miRNA靶基因验证服务

利用miRNA产品及报告基因质粒载体体外验证miRNA靶基因。

将miRNA mimic与pmiR-RB-Report™报告基因质粒载体共转目的细胞系，通过萤火虫荧光素酶的活性分析，即可获得miRNA对潜在靶基因的调控作用的验证数据。

pmiR-RB-Report™报告基因质粒载体转录后可形成萤火虫荧光素酶与靶基因3’UTR区域组合而成的特殊mRNA，如果miRNA mimic能够与包含靶基因3’UTR的mRNA互补结合，则荧光素酶的表达活性也收到显著调控，故通过检测荧光素酶的荧光强度即可定量分析miRNA对靶基因的mRNA调控效果。

由于pmiR-RB-Report™报告基因的3’UTR长度不一，大多数长度为1～2.5kb之间。一般建议构建长度不超过2.5kb，同时建议构建单位点突变载体。

将pmiR-RB-Report™ h-AKT1报告基因质粒载体(1ug)及hsa-miR-146a mimic (50nM)共转A549细胞系，采用双荧光素酶检测试剂盒检测结果表明hsa-miR-146a对AKT1 3’UTR有显著调控作用。

将pmiR-RB-Report™ h-BCL2报告基因质粒载体(1ug)及hsa-miR-9 mimic (50nM)共转A549细胞系，采用双荧光素酶检测试剂盒检测结果表明hsa-miR-9对BCL2 3’UTR有较明显调控作用。