文名称RvatPhospholipidaseA2大鼠0脂酶A2(sPLA2)规格:96T/48T (+/-)-4-羟基盐酸心得安 (+/-)-4-Hydroxy Propranolol Hydrochloride 质量规格:美国进口
英文名称TGF-β1转移生长因子-β1规格:96T/48T (+/-)-4'-羟基硫酸心得安 (+/-)-4'-Hydroxy Propranolol Sulfate 质量规格:美国进口
英文名称ThromboxaneB2人血栓素(TXB2)规格:96T/48T 4-羟基心得安β-D-葡萄糖苷酸 4-Hydroxy Propranolol β-D-Glucuronide 质量规格:美国进口
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