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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
53
- 英文名:
stable 电击感受态细胞
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海博湖
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
50ul*20
产品名称:stable 电击感受态细胞50ul*20
规格:50ul*20
分类:克隆感受态细胞
保存条件(保质期): -80℃(6个月)
stable 电击感受态细胞50ul*20培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
stable 电击感受态细胞50ul*20注意事项:
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10。--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡,气泡会增加弧光放电风险。
3. 当 DNA 不纯或存在盐,乙醇,蛋白及缓冲液等污染时,转化效率急剧下降。
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导,增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率,推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍,转化效率下降一个 数量级。 --
6. 对于连接产物转化,转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物,保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率,增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作,吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm) 避免用
力过猛,以免剪切力过大损伤细胞膜,降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80℃以下,高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
stable 电击感受态细胞50ul*20操作说明:
1. 0.1
cm 电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上 5 分钟,待其沥干水分,正置 5 分钟,使乙醇充分挥发,
待乙醇挥发干净立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖,冰中静置 5 分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟,待其融化,加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀,避免产生气泡,立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19; --
B. 对于连接产物,请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬,DNA 浓度 不超过 100ng/μl,体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 用 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中,避免产生气泡,盖上杯盖--。
4. 启动电转仪,设置参数:C=25 μF,PC=200 Ω,V=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数,也可按所用电转仪推 荐的参数操作),将电击杯快速放入电转槽中,电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯,放室温,加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基(室温),用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后,转移到 50ml 离心管(BD Falcon50ml 锥形离心管等),向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml。 37℃,225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌,重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上(因菌量较大,若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个)。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养 13-17 小时。
IFNAR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 人细胞裂解液 (阳性对照) 异鼠李素(标准品)Isorhamnetin质量规格:HPLC≥98%,标准品
虹膜色素上皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)异鼠李素-3-O-葡萄糖苷(标准品)Isorhamnetin-3-O-β-D-Glucoside质量规格:HPLC≥98%,标准品
Coc2细胞,卵巢癌细胞 人卵巢癌细胞,OVAC细胞 人少突胶质前体细胞(悬浮生长)cDNAHOPC-os cDNA异鼠李素-3-O-新橙皮苷(标准品)Isorhamnetin-3-O-neohespeidoside质量规格:HPLC≥98%,标准品
非洲绿猴肾细胞;CV-1异土木香内酯(标准品)Isoalantolactone质量规格:HPLC≥98%,标准品
ICAM1 Others Human 人 ICAM-1 / CD54 人细胞裂解液 (阳性对照) 异乌药内酯/异乌药内酯(标准品)Isolinderalactone质量规格:HPLC≥98%,标准品
大鼠小神经胶质细胞(RM)(5×105)赤芝酸ELucidenic acid E质量规格:HPLC≥97%
非洲绿猴肾细胞;CV-1利克飞龙Licofelone质量规格:>99%,BR
KM小鼠脑神经胶质母细胞瘤瘤株;G422 小鼠膀胱成纤维细胞完全培养基 100mL灵芝1酸CGanoderenic acid C质量规格:>95.0%(HPLC)
细胞名称 种属生物胞素Biocytin质量规格:>98%,进分
VWC2 Others Human 人 VWC2 / Brorin 人细胞裂解液 (阳性对照) PU-H71PUH71质量规格:>98%,HSP90抑制剂
异海松烯,二醇 HPLC≥98% 5mg Rat macrophage inflammatory protein 3 beta (MIP-3 beta /ELC/CCL19) ELISA Kit 大鼠巨噬细胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA试剂盒
贝壳杉烯,,三醇 HPLC≥98% 5mg Rat macrophage inflammatory protein 5 (MIP-5) ELISA Kit 大鼠巨噬细胞炎症蛋白5(MIP-5)ELISA试剂盒
羟基浆果赤霉素 III HPLC≥98% 5mg Rat macrophage migration inhibitory factor (MIF) ELISA Kit 大鼠巨噬细胞移动抑制因子(MIF)ELISA试剂盒
