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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
20
- 英文名:
C58C1 感受态细胞
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海博湖
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
100ul*50
C58C1 感受态细胞100ul*50注意事项:
1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
产品描述:
C58C1 感受态细胞100ul*50操作方法:
1. DH5α感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰中并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少15小时。
同一批感受态细胞,用含目的片段的T载体质粒转化(阳性对照)能长出密密麻麻的菌落,而用另一种载体和目的片段的连接产物转化,却一个菌都没长出来,重复了三次都这样。请问这是感受态细胞的制作不过关,还是连接出了问题?哪个可能性大些?
答:应该是连接的问题。所有连接反应建议同时转化酶切后的质粒作为另一个阴性对照,确定酶切是否完全。同时连接前请确定质粒和片段浓度达到最小连接量的要求。
感受态细胞放到-80冰箱了有半年了,还能用来转化质粒吗?
答:如-80冰箱储存过程中没有发生冻融的情况,是可以用来转化的,但是由于冻存时间过长,转化效率会有所下降,如果用于普通的质粒重转或TA克隆等高效连接体系也是可以的,如珍贵的样品请选用较为新鲜的感受态细胞。
心肌成纤维细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)腺苷3‘,5’-环单1酸钠一水合物Adenosine 3′,5′-cyclic monophosphate sodium salt monohydrate 质量规格:美国进口
SERPINA1A Others Mouse 小鼠 Alpha 1 Aiypsin / SerpinA1a 人细胞裂解液 (阳性对照) 腺苷 5‘-(α,β-亚甲基)二1酸盐,钠盐Adenosine 5'-(α,β-methylene)diphosphate, sodium salt质量规格:美国进口
大鼠癌细胞;SHZ-88 5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯甲基)-N6-苯甲酰基腺苷 N6-Benzoyl-5'-O-DMT-adenosine质量规格:美国进口
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-E2 子宫鳞癌细胞(高分化),HCC 94[HCC941122]细胞 S-180-S2D9细胞,鼠肉瘤细胞8-叠氮腺苷8-Azido Adenosine 质量规格:美国进口
人胚肾二倍体细胞;CCC-HEK-12-肼基腺苷2-Hydrazino Adenosine 质量规格:美国进口
人导管癌细胞;HCC38腺苷 3'-1酸 5'-1酰硫酸锂盐水合物Adenosine 3'-phosphate 5'-phosphosulfate lithium salt hydrate质量规格:美国进口
XCL1 Others Human 人 XCL1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) rac (cis/trans)多奈哌齐N-氧化物rac (cis/trans) Donepezil N-Oxide质量规格:美国进口
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仓鼠/小鼠杂交瘤细胞;145-2C11多佐胺中间体Dorzolamide intermediate质量规格:美国进口
脱氯阿托伐醌 Deschloro Atovaquone 质量规格:美国进口 植物0脂酶D1(PhospholipaseD1)活性比色法定量检测试剂盒20
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庆大霉素C1a Gentamicin C1a 质量规格:美国进口 植物NADPH氧化酶活性比色法定量检测试剂盒20(10样本)
罗氟司特-d3 Roflumilast-d3 质量规格:美国进口 植物N-糖基糖蛋白树脂法化试剂盒5
盐酸布林佐胺 Brinzolamide Hydrochloride 质量规格:美国进口 植物P型ATP酶(PtypeATPase)活性比色法定量检测试剂盒20
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维生素K1-d7 Vitamin K1-d7 质量规格:美国进口 植物S腺苷同型半胱氨酸核苷酶(AdoHcynucleosidase)活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒20
维生素K1 2,3-环氧化物 Vitamin K1 2,3-Epoxide 质量规格:美国进口 植物V型氢ATP酶(H+-ATPase)活性比色法定量检测试剂盒20
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直接细胞克隆两步法逆转录PCR试剂盒100 4'-羟基托莫西汀β-D-葡萄糖苷酸 4'-Hydroxy Atomoxetine β-D-Glucuronide 质量规格:美国进口
植物/ATP酶(Na+/K+-ATPase)活性比色法定量检测试剂盒20 阿托伐醌-d4 Atovaquone-d4 质量规格:美国进口
植物0脂酶D1(PhospholipaseD1)活性比色法定量检测试剂盒20 脱氯阿托伐醌 Deschloro Atovaquone 质量规格:美国进口
植物0脂酶D1(PhospholipaseD1)活性荧光定量检测试剂盒20 盐酸阿扎司琼-d3 Azasetron-d3, Hydrochloride 质量规格:美国进口
植物0脂酶D2(PhospholipaseD2)活性比色法定量检测试剂盒20 Y-25130 盐酸 Y-25130 Hydrochloride 质量规格:美国进口
植物DNA甲基转移酶(MET)总活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒20 去甲基尼扎替丁 Desmethyl Nizatidine 质量规格:美国进口
植物NADPH氧化酶活性比色法定量检测试剂盒20(10样本) 庆大霉素C1a Gentamicin C1a 质量规格:美国进口
植物N-糖基糖蛋白树脂法化试剂盒5 罗氟司特-d3 Roflumilast-d3 质量规格:美国进口
植物P型ATP酶(PtypeATPase)活性比色法定量检测试剂盒20 盐酸布林佐胺 Brinzolamide Hydrochloride 质量规格:美国进口
1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
产品描述:
| 产品名称 | 包装 | 分类 |
| C58C1 感受态细胞100ul*50 | 100ul*50 | 发根农杆菌感受态细胞 |
C58C1 感受态细胞100ul*50操作方法:
1. DH5α感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰中并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少15小时。
同一批感受态细胞,用含目的片段的T载体质粒转化(阳性对照)能长出密密麻麻的菌落,而用另一种载体和目的片段的连接产物转化,却一个菌都没长出来,重复了三次都这样。请问这是感受态细胞的制作不过关,还是连接出了问题?哪个可能性大些?
