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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
2×Hieff® Robust PCR Master Mix (With Dye)
- 保质期:
有效期1年
- 供应商:
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
1mL
2×Hieff® Robust PCR Master Mix (With Dye)选用改造的Taq DNA Polymerase,添加强力延伸因子、扩增增强因子以及优化的缓冲体系,扩增速度和扩增产量较普通PCR Mix有了质的飞跃。扩增速度可达15 sec/kb,适用于快速PCR反应,1 kb以内的极限扩增速度可达5 sec/kb,大幅节省PCR反应时间。预混液中含有dNTP、Mg2+,使用时只需加入引物和模板即可进行扩增,大大简化实验的操作步骤。
2×Hieff® Robust PCR Master Mix (With Dye)选用改造的Taq DNA Polymerase,添加强力延伸因子、扩增增强因子以及优化的缓冲体系,扩增速度和扩增产量较普通PCR Mix有了质的飞跃。扩增速度可达15 sec/kb,适用于快速PCR反应,1 kb以内的极限扩增速度可达5 sec/kb,大幅节省PCR反应时间。预混液中含有dNTP、Mg2+,使用时只需加入引物和模板即可进行扩增,大大简化实验的操作步骤。Mix中含有电泳指示染料,可在反应结束后直接进行电泳,使用方便。体系中加入的保护剂使得Master Mix经过反复冻融后仍可保持稳定的活性。PCR产物的3’端带A,可轻松克隆至T载体。
储存条件
-25~-15℃保存,有效期2年。
使用说明
PCR反应体系和扩增条件(推荐冰上配制)
| 组分 | 体积 (μL) | 循环步骤 | 温度 (°C) | 时间 | 循环数 | |
| 模板DNA | 适量 | 预变性 | 94 | 3-5 min | 1 | |
| Primer正向 (10 μM) | 2.5 | 变性 | 94 | 10 sec | 30-35 | |
| Primer反向 (10 μM) | 2.5 | 退火 | 55 | 20 sec | ||
| 2×Hieff® Robust PCR Master Mix | 25 | 延伸 | 72 | 15-30 sec/kb | ||
| ddH2O | to 50 | 终延伸 | 72 | 5 min | 1 | |
| 表1 扩增体系(50 μL) | 表2 扩增条件 | |||||
1)模板使用量:人基因组DNA:30-100 ng;大肠杆菌基因组DNA:10-100 ng;λDNA:0.5-5 ng;质粒DNA:0.1-10 ng。
2)Mg2+浓度:本产品中含有3 mM的MgCl2,适合大部分PCR反应。
3)退火温度:请参考引物的理论Tm值,退火温度可设置低于引物理论值1-2℃。
4)延伸速度:长度1 kb以内的基因可选择5-15 sec/kb。
注意事项
1.PCR反应体系需在冰上配制,体系混匀后快速置于PCR仪进行反应。
2.本产品PCR产物不适用于聚丙烯-酰胺凝胶电泳。
3.为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
4.本产品仅作科研用途!
中含有电泳指示染料,可在反应结束后直接进行电泳,使用方便。体系中加入的保护剂使得Master Mix经过反复冻融后仍可保持稳定的活性。PCR产物的3’端带A,可轻松克隆至T载体。
储存条件
-25~-15℃保存,有效期2年。
使用说明
PCR反应体系和扩增条件(推荐冰上配制)
| 组分 | 体积 (μL) | 循环步骤 | 温度 (°C) | 时间 | 循环数 | |
| 模板DNA | 适量 | 预变性 | 94 | 3-5 min | 1 | |
| Primer正向 (10 μM) | 2.5 | 变性 | 94 | 10 sec | 30-35 | |
| Primer反向 (10 μM) | 2.5 | 退火 | 55 | 20 sec | ||
| 2×Hieff® Robust PCR Master Mix | 25 | 延伸 | 72 | 15-30 sec/kb | ||
| ddH2O | to 50 | 终延伸 | 72 | 5 min | 1 | |
| 表1 扩增体系(50 μL) | 表2 扩增条件 | |||||
1)模板使用量:人基因组DNA:30-100 ng;大肠杆菌基因组DNA:10-100 ng;λDNA:0.5-5 ng;质粒DNA:0.1-10 ng。
2)Mg2+浓度:本产品中含有3 mM的MgCl2,适合大部分PCR反应。
3)退火温度:请参考引物的理论Tm值,退火温度可设置低于引物理论值1-2℃。
4)延伸速度:长度1 kb以内的基因可选择5-15 sec/kb。
注意事项
1.PCR反应体系需在冰上配制,体系混匀后快速置于PCR仪进行反应。
2.本产品PCR产物不适用于聚丙烯-酰胺凝胶电泳。
3.为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
4.本产品仅作科研用途!
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文献和实验【资源】一种被广泛用于实时定量 PCR 的绿色荧光 DNA 染料
替代 SYBR Green 1 ,毋须改变任何您目前使用的操作步骤和仪器设备 Fast-Plus EvaGreenqPCR试剂盒一种既适用于快速循环 qPCR 又适用于高分辨率熔解曲线( HRM )分析的 PCR 试剂盒。技术特点Fast-Plus EvaGreen® qPCR Master Mix 是一种既适用于快速循环 qPCR 又适用于高分辨率熔解曲线(HRM)分析的 PCR 试剂。该试剂体系囊括了PCR领域的两项突破性技术:EvaGreen® PCR 染料和 Cheetah Taq
成功做完了逆转录,这时候可能有些疲累了。筛引物、做定量的时候要加样的孔也较多,即使使用了 qPCR 预混液,也有加错样的可能发生。诺唯赞的 ChamQTM SYBR® Color qPCR Master Mix 系列(Q411 /Q421 /Q431 /Q441)提供不同颜色的试剂,利用移液过程中的变色效应,追踪移液过程,可以极大的减少移液错误。 引物设计有原则 在使用 SYBR 染料法时,引物设计需遵循以下原则:引物长度 18~25bp,产物长度 80~300bp,GC 含量 40~60
充分的准备是实验成功的关键,那么,qPCR 实验需要提前做好哪些了解呢? 试剂的储存条件 市面上大多数 qPCR 试剂推荐 - 20 ℃ 避光长期储存。 Vazyme 的 ChamQTM 和 AceQ® 两个系列的 qPCR Master Mix,长期储存应置于 - 20 ℃ 避光,解冻后可于 4 ℃ 短暂存放;避免反复冻融。 原始模版稀释倍数 尽量选择 Ct 值落在 15 - 28 范围的稀释倍数作为原始模板稀释度。 反应体系与次数 推荐 20 μl 体系,Vazyme












