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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
Multiplex PCR Kit
- 保质期:
3年
- 供应商:
江西江蓝纯生物试剂有限公司
- 保存条件:
低温保存
- 规格:
50次×20ul / 100次×20ul
| 规格: | 50次×20ul | 产品价格: | ¥241.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 100次×20ul | 产品价格: | ¥460.0 |
Mult iplex PCR Kit
产品特点
多重 PCR 是指在单个 PCR 反应中同时对多个基因座位进行扩增的PCR技术,操作步骤和普通 PCR 相同,但可同时检测多个片段,在科学研究和疾病诊断等多个领域有重要意义。本试剂盒含有多重 PCR 专用热启动 DNA 聚合酶Multiplex DNAPolymerase,具有极高的扩增特异性和灵敏度。配合针对多重 PCR 反应深度优化的专用缓冲液5×Multiplex Buffer,特别适用于微量样本的多位点检测。
它具有以下特点:
1. 适用范围广,可以高效地完成绝大多数多重 PCR 检测;
2. 扩增稳定,可以程度地减少反应体系优化步骤;
3. 扩增缓冲高度优化,较大程度上抑制非特异性扩增。
4. 单独的镁离子成分,可根据实验需求自行调整。
成份规格
|
产品组成 |
规格 |
|
5×Multiplex Buffer(无 MgCl2) |
210μl / 420μl |
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Multiplex DNA Polymerase |
60μl / 110μl |
|
dNTP(10mM) |
30μl /60μl |
|
MgCl2(25mM) |
60μl / 120μl |
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-20℃保存一年 | |
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本产品仅供科研使用 ,不得用于其它用途 | |
使用方法
(注 意:以下举例推荐PCR体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的调整和优化)
1.PCR体系推荐反应体系(20μl)
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试剂 |
用量 |
|
模板 DNA |
< 1μg |
|
Primer mix (10 μM each) |
0.5μl |
|
5×Multiplex Buffe(无MgCl2) |
4μl |
|
Multiplex DNA Polymerase |
1μl |
|
MgCl2(25mM) |
1μl |
|
dNTP(10mM) |
0.5μl |
|
ddH2O |
Up to 20μl |
注 意:
推荐引物反应终浓度为每条引物 0.1 μM,可在 0.05 - 0.4 μM 之间调整。MgCl2终浓度可在 1.0 - 4.0 mM之间调整。
2. PCR 反应程序
|
过程 |
温度 |
时间 | |
|
预变性 |
95℃ |
5min | |
|
25-35cycles |
变性 |
95℃ |
30sec |
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退火 |
60℃ |
30sec | |
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延伸 |
72℃ |
60sec/kb | |
|
最后延伸 |
72℃ |
5min | |
注意:
A. 多数情况下,使用默认退火温度即可。如扩增效果不佳,可通过设置退火温度梯度实验来摸索最适退火温度。
B. 预变性时间为 5 min,用于充分释放酶活。请勿降低温度或缩短时间。
C. 对于低拷贝模板、长片段或者扩增片段较多的情况,可延长退火时间至 3 min 以提高扩增效率。
D. 延伸时间以最长片段为准设定。适度延长延伸时间有助于提高扩增产量且有利于困难模板扩增。延伸时间过长可能会导致非特异性扩增增多。
E. 扩增微量样本时,可通过增加循环数提高扩增产物量。循环数过多可能会导致非特异性扩增增多。
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