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- 2025年07月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
49
- 英文名：
EHA105 感受态细胞
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海博湖
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
100ul*100
EHA105 感受态细胞100ul*100培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
产品名称：EHA105 感受态细胞100ul*100
规格：100ul*100
分类：根癌农杆菌感受态细胞
保存条件（保质期）： -80℃（6个月）
EHA105 感受态细胞100ul*100注意事项：
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10。--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡，气泡会增加弧光放电风险。
3. 当 DNA 不纯或存在盐，乙醇，蛋白及缓冲液等污染时，转化效率急剧下降。
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导，增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率，推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍，转化效率下降一个 数量级。 --
6. 对于连接产物转化，转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物，保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率，增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作，吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm) 避免用
力过猛，以免剪切力过大损伤细胞膜，降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80℃以下，高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
肾动脉平滑肌细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)盐酸丁卡因（标准品）Tetracaine HCl质量规格：HPLC法含量测定
BA/F3细胞，小鼠原B细胞 人浸润性导管癌旁皮肤细胞,CCD-1095Sk细胞 NeuroFectagen? 神经细胞转染试剂盒苯甲唑啉盐酸盐/盐酸妥拉唑林Tolazoline HCl质量规格：>98%,进口原装
非洲绿猴肾细胞;Vero E61酸托特罗定Tolterodine Tartrate质量规格：>98.5%,M受体(毒蕈碱型乙酰胆碱受体)拮抗剂
IL13 Others Human 人 IL-13 / Ierleukin-13 人细胞裂解液 (阳性对照) 1酸托特罗定（标准品）Tolterodine Tartrate质量规格：含量测定
幼蚊细胞;C6/36托吡酯Topiramate质量规格：>99%,BR,可用于细胞培养
犬源细胞地红霉素（标准品）Dirithromycin质量规格：>95%,标准品用于含量测定
小鼠骨髓瘤细胞;P3/NSI/1-Ag4-1 小鼠胎儿表皮角质形成层细胞完全培养基 100mL阿魏酸乙酯（标准品）Ethyl ferulate质量规格：HPLC≥98%，标准品
COS-7L, 非洲绿猴肾成纤维细胞 其它CAPS; 3-(环已胺)丙磺酸CAPS质量规格：>99%
ACHE Others Mouse 小鼠 AcetylCHOlinesterase / ACHE 人细胞裂解液 (阳性对照) 巴豆苷（标准品）Crotonoside质量规格：HPLC≥98%，标准品
人肺间充质干细胞裂解物HPMSCL巴西苏木素（标准品）Brazilin质量规格：HPLC≥98%，标准品
香紫苏醇 GC≥98% 20mg HumanPerforin/Pore-formingprotein,PF/PFPELISAKit 人穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
香紫苏二醇 GC≥98% 20mg HumanPhosphoglucomase,PGMELISAKit 人0酸葡萄糖变位酶(PGM)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
香紫苏内酯 GC≥98% 20mg HumanPhospholipaseC,PLCELISAKit 人0酯酶C(PLC)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
消旋山莨菪碱 HPLC≥98% 20mg HumanPhosphotylinosital3kinase,PI3KELISAKit 人0酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
小白菊内酯 HPLC≥98% 20mg Humanplasmin/fibrinolysin,PL/FbnELISAKit 人纤溶酶/纤维蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
小檗胺 HPLC≥98% 20mg HumanplateletmembraneglycoproteinⅣ,GP-ⅣELISAKit 人血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP-Ⅳ)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
小檗红碱 HPLC≥98% 20mg HumanpoiculinELISAKit 人膜桥蛋白(poiculin)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
小檗红碱硫酸酯 HPLC≥98% 20mg HumanPolymorphonuclearElastase,PMNElastaseELISAKit 人多形核白细胞弹性蛋白酶(PMNElastase)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
小檗碱 HPLC≥98% 20mg Humanprealbumin,PAELISAKit 人前白蛋白(PA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
小豆蔻明 HPLC≥98% 20mg humanprolactin,PRLELISAKit 人催乳素(PRL)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
EHA105 感受态细胞100ul*100HumanPerforin/Pore-formingprotein,PF/PFP 人穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 香紫苏醇 GC≥98% 20mg
HumanPhosphoglucomase,PGM 人0酸葡萄糖变位酶(PGM)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 香紫苏二醇 GC≥98% 20mg
HumanPhospholipaseC,PLC 人0酯酶C(PLC)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 香紫苏内酯 GC≥98% 20mg
HumanPhosphotylinosital3kinase,PI3K 人0酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 消旋山莨菪碱 HPLC≥98% 20mg
