原代细胞培养（鉴定）

原代细胞培养注意事项有哪些？

在细胞生物学领域，原代细胞培养作为解开生命奥秘的重要工具，要求实验者遵循一系列关键的注意事项以确保可靠的实验结果。   本文将深入探讨如何在原代细胞培养过程中应用这些关键要点：   原代培养要重点注意无菌操作，所用器械需提前高压灭菌； 鼠胚原代培养时，获取组织较少，建议在冷光源体视显微镜下操作； 原代细胞培养过程比较慢，培养时间最少需要一周的时间。若 2 天后可能会出现培养基变黄的现象，且无漂浮物，排除污染，属于正常现象。这是因为细胞在贴壁生长过程中释放了 CO2 和其他物质导致培养液 PH

miRNA的靶基因的寻找与鉴定

、 miRNA靶基因的验证与miRNA靶基因 的预测方法相比，对miRNA靶基因进行实验验证的方法并不多，目前还没有一个快速、简便、高通量的鉴定方法。最直接的鉴定方法是， 利用荧光定量PCR及Westernblot方法分别检测转染或敲低miRNA后细胞中mRNA水平及蛋白水平的变化，从而确定miRNA与靶基因的对应关系。这种方法能够直接鉴定出miRNA的靶基因， 准确度高但不能鉴定miRNA的靶位点。转染或敲低miRNA：方式主要有两种，一种是构建miRNA过表达载体的稳定表达系统，一种是人工合成miRNA

新细胞污染鉴定

关于如何鉴定收到的新细胞是否有污染，很多站友，特别是新接触细胞培养的站友通常没有太多经验，在此我分享下我这边接收到新细胞后是如何判断是否有污染的。一、肉眼观察以下几项：1. 细胞瓶身：如果瓶身上没有裂缝，正常；如果瓶身上有裂缝，则污染几率非常大。2. 培养基颜色：如果培养基颜色是红色或者粉色，正常；如果是橙色，则可能是污染或者细胞过密；如果是黄色，则污染几率非常大。3. 培养基澄清度：如果培养基澄清，正常；如果有少许漂浮物，则可能是污染或者有细胞凋亡；如果培养基很浑浊，甚至出现絮状物，则污染