甲氧基羰基beta咔啉 HPLC≥98% 5mg Rat maix metalloproteinase 1 (MMP-1) ELISA Kit 大鼠基质金属蛋白酶1(MMP-1)ELISA试剂盒
脱羧氧代茶酸 HPLC≥98% 5mg Rat maix metalloproteinase 10 (MMP-10) ELISA Kit 大鼠基质金属蛋白酶10(MMP-10)ELISA试剂盒
乙酰基掬万寿局素 A HPLC≥98% 5mg Rat maix metalloproteinase 13 (MMP-13) ELISA Kit 大鼠基质金属蛋白酶13(MMP-13)ELISA试剂盒
,贝壳杉烷二醇 HPLC≥98% 5mg Rat maix metalloproteinase 2/ gelatinase A (MMP-2/Gelatinase A) ELISA Kit 大鼠基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA试剂盒
,,三羟基齐墩果烯酸 HPLC≥98% 5mg Rat maix metalloproteinase 3 (MMP-3) ELISA Kit 大鼠基质金属蛋白酶3(MMP-3)ELISA试剂盒
,,三邻甲基鞣花酸 HPLC≥98% 5mg Rat maix metalloproteinase 4 (MMP-4) ELISA Kit 大鼠基质金属蛋白酶4(MMP-4)ELISA试剂盒
,脱氢维酮 HPLC≥98% 5mg Rat maix metalloproteinase 7 (MMP-7) ELISA Kit 大鼠基质金属蛋白酶7(MMP-7)ELISA试剂盒
stable 电击感受态细胞50ul*20Rat macrophage inflammatory protein 3 alpha (MIP-3 alpha /CCL20) ELISA Kit 大鼠巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA试剂盒 脱氧尤可甾醇 HPLC≥98% 5mg
Rat macrophage inflammatory protein 3 beta (MIP-3 beta /ELC/CCL19) ELISA Kit 大鼠巨噬细胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA试剂盒 异海松烯,二醇 HPLC≥98% 5mg
Rat macrophage inflammatory protein 5 (MIP-5) ELISA Kit 大鼠巨噬细胞炎症蛋白5(MIP-5)ELISA试剂盒 贝壳杉烯,,三醇 HPLC≥98% 5mg
Rat macrophage migration inhibitory factor (MIF) ELISA Kit 大鼠巨噬细胞移动抑制因子(MIF)ELISA试剂盒 羟基浆果赤霉素 III HPLC≥98% 5mg
Rat maix metalloproteinase 1 (MMP-1) ELISA Kit 大鼠基质金属蛋白酶1(MMP-1)ELISA试剂盒 甲氧基羰基beta咔啉 HPLC≥98% 5mg
Rat maix metalloproteinase 10 (MMP-10) ELISA Kit 大鼠基质金属蛋白酶10(MMP-10)ELISA试剂盒 脱羧氧代茶酸 HPLC≥98% 5mg
Rat maix metalloproteinase 13 (MMP-13) ELISA Kit 大鼠基质金属蛋白酶13(MMP-13)ELISA试剂盒 乙酰基掬万寿局素 A HPLC≥98% 5mg
Rat maix metalloproteinase 2/ gelatinase A (MMP-2/Gelatinase A) ELISA Kit 大鼠基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA试剂盒 ,贝壳杉烷二醇 HPLC≥98% 5mg
Rat maix metalloproteinase 3 (MMP-3) ELISA Kit 大鼠基质金属蛋白酶3(MMP-3)ELISA试剂盒 ,,三羟基齐墩果烯酸 HPLC≥98% 5mg
Rat maix metalloproteinase 4 (MMP-4) ELISA Kit 大鼠基质金属蛋白酶4(MMP-4)ELISA试剂盒 ,,三邻甲基鞣花酸 HPLC≥98% 5mg
规格:50ul*20
分类:克隆感受态细胞
保存条件(保质期): -80℃(6个月)
stable 电击感受态细胞50ul*20培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
stable 电击感受态细胞50ul*20注意事项:
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10。--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡,气泡会增加弧光放电风险。
3. 当 DNA 不纯或存在盐,乙醇,蛋白及缓冲液等污染时,转化效率急剧下降。
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导,增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率,推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍,转化效率下降一个 数量级。 --
6. 对于连接产物转化,转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物,保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率,增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作,吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm) 避免用
力过猛,以免剪切力过大损伤细胞膜,降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80℃以下,高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
stable 电击感受态细胞50ul*20操作说明:
待乙醇挥发干净立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖,冰中静置 5 分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟,待其融化,加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀,避免产生气泡,立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19; --
B. 对于连接产物,请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬,DNA 浓度 不超过 100ng/μl,体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 用 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中,避免产生气泡,盖上杯盖--。
