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        【求助】怎么构建荧光素酶报告质粒

        丁香园论坛

        13742
        我想分别构建FOXO1 和 SIRT1基因启动子/luciferase报告质粒,用于研究X基因是否能够调控这两个启动子。但是不知道该扩增两个基因启动子区域的哪一段插入pGL3(promega)中。
        另外,promega的pGL3有pGL3-basic和pGL3-enhancer,该选择哪个?
        继续求助
        pGL3-basic 没有SV40增强子
        pGL3-enhancer 有SV40增强子
        研究启动子的调控, 需要做启动子删除分析吧。
        启动子区域一般包含在转录起始位点上游2kb,下游200bp的区间中,把这段序列拿到后再做一下转录因子结合位点分析。一般问题不大,做启动子删除分析工作量似乎太大!
        可以用pGL3-basic
        最近promega出的pGl4载体,去除了pGL3骨架上很多转录因子的结合位点,更适合做启动子分析,及转录因子对启动子的调控。

        本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴

        师兄微信号:shixiongcoming

        【求助】怎么构建荧光素酶报告质粒

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