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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
有效期2年
- 英文名:
Hieff Taq DNA Polymerase
- 库存:
大量
- 供应商:
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 规格:
1000U
产品信息
| 产品名称 |
产品编号 |
规格 |
价格(元) |
| Hieff® Taq DNA Polymerase DNA聚合酶 |
10101ES80 |
1000 U |
155.00 |
| Hieff® Taq DNA Polymerase DNA聚合酶 |
10101ES90 |
5×1000 U |
735.00 |
产品描述
Hieff® Taq DNA Polymerase是嗜热性Thermus aquaticus表达的热稳定重组型DNA聚合酶,分子量为94 KD。具有5’→3’聚合酶活性和5’→3’外切酶活性,无3’→5’外切酶活性。扩增产物具有3′-dA,可直接用于TA克隆。
产品组分

| 编号 |
组分 |
产品编号/规格 |
|
| 10101ES80(1000 U) |
10101ES90(5×1000 U) |
||
| 10101-A |
10×Taq Buffer (Mg2+ Free) |
4×1 mL |
20×1 mL |
| 10101-B |
25 mM MgCl2 |
2×1 mL |
10×1 mL |
| 10101-C |
Hieff® Taq DNA Polymerase (5 U/μL) |
200 μL |
5×200 μL |
产品应用
基因型鉴定、菌落PCR等常规PCR。
活性定义
用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,74℃,30 min内,摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位(U)。
质量控制
核酸外切酶残留检测:10 U本品和0.5 μg λDNA-Hind Ⅲ,37℃下孵育4 h,DNA的电泳谱带无变化。
切口酶残留检测:10 U本品和0.5 μg IL23R质粒,37℃下孵育4 h,DNA的电泳谱带无变化。
RNase残留检测:10 U本品和0.5 μg 293T细胞总RNA,37℃下孵育1 h,RNA的电泳谱带无变化。
运输与保存方法
冰袋运输。-20℃保存,有效期2年。
注意事项
1)为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
2)本产品仅作科研用途!
PCR反应体系(冰上配制)
| 组分 |
体积(μL) |
终浓度 |
| ddH2O |
to 50 |
- |
| 10×Taq Buffer(Mg2+ Free) |
5 |
1× |
| 25 mM MgCl2 |
3 |
1.5 mM |
| dNTP Mix (10 mM each) |
1 μL |
0.2 mM |
| 模板DNA |
optional |
- |
| 引物1(10 μM) |
2 μL |
0.4 μM |
| 引物2(10 μM) |
2 μL |
0.4 μM |
| Hieff® Taq DNA Polymerase (5 U/μL) |
0.4 μL |
0.04 U/μL |
【注】:
1)Mg2+ 终浓度:Mg2+最佳浓度为1.5-2 mM,如有需要,可0.2-0.5 mM为间隔向上摸索Mg2+最佳使用浓度。
2)聚合酶添加:室温下聚合酶有一定程度的5’-3’聚合酶活性,为了防止非特异性扩增,建议将聚合酶在最后一步加到反应体系中。
3)聚合酶浓度:推荐使用0.04 U/μL。可以在0.025-0.04 U/ μL之间进行优化。
4)不同模板的推荐使用量(50 μL反应体系):
| 模板种类 |
扩增片段 |
| 基因组DNA |
50 ng~100 ng |
| 质粒DNA |
10 pg~20 ng |
| cDNA |
1~5 μL(不超过反应体系的1/10) |
PCR扩增程序
| 循环步骤 |
温度(ºC) |
时间 |
循环数 |
| 预变性 |
94 |
30 sec-5 min |
1 |
| 变性 |
94 |
30 sec |
35 |
| 退火 |
50-60 |
30 sec |
|
| 延伸 |
72 |
60 sec/kb |
|
| 终延伸 |
72 |
10 min |
1 |
【注】:
1)预变性温度和时间:推荐使用94℃。预变性推荐时间:质粒DNA等简单模板为30 sec;cDNA、基因组DNA等复杂模板为3 min;高GC含量模板为5-10 min。
2)退火温度和时间:推荐使用60℃,也可根据需要,设立温度梯度去摸索引物退火的最适温度。推荐退火时间设置为20 sec,可以在10-30 sec内调节。退火时间太长可能导致扩增产物在胶上呈弥散状。
3)扩增产物:请将PCR扩增产物放置于-20℃保存,防止DNA发生降解。
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| 产品名称 |
货号 |
规格 |
| 10102ES03/08 |
1/5×1 mL |
|
| 10103ES03/08 |
1/5×1 mL |
|
| 10106ES03/08 |
1/5×1 mL |
|
| 10108ES03/08 |
1/5×1 mL |
|
| 10149ES03/08 |
1/5×1 mL |
HB210923
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文献和实验for both DNA sample and reaction mixture preparation, is strongly recommended.The reagents for PCR should be prepared separately and used solely for this purpose. Autoclaving of all solutions, except dNTPs, primers and Taq DNA Polymerase is recommended
位点,而我们想在载体的这个位点引入DNA片段,因此,DNA片段不能通过酶切方式得到,这时Lightening Assembly Cloning Kit可以帮您解决问题。6. RNA干扰载体构建。 二、Super Fast Taq DNA Polymerase有没有一种DNA聚合酶能够超快速扩增? 有没有一种DNA聚合酶能够超快速高保真扩增? 有没有一种DNA聚合酶能够从复杂模板超快速高保真扩增? 所有这些要求,北京康碧泉公司代理的Gene-Foci Super
录酶的同时,激活Taq酶,进行PCR反应。另一家公司Epicentre有一种MasterAmpTM Tth DNA聚合酶,本身就具有逆转录酶活性,也可用作RT-PCR。 高保真Taq酶 下游应用为基因筛选、测序、突变检测,分子诊断等等的用户,往往对PCR保真性要求很高,保真性的一个通用标准是错配率,错配率越低保真性越好。普通Taq酶的错配率在2-5X10-5碱基/循环数,而高保真Taq酶错配率可达10-6数量级,大大降低了出错的可能。其原理主要是因为高保真Taq酶具有3'到5'核酸外切











