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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
Hieff® Multiplex PCR Kit
- 保质期:
有效期1年
- 供应商:
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
100T(13279ES60)/500T(13279ES76)
| 规格: | 100T(13279ES60) | 产品价格: | ¥875.00 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 500T(13279ES76) | 产品价格: | ¥3165.00 |
本产品适用于多重PCR实验。Hieff® Multiplex PCR Kit以多重PCR酶制剂与2×扩增缓冲液为组分的试剂盒,可快速便捷地用于PCR反应,具备高均一性、高特异性和高灵敏度的特点,可以对20对及以上的引物特异、均一地进行扩增反应。

产品组分
|
组分编号 |
组分名称 |
产品编号/规格 | |
|
13279ES50 (100 T) |
13279ES76 (500 T) | ||
|
13279-A |
Hieff® Multiplex PCR Enzyme |
2×50 μL |
10×50 μL |
|
13279-B |
2×Hieff® Multiplex PCR Buffer |
2×1.25 mL |
10×1.25 mL |
【注】:13279-A组分避免反复冻融。
运输与保存
冰袋运输。-20℃储存,有效期1年。
反应体系
|
组分 |
体积 (μL) |
终浓度 |
|
2×Hieff® Multiplex PCR Buffer |
25 |
1× |
|
Hieff® Multiplex PCR Enzyme |
1 |
- |
|
Primer mix |
x |
0.1 μM-0.5 μM |
|
模板DNA |
DNA总量:1 ng-200 ng |
- |
|
无菌超纯水 |
up to 50 |
- |
【注】 1)上表中DNA量和引物浓度均为推荐浓度,可根据具体实验情况进行调整最适浓度。
2)每条引物的浓度可在0.1 μM-0.5 μM范围内进行调整。
3)2×Hieff® Multiplex PCR Buffer中已经包含扩增所需要的Mg2+、dNTP、盐离子等,无需额外添加。
扩增程序
|
循环步骤 |
温度(℃) |
时间 |
循环数 |
|
预变性 |
94 |
1 min |
1 |
|
变性 |
94 |
30 sec |
15-45 |
|
退火 |
50-60 |
60 sec | |
|
延伸 |
72 |
60 sec/kb | |
|
终延伸 |
72 |
10 min |
1 |
【注】 1)在PCR仪上设置上表中的反应程序进行多重PCR反应(设置热盖温度至105℃左右)
2)使用本产品获得的扩增产物无需添加上样缓冲液,可直接上样用于电泳检测。
3)延伸时间以最长扩增片段为准,可适当延长延伸时间,但要避免过长时间带来的非特异性扩增。
实验案例分享
以人基因组DNA为模板,使用10对引物进行多重PCR反应,分别扩增97 bp、139 bp、181 bp、212 bp、268 bp、331 bp、415 bp、507 bp、741 bp和1172 bp的目的片段。
反应体系配制
|
组分 |
体积 (μL) |
终浓度 |
|
2×Hieff® Multiplex PCR Buffer |
25 |
1× |
|
Hieff® Multiplex PCR Enzyme |
1 |
- |
|
Primer mix |
10 |
0.1 μM |
|
模板DNA |
1 |
2 ng/μL |
|
无菌超纯水 |
up to 50 |
- |
扩增程序
|
循环步骤 |
温度(℃) |
时间 |
循环数 |
|
预变性 |
94 |
1 min |
1 |
|
变性 |
94 |
30 sec |
35 |
|
退火 |
60 |
60 sec | |
|
延伸 |
72 |
60 sec/kb | |
|
终延伸 |
72 |
10 min |
1 |
电泳检测
2%琼脂糖凝胶;电压130 V;电泳时间30 min。
实验结果
M:100 bp DNA ladder
Lane1-2:10重PCR产物
相关产品
|
产品名称 |
货号 |
规格 |
|
Hieff® Multiplex PCR Kit(Mg2+ free) |
13278ES50/76 |
100T/500T |
| Hieff® Multiplex PCR Kit | 13279ES50/76 | 100T/500T |
|
Hieff® Multiplex PCR Master Mix |
13280ES50/76 |
50T/200T |
|
5× Hieff Canace® PCR Master Mix 高保真酶预混液 (for multiplex PCR) |
10137ES03/08/25/76 |
1ml/5ml/25ml/500ml |
|
2× Hieff Canace® PCR Master Mix 高保真酶预混液 (for multiplex PCR) |
10138ES03/08/25/76 |
1ml/5ml/25ml/500ml |
HB181214
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