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JM110 感受态细胞100ul*50

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  • 2025年07月08日
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    • 英文名

      JM110 感受态细胞

    • 保质期

      详见说明书

    • 供应商

      上海博湖

    • 保存条件

      低温冷藏

    • 规格

      100ul*50

    产品名称:JM110 感受态细胞100ul*50
    规格:100ul*50
    分类:克隆感受态细胞
    保存条件(保质期):   -806个月)

    产品细节图片1
    JM110 感受态细胞100ul*50培养基及培养冻存条件准备:
    1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640GIBCO,货号21875-091)90%;优质胎牛血清,10%
    2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5% 温度:37,培养箱湿度为70%-80%
    3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
    JM110 感受态细胞100ul*50注意事项:
    1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10--
    2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡,气泡会增加弧光放电风险。
    3.   DNA 不纯或存在盐,乙醇,蛋白及缓冲液等污染时,转化效率急剧下降。 
    4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导,增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
    5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率,推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍,转化效率下降一个 数量级。 --
    6. 对于连接产物转化,转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物,保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率,增加弧光放电的风险。
    7. 混入质粒时应轻柔操作,吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm)  避免用
    力过猛,以免剪切力过大损伤细胞膜,降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
    8.电击感受态细胞保存在-80以下,高于-80超期储存会导致转化效率会下降。
    JM110 感受态细胞100ul*50操作说明:
    1. 0.1 cm 电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上 5 分钟,待其沥干水分,正置 5 分钟,使乙醇充分挥发,
    待乙醇挥发干净立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖,冰中静置 5 分钟充分降温。
    2. -80保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟,待其融化,加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀,避免产生气泡,立即插入冰中。 --
    A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19   --
    B. 对于连接产物,请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬,DNA 浓度 不超过 100ng/μl,体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
    3. 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中,避免产生气泡,盖上杯盖--
    4. 启动电转仪,设置参数:C=25 μFPC=200 ΩV=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数,也可按所用电转仪推 荐的参数操作),将电击杯快速放入电转槽中,电击完成快速插入冰中。--
    5. 2 分钟后从冰中取出电击杯,放室温,加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基(室温),用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后,转移到 50ml 离心管(BD Falcon50ml 锥形离心管等),向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml 37225 rpm 复苏 60 分钟。--
    6. 5000rpm 离心一分钟收菌,重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上(因菌量较大,若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个)。将平板倒置放于 37培养箱过夜培养 13-17 小时。
    STC2 Others Human STC2 / Stanniocalcin 2 人细胞裂解液 (阳性对照) 芝麻林素(标准品)Sesamolin质量规格:HPLC98%,标准品

    腮腺细胞Many types of cells包装:5 × 105(1ml)芝麻素Sesamin质量规格:HPLC98%BR
    BB7.2细胞,人分泌A2抗体B淋巴细胞 KM小鼠子瘤株,U27细胞 人小胶质细胞裂解物HML芝麻素(标准品)Sesamin质量规格:HPLC98%,标准品
    NCTC 1469(小鼠正常肝细胞) 5×106cells/瓶×2槲皮素-3-O-葡萄糖-7-O-鼠李糖苷(标准品)Quercetin 3-O-glucoside-7-O-rhamnoside质量规格:HPLC98%,标准品
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    CD79B Others Rat 大鼠 CD79B / B29 人细胞裂解液 (阳性对照) 稻瘟灵(标准品) Isoprothiolane质量规格:分析标准品,97.5%

    人椎间盘髓核细胞完全培养基 100mL咪唑乙烟酸(标准品)Imazethapyr质量规格:分析标准品,98.5%
    VERO C1008 (E6)细胞,非洲绿猴肾细胞 CHO/dhFr-(中国仓鼠二氢叶酸还原酶缺陷细胞) 小鼠T淋巴瘤细胞(OVA基因修饰);E.G7-OVA异丙隆(标准品) Isoproturon solution质量规格:分析标准品,99.5%
    EFNB2 Protein Canine 重组狗 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His 标签)甲咪唑烟酸(标准品) Imazapic质量规格:分析标准品
    V79(仓鼠肺细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠前胃癌细胞;MFC异标准溶液(10μg/ml,u=6%Iprobenfos standard solution质量规格:10μg/ml,u=6%
    脂酰布洛芬-β-D-葡萄糖苷酸  Ibuprofen Acyl-β-D-glucuronide   质量规格:美国进口 英文名称MousemajorhistocompatibilitycomplexELISAKit小鼠组织相容性复合物(MHC)规格:96T/48T

    外消旋2-羟基布洛芬  rac 2-Hydroxy Ibuprofen  质量规格:美国进口 英文名称MouseMBPELISAKit小鼠髓0脂碱蛋白(MBP)规格:96T/48T
    1-羟基布洛芬(布洛芬杂质))(非对映)  1-Hydroxy Ibuprofen (Ibuprofen Impurity L)(Mixture of Diastereomers)  质量规格:美国进口 英文名称MouseMD2ELISAKit小鼠髓样分化蛋白-2(MD2)规格:96T/48T
    1-含氧的布洛芬  1-Oxo Ibuprofen  质量规格:美国进口 英文名称MouseMGα1ELISAKit小鼠α1微球蛋白(MGα1)规格:96T/48T
    羧酸布洛芬(非对映)  Ibuprofen Carboxylic Acid(Mixture of Diastereomers)  质量规格:美国进口 英文名称MouseMGβ2ELISAKit小鼠β2微球蛋白(MGβ2)规格:96T/48T
    外消旋α-羟基布洛芬  rac α-Hydroxy Ibuprofen  质量规格:美国进口 英文名称MousemicroalbunminuriaELISAKIT小鼠微量白蛋白尿(ALB)规格:96T/48T
    (R)-布洛芬  (R)-Ibuprofen  质量规格:美国进口 英文名称MouseMotilinELISAKit小鼠胃动素(MTL)规格:96T/48T
    (S)-布洛芬  (S)-Ibuprofen  质量规格:美国进口 英文名称MouseNF-kBELISAKit小鼠NF-kB规格:96T/48T
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    1,3-二苄基-5-氟尿嘧啶  1,3-Dibenzyl-5-fluorouracil  质量规格:美国进口 英文名称MouseNN-T4ELISAKit小鼠新生甲状腺素(NN-T4)规格:96T/48T
    JM110 感受态细胞100ul*50英文名称MouseLPS小鼠脂多糖(LPS)规格:96T/48T 脱氢尼索地平  Dehydro Nisoldipine  质量规格:美国进口

    英文名称MouseL-Selectin小鼠L-Selectin规格:96T/48T 4-羟基尼索地平  4-Hydroxy Nisoldipine  质量规格:美国进口
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    英文名称MouseMBP小鼠髓0脂碱蛋白(MBP)规格:96T/48T 外消旋2-羟基布洛芬  rac 2-Hydroxy Ibuprofen  质量规格:美国进口
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    英文名称Mousemicroalbunminuria小鼠微量白蛋白尿(ALB)规格:96T/48T 外消旋α-羟基布洛芬  rac α-Hydroxy Ibuprofen  质量规格:美国进口
    英文名称MouseMotilin小鼠胃动素(MTL)规格:96T/48T (R)-布洛芬  (R)-Ibuprofen  质量规格:美国进口
     

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