4. 启动电转仪,设置参数:C=25 μF,PC=200 Ω,V=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数,也可按所用电转仪推 荐的参数操作),将电击杯快速放入电转槽中,电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯,放室温,加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基(室温),用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后,转移到 50ml 离心管(BD Falcon50ml 锥形离心管等),向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml。 37℃,225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌,重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上(因菌量较大,若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个)。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养 13-17 小时。
IFNAR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 人细胞裂解液 (阳性对照) 异鼠李素(标准品)Isorhamnetin质量规格:HPLC≥98%,标准品
虹膜色素上皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)异鼠李素-3-O-葡萄糖苷(标准品)Isorhamnetin-3-O-β-D-Glucoside质量规格:HPLC≥98%,标准品
Coc2细胞,卵巢癌细胞 人卵巢癌细胞,OVAC细胞 人少突胶质前体细胞(悬浮生长)cDNAHOPC-os cDNA异鼠李素-3-O-新橙皮苷(标准品)Isorhamnetin-3-O-neohespeidoside质量规格:HPLC≥98%,标准品
非洲绿猴肾细胞;CV-1异土木香内酯(标准品)Isoalantolactone质量规格:HPLC≥98%,标准品
ICAM1 Others Human 人 ICAM-1 / CD54 人细胞裂解液 (阳性对照) 异乌药内酯/异乌药内酯(标准品)Isolinderalactone质量规格:HPLC≥98%,标准品
大鼠小神经胶质细胞(RM)(5×105)赤芝酸ELucidenic acid E质量规格:HPLC≥97%
非洲绿猴肾细胞;CV-1利克飞龙Licofelone质量规格:>99%,BR
KM小鼠脑神经胶质母细胞瘤瘤株;G422 小鼠膀胱成纤维细胞完全培养基 100mL灵芝1酸CGanoderenic acid C质量规格:>95.0%(HPLC)
细胞名称 种属生物胞素Biocytin质量规格:>98%,进分
VWC2 Others Human 人 VWC2 / Brorin 人细胞裂解液 (阳性对照) PU-H71PUH71质量规格:>98%,HSP90抑制剂
异海松烯,二醇 HPLC≥98% 5mg Rat macrophage inflammatory protein 3 beta (MIP-3 beta /ELC/CCL19) ELISA Kit 大鼠巨噬细胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA试剂盒
贝壳杉烯,,三醇 HPLC≥98% 5mg Rat macrophage inflammatory protein 5 (MIP-5) ELISA Kit 大鼠巨噬细胞炎症蛋白5(MIP-5)ELISA试剂盒
羟基浆果赤霉素 III HPLC≥98% 5mg Rat macrophage migration inhibitory factor (MIF) ELISA Kit 大鼠巨噬细胞移动抑制因子(MIF)ELISA试剂盒
甲氧基羰基beta咔啉 HPLC≥98% 5mg Rat maix metalloproteinase 1 (MMP-1) ELISA Kit 大鼠基质金属蛋白酶1(MMP-1)ELISA试剂盒
脱羧氧代茶酸 HPLC≥98% 5mg Rat maix metalloproteinase 10 (MMP-10) ELISA Kit 大鼠基质金属蛋白酶10(MMP-10)ELISA试剂盒
乙酰基掬万寿局素 A HPLC≥98% 5mg Rat maix metalloproteinase 13 (MMP-13) ELISA Kit 大鼠基质金属蛋白酶13(MMP-13)ELISA试剂盒
,贝壳杉烷二醇 HPLC≥98% 5mg Rat maix metalloproteinase 2/ gelatinase A (MMP-2/Gelatinase A) ELISA Kit 大鼠基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA试剂盒
,,三羟基齐墩果烯酸 HPLC≥98% 5mg Rat maix metalloproteinase 3 (MMP-3) ELISA Kit 大鼠基质金属蛋白酶3(MMP-3)ELISA试剂盒
,,三邻甲基鞣花酸 HPLC≥98% 5mg Rat maix metalloproteinase 4 (MMP-4) ELISA Kit 大鼠基质金属蛋白酶4(MMP-4)ELISA试剂盒
,脱氢维酮 HPLC≥98% 5mg Rat maix metalloproteinase 7 (MMP-7) ELISA Kit 大鼠基质金属蛋白酶7(MMP-7)ELISA试剂盒
stable 电击感受态细胞50ul*20Rat macrophage inflammatory protein 3 alpha (MIP-3 alpha /CCL20) ELISA Kit 大鼠巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA试剂盒 脱氧尤可甾醇 HPLC≥98% 5mg
Rat macrophage inflammatory protein 3 beta (MIP-3 beta /ELC/CCL19) ELISA Kit 大鼠巨噬细胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA试剂盒 异海松烯,二醇 HPLC≥98% 5mg
Rat macrophage inflammatory protein 5 (MIP-5) ELISA Kit 大鼠巨噬细胞炎症蛋白5(MIP-5)ELISA试剂盒 贝壳杉烯,,三醇 HPLC≥98% 5mg
Rat macrophage migration inhibitory factor (MIF) ELISA Kit 大鼠巨噬细胞移动抑制因子(MIF)ELISA试剂盒 羟基浆果赤霉素 III HPLC≥98% 5mg
Rat maix metalloproteinase 1 (MMP-1) ELISA Kit 大鼠基质金属蛋白酶1(MMP-1)ELISA试剂盒 甲氧基羰基beta咔啉 HPLC≥98% 5mg
Rat maix metalloproteinase 10 (MMP-10) ELISA Kit 大鼠基质金属蛋白酶10(MMP-10)ELISA试剂盒 脱羧氧代茶酸 HPLC≥98% 5mg
Rat maix metalloproteinase 13 (MMP-13) ELISA Kit 大鼠基质金属蛋白酶13(MMP-13)ELISA试剂盒 乙酰基掬万寿局素 A HPLC≥98% 5mg
Rat maix metalloproteinase 2/ gelatinase A (MMP-2/Gelatinase A) ELISA Kit 大鼠基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA试剂盒 ,贝壳杉烷二醇 HPLC≥98% 5mg
Rat maix metalloproteinase 3 (MMP-3) ELISA Kit 大鼠基质金属蛋白酶3(MMP-3)ELISA试剂盒 ,,三羟基齐墩果烯酸 HPLC≥98% 5mg
Rat maix metalloproteinase 4 (MMP-4) ELISA Kit 大鼠基质金属蛋白酶4(MMP-4)ELISA试剂盒 ,,三邻甲基鞣花酸 HPLC≥98% 5mg
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