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- Luciferase报告基因系统是以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase)活性的一种报告系统。
- 2026年04月14日
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赛戈（上海）生物科技有限公司
服务介绍
荧光素酶报告基因分析
Luciferase报告基因系统是以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase)活性的一种报告系统。荧光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin，在luciferin氧化的过程中，会发出生物荧光(bioluminescence)。然后可以通过荧光测定仪也称化学发光仪(luminometer)或液闪测定仪测定luciferin氧化过程中释放的生物荧光。荧光素和荧光素酶这一生物发光体系，可以极其灵敏、高效地检测基因的表达。是检测转录因子与目的基因启动子区DNA相互作用的一种检测方法。
服务内容
1. 用生物信息学方法分析并预测启动子区可能的转录因子结合位点。
2. 设计引物用PCR法从基因组DNA中克隆所需的靶启动子片段，将此片段插入到荧光素酶报告基因质粒（pGL3-basic）中。
3. 筛选阳性克隆，测序。扩增克隆并提纯质粒备用。
4. 扩增转录因子质粒，提纯备用。同时准备相应的空载质粒对照，提纯备用。
5. 培养293（或其它目的细胞），并接种于24孔板中，生长10-24小时（80%汇合度）。
6. 将报告基因质粒与转录因子表达质粒共转染细胞。
7. 提取蛋白并用于荧光素酶检测。
8. 加入底物，测定荧光素酶的活性。
9. 计算相对荧光强度，并与空载对照比较。
服务说明
1.客户提供：含有荧光素酶报告基因的重组质粒（如需公司提供请说明）。
2.服务周期：3-4周
3.若另有疑问请致电本公司咨询，我们将竭诚为您服务。
质量承诺
1.权威的鉴定报告；
2.原始的实验数据；
3.详细的实验步骤。
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文献和实验水仙子2005 我想分别构建FOXO1 和 SIRT1基因启动子/luciferase报告质粒，用于研究X基因是否能够调控这两个启动子。但是不知道该扩增两个基因启动子区域的哪一段插入pGL3（promega）中。 另外，promega的pGL3有pGL3-basic和pGL3-enhancer，该选择哪个？ 水仙子2005 继续求助 sxd5266 pGL3-basic 没有SV
在用萤火虫荧光素酶定量基因表达时 ，通常采用第二个报告基因来减少实验的变化因素。但传统的共报告基因（比如CAT，β-Gal，GUS）不够便利。因为各自的测试化学，处理要求，检测特点存在差异。Promega提供一种先进的双报告基因技术，结合了萤火虫荧光素酶测试和海洋腔肠荧光素酶测试。双荧光素酶报告基因测试系统，结合pRL载体系统，表达第二个报告基因海洋腔肠荧光素酶，在单管中进行双荧光素酶报告基因测试，快速，灵敏，简便。系统还提供PLB裂解液，用来裂解在多孔板中培养的哺乳细胞，不需操作单个样品
zhqmjeremy 各位战友好。有一个问题，未得其解，恳请帮助。 做荧光素酶报告基因的时候，检测的是细胞因子的启动子。换句话说，是细胞因子的启动子融合的报告基因被转染到细胞内，通过刺进因素作用后，检测启动子的表达情况。这个是背景。 问题是，怎么通过使用内参的方法，去除转染效率不同的孔和细胞之间的差别。 因为，个人认为，细胞数对报告基因的表达量影响比较大。 谢谢。 daidaiyidaidai
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