Humanplasmin/fibrinolysin,PL/Fbn 人纤溶酶/纤维蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 小白菊内酯 HPLC≥98% 20mg
HumanplateletmembraneglycoproteinⅣ,GP-Ⅳ 人血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP-Ⅳ)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 小檗胺 HPLC≥98% 20mg
Humanpoiculin 人膜桥蛋白(poiculin)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 小檗红碱 HPLC≥98% 20mg
HumanPolymorphonuclearElastase,PMNElastase 人多形核白细胞弹性蛋白酶(PMNElastase)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 小檗红碱硫酸酯 HPLC≥98% 20mg
Humanprealbumin,PA 人前白蛋白(PA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 小檗碱 HPLC≥98% 20mg
humanprolactin,PRL 人催乳素(PRL)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 小豆蔻明 HPLC≥98% 20mg
EHA105 感受态细胞100ul*100操作说明：
1. 0.1
cm 电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上 5 分钟，待其沥干水分，正置 5 分钟，使乙醇充分挥发，
待乙醇挥发干净立即插入冰中，压实冰面，电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖，冰中静置 5 分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟，待其融化，加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀，避免产生气泡，立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19； --
B. 对于连接产物，请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬，DNA 浓度 不超过 100ng/μl，体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 用 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中，避免产生气泡，盖上杯盖--。
4. 启动电转仪，设置参数：C=25 μF，PC=200 Ω，V=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数，也可按所用电转仪推 荐的参数操作），将电击杯快速放入电转槽中，电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯，放室温，加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基（室温），用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后，转移到 50ml 离心管（BD Falcon50ml 锥形离心管等），向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml。 37℃，225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌，重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上（因菌量较大，若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个）。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养 13-17 小时。
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
产品名称：EHA105 感受态细胞100ul*100
规格：100ul*100
分类：根癌农杆菌感受态细胞
保存条件（保质期）： -80℃（6个月）
EHA105 感受态细胞100ul*100注意事项：
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10。--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡，气泡会增加弧光放电风险。
3. 当 DNA 不纯或存在盐，乙醇，蛋白及缓冲液等污染时，转化效率急剧下降。
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导，增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率，推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍，转化效率下降一个 数量级。 --
6. 对于连接产物转化，转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物，保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率，增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作，吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm) 避免用
力过猛，以免剪切力过大损伤细胞膜，降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80℃以下，高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
肾动脉平滑肌细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)盐酸丁卡因（标准品）Tetracaine HCl质量规格：HPLC法含量测定
BA/F3细胞，小鼠原B细胞 人浸润性导管癌旁皮肤细胞,CCD-1095Sk细胞 NeuroFectagen? 神经细胞转染试剂盒苯甲唑啉盐酸盐/盐酸妥拉唑林Tolazoline HCl质量规格：>98%,进口原装
非洲绿猴肾细胞;Vero E61酸托特罗定Tolterodine Tartrate质量规格：>98.5%,M受体(毒蕈碱型乙酰胆碱受体)拮抗剂
IL13 Others Human 人 IL-13 / Ierleukin-13 人细胞裂解液 (阳性对照) 1酸托特罗定（标准品）Tolterodine Tartrate质量规格：含量测定
幼蚊细胞;C6/36托吡酯Topiramate质量规格：>99%,BR,可用于细胞培养
犬源细胞地红霉素（标准品）Dirithromycin质量规格：>95%,标准品用于含量测定
小鼠骨髓瘤细胞;P3/NSI/1-Ag4-1 小鼠胎儿表皮角质形成层细胞完全培养基 100mL阿魏酸乙酯（标准品）Ethyl ferulate质量规格：HPLC≥98%，标准品
COS-7L, 非洲绿猴肾成纤维细胞 其它CAPS; 3-(环已胺)丙磺酸CAPS质量规格：>99%
ACHE Others Mouse 小鼠 AcetylCHOlinesterase / ACHE 人细胞裂解液 (阳性对照) 巴豆苷（标准品）Crotonoside质量规格：HPLC≥98%，标准品
人肺间充质干细胞裂解物HPMSCL巴西苏木素（标准品）Brazilin质量规格：HPLC≥98%，标准品
