miRNA慢病毒构建与包装服务

服务简介

microRNA(miRNA)是真核心生物中的一类内源性的具有调控功能的非编码RNA，长度约为22bp。miRNA首先在细胞核内转录出较长的初级miRNA（primary miRNA，pri- miRNA），然后在核心内由Drosha加工成60-70个核苷酸的发夹状RNA，即前体miRNA（miRNA precusor，pre- miRNA），在Exprotin-5复合物的帮助下被转运出胞核，在胞浆中由Dicer剪切成为成熟的miRNA，随即被整合进RNA沉默复合物（RISC）中，基于与mRNA完全或不完全酸对来调节基因表达。

吉满生物专注于miRNA相关研究并提供相关产品和服务，miRNA mimics（模拟物）、inhibitor（抑制物）、miRNA过表达、干扰、慢病毒、稳定细胞系、及报告基因等。根据客户研究的miRNA信息及实验要求，调取pre-miRNA或设计shRNA，将pre-miRNA/shRNA构建到指定的慢病毒载体上，通过包装获得过表达目的miRNA/干扰目的miRNA的慢病毒颗粒。此外，miRNA通过碱基互补配对的方式识别靶基因的3’UTR区，并根据互补程度的不同指导沉默复合体降解靶mRNA或者阻遏靶mRNA的翻译。利用荧光素酶报告基因检测实验寻找或验证miRNA对靶基因的调控作用是当前最常用的技术。

推荐使用：

1.适用于难转染细胞， 如神经元、悬浮细胞、干细胞等；

2. 适用于构建稳定细胞系；

3.适用于In vivo 实验，包括稳定表达细胞株成瘤实验、局部注射等。

 

服务流程
 

产品简介
根据客户研究的miRNA，将miRNA或者miRNA inhibitor构建到慢病毒载体，生产的病毒颗粒可以直接用于感染细胞或者动物实验。

服务类别
●过表达miRNA慢病毒服务
将成熟miRNA、pre-miRNA或者pri-miRNA构建到慢病毒过表达载体中，其中pri-miRNA（含侧翼序列）的方式由于保留了每个microRNA独自的原始天然双臂结构，效果更好，是应用最为广泛的方法。

●抑制miRNA慢病毒服务
miRNA抑制剂(miRNA inhibitor)表达后则高效、特异地结合细胞内成熟的靶miRNA，形成稳定的复合物，阻止了miRNA对靶标mRNA的降解或者翻译抑制，上调miRNA靶标基因的表达。

产品优势
» 操作简洁，无需转染试剂；
» 实验周期短；
» 对分裂期和非分裂期细胞均有感染作用；
» 可在短时间内获得稳定表达特定microRNA/miRNA inhibitor的细胞株。

可提供的载体

载体编号	元件顺序	用途	基因导入	真核抗性	荧光标记
pGMLV-Mi	CMV-GFP-miRNA-PGK-puromycin	miRNA表达	慢病毒载体	Puromycin	GFP
pGMLV-MiI1	CMV-RFP-U6-miRNAinhibitor-PGK-puromycin	miRNA抑制	慢病毒载体	Puromycin	RFP
pGMLV-MiI2	CMV-RFP-H1-miRNAinhibitor-PGK-puromycin	miRNA抑制	慢病毒载体	Puromycin	RFP

产品属性

产品组成：	合同量RNAi病毒，合同量对照病毒，polybrene，实验报告，说明书
质量保证：	靶点序列正确，病毒滴度高
供货周期：	50工作日起
价格体系：	询价
运输说明：	干冰冻存病毒快递寄送
保存方式：	-80℃冰箱或液氮冻存，融化后短时间4℃保存，避免反复冻融
风险提示：	反复冻融或高温存储会降低病毒滴度；慢病毒属于生物安全II级制品，请按照生物安全II级制品规程操作

 

其它相关服务：

1.cas9大片段删除细胞系构建；

2.miRNA对靶基因的调控；

3.稳定细胞系构建；

4.AAV腺相关病毒包装。