M15(pREP4) 感受态细胞100ul*10

M15(pREP4) 感受态细胞100ul*10注意事项：
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10。--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡，气泡会增加弧光放电风险。
3.  当 DNA 不纯或存在盐，乙醇，蛋白及缓冲液等污染时，转化效率急剧下降。 
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导，增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率，推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍，转化效率下降一个 数量级。 --
6. 对于连接产物转化，转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物，保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率，增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作，吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm)  避免用
力过猛，以免剪切力过大损伤细胞膜，降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80℃以下，高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
产品名称：M15(pREP4) 感受态细胞100ul*10
规格：100ul*10
分类：表达感受态细胞
保存条件（保质期）：   -80℃（6个月）

M15(pREP4) 感受态细胞100ul*10操作说明：
1. 0.1 cm 电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上 5 分钟，待其沥干水分，正置 5 分钟，使乙醇充分挥发，
待乙醇挥发干净立即插入冰中，压实冰面，电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖，冰中静置 5 分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟，待其融化，加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀，避免产生气泡，立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19；   --
B. 对于连接产物，请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬，DNA 浓度 不超过 100ng/μl，体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 用 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中，避免产生气泡，盖上杯盖--。
4. 启动电转仪，设置参数：C=25 μF，PC=200 Ω，V=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数，也可按所用电转仪推 荐的参数操作），将电击杯快速放入电转槽中，电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯，放室温，加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基（室温），用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后，转移到 50ml 离心管（BD Falcon50ml 锥形离心管等），向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml。 37℃，225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌，重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上（因菌量较大，若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个）。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养 13-17 小时。
原代平滑肌细胞特制基础无血清培养基Many types of cells包装：500/100ml盐酸美西律（标准品）Mexiletine Hydrochloride质量规格：含量测定
LYN Others Human 人 Lyn Kinase 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 美洛西林钠Mezlocillin sodium质量规格：>96%,CP,BR
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0906美洛西林钠(标准品)Mezlocillin sodium质量规格：HPLC>98%,标准品
CFPAC-1细胞，胰腺癌细胞 鼻咽癌细胞系,SUNE-1亚株-5-8F细胞 CL-0322Beta-TC-6(小鼠胰岛素瘤胰岛β细胞)5×106cells/瓶×2米非司酮Mifepristone质量规格：>98.5%,BR
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO DUX B11 Carrying pBSCRLc/pTCSgpt clone 35.6米非司酮（标准品）Mifepristone质量规格：HPLC>98%,标准品
人肝窦内皮细胞HHSEC6-巯基嘌呤-2'-脱氧核苷6-Mercaptopurine-2'-deoxyriboside质量规格：美国进口
SERPINA6 Others Human 人 SerpinA6 / CBG 人细胞裂解液 (阳性对照) 奥美拉唑砜Omeprazole Sulfone质量规格：美国进口
HSF 人皮肤成纤维样细胞奥美拉唑N-氧化物Omeprazole N-Oxide质量规格：美国进口
CM-H131人角膜成纤维细胞完全培养基100mL4-去甲氧基-4-硝基奥美拉唑硫化物4-Desmethoxy-4-nitro Omeprazole Sulfide质量规格：美国进口
QGY-7701, 人肝癌细胞5-羟基奥美拉唑钠盐5-Hydroxy Omeprazole Sodium Salt质量规格：美国进口
盐霉素,沙利霉素  Salinomycin  质量规格：assay 12%~24% 小鼠层粘连蛋白(LN)ELISA试剂盒 ，英文名： LN ELISA Kit
仙茅苷  Curculigoside  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠层粘连蛋白α1(LAMα1)ELISA试剂盒 ，英文名： LAMα1 ELISA Kit
丹皮酚原苷；牡丹酚原甙  Paeonolide  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠层粘连蛋白β1(LAMβ1)ELISA试剂盒 ，英文名： LAMβ1 ELISA Kit
氧化槐定碱(标准品)  oxysophoridine  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠叉头框蛋白03(FoxP3)ELISA试剂盒 ，英文名： FoxP3 ELISA Kit
一叶秋碱 ，一叶萩碱  Securinine  质量规格：HPLC≥98%，对照品 小鼠叉头框蛋白A2(FOXA2)ELISA试剂盒 ，英文名： FOXA2 ELISA Kit
远志口山酮；远志山酮III  Polygalaxanthone III  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠叉头框蛋白M1(FOXM1)ELISA试剂盒 ，英文名： FOXM1 ELISA Kit
雷公藤定碱  Wtlfordine  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠叉头框蛋白O3(FOXO3)ELISA试剂盒 ，英文名： FOXO3 ELISA Kit
三正丁基十四烷基氯化膦  Tributyltetradecylphosphonium chloride  质量规格：50%grade 小鼠叉头框蛋白P3(FOXP3)ELISA试剂盒 ，英文名： FOXP3 ELISA Kit
罗汉果皂苷ⅢA1  mogroside ⅢA1   质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠肠型脂肪酸结合蛋白(FABP2)ELISA试剂盒 ，英文名： FABP2 ELISA Kit
罗汉果皂苷ⅡA2  mogroside II A2  质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)ELISA检测试剂盒Mouseiestinalfattyacidbindingprotein,iFABPELISAKit 96T/48T
M15(pREP4) 感受态细胞100ul*10小鼠层连蛋白/板层素(LN)ELISA检测试剂盒MouseLaminin,LN 96T/48T AZD9291  AZD-9291(free base)  质量规格：>98%,EGFR抑制剂
小鼠层连蛋白/板层素(LN)ELISA试剂盒 ，英文名： LN ELISA Kit AZD9291 Mesylate  AZD-9291 mesylate  质量规格：>98%,EGFR抑制剂
小鼠层粘连蛋白(Laminin)ELISA试剂盒 ，英文名： Laminin ELISA Kit 乳酸链球菌素;乳链菌肽;尼生素  Nisin  质量规格：BR,效价>900IU/MG
小鼠层粘连蛋白(LN)ELISA试剂盒 ，英文名： LN ELISA Kit 盐霉素,沙利霉素  Salinomycin  质量规格：assay 12%~24%
小鼠层粘连蛋白α1(LAMα1)ELISA试剂盒 ，英文名： LAMα1 ELISA Kit 仙茅苷  Curculigoside  质量规格：HPLC≥98%，标准品
小鼠层粘连蛋白β1(LAMβ1)ELISA试剂盒 ，英文名： LAMβ1 ELISA Kit 丹皮酚原苷；牡丹酚原甙  Paeonolide  质量规格：HPLC≥98%，标准品
小鼠叉头框蛋白03(FoxP3)ELISA试剂盒 ，英文名： FoxP3 ELISA Kit 氧化槐定碱(标准品)  oxysophoridine  质量规格：HPLC≥98%，标准品
小鼠叉头框蛋白A2(FOXA2)ELISA试剂盒 ，英文名： FOXA2 ELISA Kit 一叶秋碱 ，一叶萩碱  Securinine  质量规格：HPLC≥98%，对照品
小鼠叉头框蛋白M1(FOXM1)ELISA试剂盒 ，英文名： FOXM1 ELISA Kit 远志口山酮；远志山酮III  Polygalaxanthone III  质量规格：HPLC≥98%，标准品
小鼠叉头框蛋白O3(FOXO3)ELISA试剂盒 ，英文名： FOXO3 ELISA Kit 雷公藤定碱  Wtlfordine  质量规格：HPLC≥98%，标准品
M15(pREP4) 感受态细胞100ul*10培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。