香紫苏醇 GC≥98% 20mg HumanPerforin/Pore-formingprotein,PF/PFPELISAKit 人穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
香紫苏二醇 GC≥98% 20mg HumanPhosphoglucomase,PGMELISAKit 人0酸葡萄糖变位酶(PGM)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
香紫苏内酯 GC≥98% 20mg HumanPhospholipaseC,PLCELISAKit 人0酯酶C(PLC)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
消旋山莨菪碱 HPLC≥98% 20mg HumanPhosphotylinosital3kinase,PI3KELISAKit 人0酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
小白菊内酯 HPLC≥98% 20mg Humanplasmin/fibrinolysin,PL/FbnELISAKit 人纤溶酶/纤维蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
小檗胺 HPLC≥98% 20mg HumanplateletmembraneglycoproteinⅣ,GP-ⅣELISAKit 人血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP-Ⅳ)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
小檗红碱 HPLC≥98% 20mg HumanpoiculinELISAKit 人膜桥蛋白(poiculin)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
小檗红碱硫酸酯 HPLC≥98% 20mg HumanPolymorphonuclearElastase,PMNElastaseELISAKit 人多形核白细胞弹性蛋白酶(PMNElastase)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
小檗碱 HPLC≥98% 20mg Humanprealbumin,PAELISAKit 人前白蛋白(PA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
小豆蔻明 HPLC≥98% 20mg humanprolactin,PRLELISAKit 人催乳素(PRL)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
EHA105 感受态细胞100ul*100HumanPerforin/Pore-formingprotein,PF/PFP 人穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 香紫苏醇 GC≥98% 20mg
HumanPhosphoglucomase,PGM 人0酸葡萄糖变位酶(PGM)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 香紫苏二醇 GC≥98% 20mg
HumanPhospholipaseC,PLC 人0酯酶C(PLC)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 香紫苏内酯 GC≥98% 20mg
HumanPhosphotylinosital3kinase,PI3K 人0酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 消旋山莨菪碱 HPLC≥98% 20mg
Humanplasmin/fibrinolysin,PL/Fbn 人纤溶酶/纤维蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 小白菊内酯 HPLC≥98% 20mg
HumanplateletmembraneglycoproteinⅣ,GP-Ⅳ 人血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP-Ⅳ)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 小檗胺 HPLC≥98% 20mg
Humanpoiculin 人膜桥蛋白(poiculin)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 小檗红碱 HPLC≥98% 20mg
HumanPolymorphonuclearElastase,PMNElastase 人多形核白细胞弹性蛋白酶(PMNElastase)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 小檗红碱硫酸酯 HPLC≥98% 20mg
Humanprealbumin,PA 人前白蛋白(PA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 小檗碱 HPLC≥98% 20mg
humanprolactin,PRL 人催乳素(PRL)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 小豆蔻明 HPLC≥98% 20mg
EHA105 感受态细胞100ul*100操作说明：
待乙醇挥发干净立即插入冰中，压实冰面，电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖，冰中静置 5 分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟，待其融化，加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀，避免产生气泡，立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19； --
B. 对于连接产物，请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬，DNA 浓度 不超过 100ng/μl，体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 用 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中，避免产生气泡，盖上杯盖--。
4. 启动电转仪，设置参数：C=25 μF，PC=200 Ω，V=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数，也可按所用电转仪推 荐的参数操作），将电击杯快速放入电转槽中，电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯，放室温，加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基（室温），用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后，转移到 50ml 离心管（BD Falcon50ml 锥形离心管等），向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml。 37℃，225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌，重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上（因菌量较大，若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个）。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养 13-17 小时。
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