- ￥241 - 460
- gelatins/江蓝纯
- JC_CC5584
- 国内
- 2025年07月09日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
Multiplex PCR Kit
- 保质期：
3年
- 供应商：
上海机纯实业有限公司
- 保存条件：
低温保存
- 规格：
50次×20ul / 100次×20ul
| 规格： | 50次×20ul | 产品价格： | ￥241.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 100次×20ul | 产品价格： | ￥460.0 |
Mult iplex PCR Kit
产品特点
多重 PCR 是指在单个 PCR 反应中同时对多个基因座位进行扩增的PCR技术，操作步骤和普通 PCR 相同，但可同时检测多个片段，在科学研究和疾病诊断等多个领域有重要意义。本试剂盒含有多重 PCR 专用热启动 DNA 聚合酶Multiplex DNAPolymerase，具有极高的扩增特异性和灵敏度。配合针对多重 PCR 反应深度优化的专用缓冲液5×Multiplex Buffer，特别适用于微量样本的多位点检测。
它具有以下特点：
1. 适用范围广，可以高效地完成绝大多数多重 PCR 检测；
2. 扩增稳定，可以程度地减少反应体系优化步骤；
3. 扩增缓冲高度优化，较大程度上抑制非特异性扩增。
4. 单独的镁离子成分，可根据实验需求自行调整。
成份规格
|
产品组成 |
规格 |
|
5×Multiplex Buffer（无 MgCl2） |
210μl / 420μl |
|
Multiplex DNA Polymerase |
60μl / 110μl |
|
dNTP（10mM） |
30μl /60μl |
|
MgCl2（25mM） |
60μl / 120μl |
|
-20℃保存一年 | |
|
本产品仅供科研使用 ，不得用于其它用途 | |
使用方法
（注 意：以下举例推荐PCR体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的调整和优化）
1.PCR体系推荐反应体系（20μl）
|
试剂 |
用量 |
|
模板 DNA |
< 1μg |
|
Primer mix (10 μM each) |
0.5μl |
|
5×Multiplex Buffe（无MgCl2） |
4μl |
|
Multiplex DNA Polymerase |
1μl |
|
MgCl2（25mM） |
1μl |
|
dNTP（10mM） |
0.5μl |
|
ddH2O |
Up to 20μl |
注 意：
推荐引物反应终浓度为每条引物 0.1 μM，可在 0.05 - 0.4 μM 之间调整。MgCl2终浓度可在 1.0 - 4.0 mM之间调整。
2. PCR 反应程序
|
过程 |
温度 |
时间 | |
|
预变性 |
95℃ |
5min | |
|
25－35cycles |
变性 |
95℃ |
30sec |
|
退火 |
60℃ |
30sec | |
|
延伸 |
72℃ |
60sec/kb | |
|
最后延伸 |
72℃ |
5min | |
注意：
A. 多数情况下，使用默认退火温度即可。如扩增效果不佳，可通过设置退火温度梯度实验来摸索最适退火温度。
B. 预变性时间为 5 min，用于充分释放酶活。请勿降低温度或缩短时间。
C. 对于低拷贝模板、长片段或者扩增片段较多的情况，可延长退火时间至 3 min 以提高扩增效率。
D. 延伸时间以最长片段为准设定。适度延长延伸时间有助于提高扩增产量且有利于困难模板扩增。延伸时间过长可能会导致非特异性扩增增多。
E. 扩增微量样本时，可通过增加循环数提高扩增产物量。循环数过多可能会导致非特异性扩增增多。
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文献和实验Troubleshooting for PCR and multiplex PCR
some/all of the above 3. Reaction was working before, but now I can't get any product. Make sure all PCR ingredients are taken in the reaction (buffer, template, Taq, etc) Change the dNTP solution (very sensitive to cycles of thawing and freezing, especially in multiplex PCR)
the AllPrep DNA/RNA 96 Kit. Six targets (195-1150 bp) were amplified by multiplex PCR and then analyzed on the QIAxcel system. Li: liver; Ki: kidney; Lu: lung; In: intestine; Sp: spleen; NTC: no template control (shows upper and lower markers). Total
Multiplex PCR is a variant of PCR which enabling simultaneous amplification of many targets of interest in one reaction by using more than one pair of primers. Since its first description in 1988 by Chamberlain et al, this method has been applied
技术资料