答:应该是连接的问题。所有连接反应建议同时转化酶切后的质粒作为另一个阴性对照,确定酶切是否完全。同时连接前请确定质粒和片段浓度达到最小连接量的要求。
感受态细胞放到-80冰箱了有半年了,还能用来转化质粒吗?
答:如-80冰箱储存过程中没有发生冻融的情况,是可以用来转化的,但是由于冻存时间过长,转化效率会有所下降,如果用于普通的质粒重转或TA克隆等高效连接体系也是可以的,如珍贵的样品请选用较为新鲜的感受态细胞。
心肌成纤维细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)腺苷3‘,5’-环单1酸钠一水合物Adenosine 3′,5′-cyclic monophosphate sodium salt monohydrate 质量规格:美国进口
SERPINA1A Others Mouse 小鼠 Alpha 1 Aiypsin / SerpinA1a 人细胞裂解液 (阳性对照) 腺苷 5‘-(α,β-亚甲基)二1酸盐,钠盐Adenosine 5'-(α,β-methylene)diphosphate, sodium salt质量规格:美国进口
大鼠癌细胞;SHZ-88 5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯甲基)-N6-苯甲酰基腺苷 N6-Benzoyl-5'-O-DMT-adenosine质量规格:美国进口
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-E2 子宫鳞癌细胞(高分化),HCC 94[HCC941122]细胞 S-180-S2D9细胞,鼠肉瘤细胞8-叠氮腺苷8-Azido Adenosine 质量规格:美国进口
人胚肾二倍体细胞;CCC-HEK-12-肼基腺苷2-Hydrazino Adenosine 质量规格:美国进口
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XCL1 Others Human 人 XCL1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) rac (cis/trans)多奈哌齐N-氧化物rac (cis/trans) Donepezil N-Oxide质量规格:美国进口
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脱氯阿托伐醌 Deschloro Atovaquone 质量规格:美国进口 植物0脂酶D1(PhospholipaseD1)活性比色法定量检测试剂盒20
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C58C1 感受态细胞100ul*50直肠肿瘤标记K-ras粪便检测突变荧光分析试剂盒50 外消旋盐酸托莫西汀 rac Atomoxetine Hydrochloride 质量规格:美国进口
直接细胞克隆两步法逆转录PCR试剂盒100 4'-羟基托莫西汀β-D-葡萄糖苷酸 4'-Hydroxy Atomoxetine β-D-Glucuronide 质量规格:美国进口
植物/ATP酶(Na+/K+-ATPase)活性比色法定量检测试剂盒20 阿托伐醌-d4 Atovaquone-d4 质量规格:美国进口
植物0脂酶D1(PhospholipaseD1)活性比色法定量检测试剂盒20 脱氯阿托伐醌 Deschloro Atovaquone 质量规格:美国进口
植物0脂酶D1(PhospholipaseD1)活性荧光定量检测试剂盒20 盐酸阿扎司琼-d3 Azasetron-d3, Hydrochloride 质量规格:美国进口
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植物DNA甲基转移酶(MET)总活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒20 去甲基尼扎替丁 Desmethyl Nizatidine 质量规格:美国进口
植物NADPH氧化酶活性比色法定量检测试剂盒20(10样本) 庆大霉素C1a Gentamicin C1a 质量规格:美国进口
植物N-糖基糖蛋白树脂法化试剂盒5 罗氟司特-d3 Roflumilast-d3 质量规格:美国进口
植物P型ATP酶(PtypeATPase)活性比色法定量检测试剂盒20 盐酸布林佐胺 Brinzolamide Hydrochloride 质量规格:美国进口
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