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- 2026年04月23日
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实验原理：利用荧光素酶与底物结合发生化学发光反应的特性，把感兴趣的基因转录的调控元件克隆在萤火虫荧光素酶基因（firefly luciferase）的上游，构建成荧光素酶报告质粒。然后转染细胞，适当刺激或处理后裂解细胞，测定荧光素酶活性。通过荧光素酶活性的高低判断刺激前后或不同刺激对感兴趣的调控元件的影响。双报告基因载体系统以Luc作为启动子报告基因，以Rluc作为信号标准化的内参。
实验流程：
客户提供：
客户可以提供构建好的启动子-luc质粒、转录因子表达载体、以及内参质粒pRL-TK，如无，需提供启动子和转录因子的序列信息，我方可以提供载体。
拓普生物提供：
完整的实验操作规程、实验报告（包括试剂名称、仪器型号、操作步骤和数据分析等）、原始实验数据。
实验周期：4-5周
案例分享：
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客户可以提供构建好的启动子-luc质粒、转录因子表达载体、以及内参质粒pRL-TK，如无，需提供启动子和转录因子的序列信息，我方可以提供载体。
拓普生物提供：
完整的实验操作规程、实验报告（包括试剂名称、仪器型号、操作步骤和数据分析等）、原始实验数据。
实验周期：4-5周
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文献和实验相关实验
1、双荧光素酶实验原理； 2、验证转录因子与启动子互作； 3、验证miRNA与mRNA互作
在用萤火虫荧光素酶定量基因表达时 ，通常采用第二个报告基因来减少实验的变化因素。但传统的共报告基因（比如CAT，β-Gal，GUS）不够便利。因为各自的测试化学，处理要求，检测特点存在差异。Promega提供一种先进的双报告基因技术，结合了萤火虫荧光素酶测试和海洋腔肠荧光素酶测试。双荧光素酶报告基因测试系统，结合pRL载体系统，表达第二个报告基因海洋腔肠荧光素酶，在单管中进行双荧光素酶报告基因测试，快速，灵敏，简便。系统还提供PLB裂解液，用来裂解在多孔板中培养的哺乳细胞，不需操作单个样品
【求助】请教一个关于双荧光素酶报告基因检测系统中共转染两种报告基因质粒的比例的问题？
lsdcfhyj 用双荧光素酶报告基因检测系统进行报告基因检测时需要共转染两种荧光素酶报告基因质粒，但是我不知道两种质粒间的比例是多少，有哪位前辈做过这方面实验的，请帮我指点一下，谢谢了 xxshc 这个比例没有特别的规定。我用的pRL－TK（海蜃素荧光素酶）的荧光值要高一些，我转20ng/孔（24孔板），作为内参.pGL3（萤火虫荧光素酶）的荧光值低一些，我转0.4ug/孔（24孔板）然后0.4ug的调整质粒。这样的话，萤火虫荧光素酶
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
双荧光素酶报告系统
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