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- 2025年07月13日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
29
- 英文名：
X-Gal 溶液，20mg/mL
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
10mL
1）X-Gal 溶液，20mg/mL10mL费用客户提供材料
2）提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供：
新鲜材料或正确保存条件下材料（组织、细胞、细菌等）
4℃保存一周，-20℃保存一个月，-80℃保存一年血液样品（EDTA，肝素，柠檬酸钠抗凝）
详细的背景资料：来源、特点、类型等
我们提供：基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证：高纯度RNA/DNA、完整货期：3-5个工作日
以下是X-Gal 溶液，20mg/mL10mL费用的详细介绍点击了解更多“克必隆”克隆及表达产品：
储存事项:
A. X-Gal 溶液，20mg/mL10mL费用在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打，颠倒混匀，充分溶解RNase A和DNase I后，按照每次使用量分装－20℃冻存，有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项：
1. X-Gal 溶液，20mg/mL10mL费用组织和细胞取材速度要快，在获取后应当尽快浸入RNAwait，以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存，因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取：样本从-20℃或-80℃冰箱取出后，复苏到室温后，取出组织块，再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞，去除RNAwait，再用于提取RNA。后继的处理（如组织匀浆）可以在室温下进行，不必在液氮中操作，RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
实验步骤：
(1) X-Gal 溶液，20mg/mL10mL费用实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
Tubulin-Tracker Red( 微管红色荧光探针 )40μL dCTP 溶液，2.5mM2mL
Zinquin 乙酯5mg dCTP 溶液，100mM0.5mL
1400W(iNOS 抑制剂 )2mg DB3.1 感受态细胞10×100μL
5-Fluorouracil(5- 氟脲嘧啶 )1mL dATP 溶液，2.5mM2mL
Ac-DEVD-FMK(Caspase3Inhibitor)20μL dATP 溶液，100mM0.5mL
电泳级 MOPS100g 口腔采样拭子 50 支
剥离硅烷50mL 克必隆平末端克隆试剂盒（组成型）20 次
亲和硅烷 25mL 克必隆零背景 T 载体20 次
电泳级甘油100mL 克必隆常态转化液20 次
电泳级二甲苯蓝 FF 溶液，1%10mL 克必隆 G 载体2μg
接头 DNA(BamH I(Bgl II)-Sma I)5nmol 超级杂交液 ( 芯片 )10mL
接头 DNA(EcoR I-Sma I)5nmol 超纯水100mL
接头 DNA(Hind Ⅲ -Sma I)5nmol 常用PCR引物100uL
接头 DNA(Sal I-Sma I)5nmol 草杆菌 PCR Mix 4100 次
接头 DNA(pSma I)5nmol 彩色 Acryl 助沉剂1g
产黄纤维单胞菌 淡紫色拟青霉
顶头孢霉 李克犁头霉或伞枝梨头霉
深红红螺菌 猴头菌
生孢梭菌CMCC64941冻干粉南京便诊 法氏柠檬酸杆菌
巴氏醋杆菌巴氏亚种 黄萎轮枝孢
肺炎克雷伯菌ATCC4352冻干粉 解藻弧菌(溶藻弧菌)
凤尾菇、漏斗状侧耳 生孢梭菌AS1.2417冻干粉南京便诊
英诺克李斯特菌 日本根霉
黏质沙雷菌冻干粉 放射性根瘤菌
小肠结肠炎耶尔森氏菌 淡紫灰链霉菌
X-Gal 溶液，20mg/mL10mL费用化脓性链球菌ATCC19615冻干粉 伊氏李斯特氏菌
草菇 淡紫青霉
福氏志贺氏菌 胶质芽孢杆菌
苏云金芽胞杆菌杀虫亚种Bacillusthuringiensissubsp.entomocidus 藤黄微球菌
南方树舌 虫草
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文献和实验系列载体DNA(或其他带有lacZ 基因载体DNA)以lacZ 缺失细胞为宿主进行转化时、或用M13噬菌体载体DNA进行转染时，如果在平板培养基中加入X–Gal和IPTG，由于β–半乳糖苷酶的α–互补性，可以根据是否呈现白色菌落(或噬菌斑)而方便地挑选出基因重组 体。 二、使用方法 ： 首先把X-Gal配制成20 mg/ml的二甲基甲酰胺(DMF)溶液(-20℃避光保存)，然后在100 ml的琼脂培养基中，加入200 μl的上述溶液、100 μl的IPTG(24 mg
相关专题 DNA连接与转化 X-gal溶液配制方法 X-gal为5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D半乳糖苷。用二基甲酰胺溶解X-gal配制成的20mg/ml的贮存液。保存于一玻璃管或聚丙烯管中，装有X-gal溶液的试管须用铝箔封裹以防因受光照而被破坏，并应贮存于-20℃。X-gal溶液无须过滤除菌。 IPTG溶液配制方法 IPTG为异丙基硫代-β-D-半乳糖苷（分子量为238
, transfect the DNA into mammalian cells, and then fix and stain a tissue with X-gal. The cells that turn blue must have the beta galactosidase enzyme, the product of the lac Z gene, which could only have been expressed from the donated promoter. Ergo
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