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- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
25
- 英文名：
非冻型细菌 RNA 保存液
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
100mL
服务流程：
1）非冻型细菌 RNA 保存液100mL说明书客户提供材料
2）提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供：
新鲜材料或正确保存条件下材料（组织、细胞、细菌等）
4℃保存一周，-20℃保存一个月，-80℃保存一年血液样品（EDTA，肝素，柠檬酸钠抗凝）
详细的背景资料：来源、特点、类型等
我们提供：基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证：高纯度RNA/DNA、完整货期：3-5个工作日
储存事项:
A. 非冻型细菌 RNA 保存液100mL说明书在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打，颠倒混匀，充分溶解RNase A和DNase I后，按照每次使用量分装－20℃冻存，有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项：
1. 非冻型细菌 RNA 保存液100mL说明书组织和细胞取材速度要快，在获取后应当尽快浸入RNAwait，以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存，因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取：样本从-20℃或-80℃冰箱取出后，复苏到室温后，取出组织块，再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞，去除RNAwait，再用于提取RNA。后继的处理（如组织匀浆）可以在室温下进行，不必在液氮中操作，RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
4mL DNA 离心超滤管 (9-15 KD)1个 绿如蓝核酸染料 (UV)0.5mL
4mL DNA 离心超滤管 (30-50 KD)1个 绿如蓝蛋白染液250 次
4mL DNA 离心超滤管 (90-150 KD)1个 绿如兰核酸染料 ( 可见光型 )10mL
4mL DNA 离心超滤管 (150-250 KD)1个 卵巢上皮细胞生长因子5mL
4mL DNA 离心超滤管 (300-500 KD)1个 卵白蛋白标准品，2mg/mL1mL
软骨 RNAout50 次 柱式真菌 RNA-DNA 双提试剂盒50 次
柱式软骨 RNAout50 次 柱式真菌 DNAout50 次
石蜡包埋组织 RNAout30 次 柱式藻类 RNAout50 次
免 RNA 提取 FFPE RT-PCR 试剂盒30 次 柱式血液 RNAout50 次
柱式昆虫 RNAout50 次 柱式血液 mtDNAout，测序级10 次
柱式血液 RNAout50 次 柱式植物 RNAout 2.050 次
大提柱式血液 RNAout5次 柱式植物 RNA-DNA 双提试剂盒50 次
液体 RNAout50 次 柱式植物 mtDNAout，测序级10 次
液体 RNAout250 次 柱式植物 DNAout50 次
柱式血清血浆 RNAout50 次 柱式真菌 RNAout50 次
乳糖胆盐发酵培养基颗粒 英文名称； Lactose Bile Broth 规格； 300ml/袋*10
结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA）颗粒 英文名称； Violet Red Bile Agar 规格； 300ml/袋*10
Baird-Parker琼脂基础颗粒 英文名称； Baird-Parker Agar Base 规格； 300ml/袋*10
7.5%氯化钠肉汤颗粒 英文名称； 7.5% Sodium Chloride Broth 规格； 225ml/袋*10
孟加拉红培养基颗粒 英文名称； Rose Bengal Medium 规格； 300ml/袋*10
志贺氏菌增菌肉汤 Shigiella Broth 250g
志贺氏菌显色培养基 1000ml
柯氏尿素琼脂 250g
MLCB寒天培地 MLCB Agar 250g
GN增菌液（10ml） 10ml*20
非冻型细菌 RNA 保存液100mL说明书营养琼脂斜面 用于细菌的纯化培养用途用于细菌的传代培养。成分（g/L）蛋白胨 5.0g牛肉粉 3.0g琼脂 15.0gPH值 7.3-7.4用法称取本品23克, 加热溶解于1000ml蒸馏水中，分装试管， 121℃高压灭菌15分钟，摆成斜面备用。※请放置阴凉干燥处保存
豆粉琼脂 用于配制血平板用途:用于分离营养要求较高的致病菌。成分(g/L)牛心浸粉 15.0氯化钠 5.0豌豆浸粉 3.0琼脂 15.0pH值7.4-7.6 25℃用法称取本品 3.8g,加热溶解于100ml 蒸馏水中,121℃高压灭菌 15 分钟,冷至 50-55℃时无菌操作加入 5%-10% (V/V)预温至 37℃的无菌脱纤维羊血,混匀,倾入无菌平皿。
磷酸盐缓冲液（pH7.2） 用于样品的稀释用途:用于检测大肠菌群、大肠杆菌时样品稀释剂。成分(g/L)磷酸二氢钾 34.0 7.0pH值7.2 25℃用法称取本品 41.0 g,加热搅拌溶解于 1000ml 蒸馏水中,作为储存液,取储存液 1.25ml,用蒸馏水稀释至 1000ml,分装,121℃高压灭菌 15 分钟,备用。
脑心浸出液肉汤（BHI）GB标准 用于金黄色葡萄球菌的纯化培养用途:营养丰富,用于培养各种细菌。成分(g/L)胰蛋白胨 10.0牛心浸粉 17.5氯化钠 5.0葡萄糖 2.0磷酸氢二钠(12H2O) 2.5pH值7.4 ± 0.2 25℃用法称取本品 38.5g,加热搅拌溶解于 1000ml 蒸馏水中,121℃高压灭菌 15 分钟,备用。
实验步骤：
(1) 非冻型细菌 RNA 保存液100mL说明书实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
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文献和实验的纯度。 5．干燥 从布氏漏斗上取下有沉淀物的滤纸，放在8cm 表面皿上，置于80℃烘箱内干燥。将干燥后的RNA 制品称重。 6．含量测定 称取一定量干燥后的RNA 产品配制成浓度为10～50μg/mL 的溶液，在751 型 分光光度计 上测定其260nm 处的光密度值，按下式计算RNA 含量： 式中：OD260nm 为260nm 处的光密度值；L 为比色杯的光径（cm
裂解必需充分且操作迅速。裂解不完全会降低最后得率，因为一部分 RNA 会残留在未裂解的细胞中。细胞裂解之后要看不见颗粒状物质（结缔组织和骨除外）。在清洗和裂解细胞时最好在低温下操作，防止在操作过程中释放的内源 RNase 降解了 RNA。 4. 酵母和一些细菌由于细胞壁的特别结构，可以加入 Trizol 试剂同时加入无 RNase 的玻璃珠并剧烈振荡，使细胞裂解充分。2-8℃ 避光保存一年。 三、预备工作 RNA酶（Rnase）是导致 RNA 降解最主要的物质。此酶非常稳定，在一些极端
，那么在药品称量、调 pH 值等过程中 Tris 缓冲液会造到 RNase 的再次污染，所以是一个两难的境地。但是今天我要谈的是 RNase 并不顽固，高压灭菌可以去除其大量活性。 下面的实验照片很清楚的显示了高压灭菌的效果。实验很简单，将不同含量的 RNase 用高压灭菌处理，然后与未高压灭菌处理的 RNase 一起来降解 RNA（37 度 1 小时），结果表明，当 RNase 的污染量小于 100 ng/ml 时，高压灭菌可以去除其活性。 这张照片还说明了一个问题，当你的 RNA
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