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- 2025年07月11日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
23
- 英文名：
非冻型血液 RNA 保存液
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
100mL
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
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非冻型血液 RNA 保存液100mL规格详细介绍：
操作步骤:
1. 非冻型血液 RNA 保存液100mL规格匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c．细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物完全分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml，室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
实验要点：
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2．在最适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和氯仿的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的（—氯仿—=25:24:1），的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
以下是非冻型血液 RNA 保存液100mL规格的相关产品：
15mL DNA 离心超滤管 (9-15 KD)1个 硫酸新霉素干粉1g
15mL DNA 离心超滤管 (30-50 KD)1个 硫酸庆大霉素溶液 ,15mg/mL2mL
15mL DNA 离心超滤管 (90-150 KD)1个 硫酸葡聚糖1g
15mL DNA 离心超滤管 (150-250 KD)1个 硫酸链霉素溶液 ,50mg/mL10mL
柱式 DNA 胶回收试剂盒50 次 硫酸卡那霉素溶液 ,50mg/mL10mL
动物 RNAout(TRIzol) 250mL 柱式质粒 DNAout50 次
柱式动物 RNAout50 次 柱式质粒 DNAout100 次
大提柱式动物 RNAout5次 柱式植物油 DNAout50 次
柱式动物 RNA-DNA 双提试剂盒50 次 柱式植物叶绿体 DNAout15 次
血液 RNAout 50 次 柱式植物 RNAout50 次
柱式质粒 DNAout50 次 无包被磁珠2mL
柱式质粒 DNAout100 次 无 RNase 的 DNase 溶液 ,1U/μL300U
革氏阳性细菌质粒 DNAout50 次 蜗牛酶干粉5g
柱式无内毒素质粒 DNAout50 次 胃蛋白酶抑制剂溶液，1 mg/mL1mL
大提柱式质粒 DNAout 5次 微型离心管专用研磨杵 ( 有离心管 ) 50 套
麦康凯肉汤USP颗粒 英文名称； MacConkey Broth Medium 规格； 250g
玫瑰红钠琼脂培养基颗粒 英文名称； Rose Bengal Agar Medium 规格； 300ml/袋*10
10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤培养基颗粒 英文名称； 10% Trypticase Soy Broth 规格； 225ml/袋*10
麦康凯琼脂（中国药典）颗粒 英文名称； MacConkey Agar Medium 规格； 250g
大豆酪蛋白琼脂培养基（TSA）颗粒 英文名称； Tryptose Soya Agar 规格； 300ml/袋*10
制霉素检定培养基 Nystatin Test Medium 250g
多粘菌素B用培养基 250g
抗生素检定培养基9号 Antibiotic Agar NO.9 250g
抗生素检定培养基2号高PH8.0-8.2 Antibiotic Agar NO.2 （PH8.0-8.2） 250g
抗生素检定培养基5号 Antibiotic No.5（PH8.0) 250g
非冻型血液 RNA 保存液100mL规格营养肉汤管(含棉签) 用于细菌增菌培养用途：用于细菌增菌培养规 格:10ml*20支/包有效期:六个月保 存:室温
0.9%无菌氯化钠溶液管 用于微生物培养规 格:9ml*20支/包有效期:一年保 存:室温
硫乙醇酸盐流体培养基管 主要用于药品的厌氧培养，可立玻璃试管，可注射加样用途：主要用于药品的厌氧培养，可立玻璃试管，可注射加样。规 格:7.5ml*20支/盒有效期:一年保 存:室温
沙氏葡萄糖液体培养基管 药品中霉菌和酵母菌的培养用途：药品中霉菌和酵母菌的培养规 格:10ml*20支/包有效期:一年保 存:室温
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文献和实验的纯度。 5．干燥 从布氏漏斗上取下有沉淀物的滤纸，放在8cm 表面皿上，置于80℃烘箱内干燥。将干燥后的RNA 制品称重。 6．含量测定 称取一定量干燥后的RNA 产品配制成浓度为10～50μg/mL 的溶液，在751 型 分光光度计 上测定其260nm 处的光密度值，按下式计算RNA 含量： 式中：OD260nm 为260nm 处的光密度值；L 为比色杯的光径（cm
而破坏 mRNA 活性。 2.但DEPC能与胺和巯基反应因而含 Tris 和 DTT 的试剂不能用 DEPC 处理。 四、实验步骤 1. 取 50~100mg 的组织加入1 ml Trizol 试剂，用匀浆器打匀（ Trizol 先放于冰上）。 2. 将匀浆室温放置 5 min。 3. 加入 200 μl 氯仿剧烈震荡混匀 30s，冰上静置 3 min。 4. 12000 rpm，4℃ 离心 15 min。 5. 将上清液小心转移到新的 1.5 ml离心管中（取 400
。 我也是建议尽快提，至少也做一些前处理。 比如拿到全血后（最好都抗凝），分一半用于分离白细胞，然后加1ml的trizol,-80度冻着，放半年没问题。（我放过一个月，完全没问题） 另一半用于提DNA，就放4度好了，放半年也没事。我连一年前的凝血和抗凝血也提出过DNA。 我给你的这种方式最省你时间了吧。 我们提RNA一般都是用trizol处理的。但trizol处理之前，先进行一步分离工作。 本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿
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