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一站式平末端克隆试剂盒20 次规格

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  • 上海邦景
  • BJ-RD781
  • 进口、国产
  • 2025年07月12日
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      20

    • 英文名

      一站式平末端克隆试剂盒

    • 保质期

      详见说明书

    • 供应商

      上海邦景

    • 保存条件

      低温冷藏

    • 规格

      20 次

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    一站式平末端克隆试剂盒20 次规格详细介绍:
    产品细节图片1
    公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列,5000余种产品
    1RNA纯化系列产品
    2DNA纯化系列产品
    3、电泳及回收系列产品
    4、探针标记及检测系列产品
    5、核酸扩增系列产品
    6、克隆表达系列产品
    7、基因组研究系列产品
    8、蛋白质研究系列产品
    9、细胞生物学研究系列产品
    10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
    以下是一站式平末端克隆试剂盒20 次规格的相关产品:
    Simvastatin(HMG-CoA Reductase 抑制剂 )10mg  96 孔板血液 DNAout( 真空法 )1

    S-Methyl-ITU.sulfate(iN0S 抑制剂 )50mg  96 孔板血液 DNAout( 离心法 )1
    SMT(iNOS 抑制剂 )100mg  96 孔板病毒 RNAout( 真空法 )1
    SNP(NO 供体 )1g  96 孔板病毒 RNAout( 离心法 )5
    SOD( 抗氧化酶 )65KU  96 孔板病毒 RNAout( 离心法 )1
    天净沙核酸浓缩剂30mL  免质粒提取筛选试剂盒1000
    柱式 RNA 纯化试剂盒50   免疫蛋白清除剂20
    低载量 PCR 片段纯化试剂盒50   RNA 提取 RT-PCR 试剂盒 100
    低载量 PCR 片段纯化试剂盒100   RNA 提取 FFPE RT-PCR 试剂盒30
    高载量 PCR 片段纯化试剂盒50   DNA 提取 PCR 试剂盒100
    内毒素清除专用亲和介质50mL  填入法 DNA 末端标记试剂盒 A5
    终点显色法内毒素定量试剂盒32   甜菜碱溶液,5MPCR 1.5mL
    动态显色法内毒素定量试剂盒48   天然蛋白 A1mg
    动态浊度法内毒素定量试剂盒1.7mL×10   天净沙通用型MLPA 试剂盒20
    凝胶法内毒素半定量试剂盒10x0.1mL  天净沙镍柱原位再生试剂盒20
    苍白芽孢杆菌   阿尔莱特葡萄球菌
    匍匐放射毛霉或雅致放线毛霉   台湾根霉
    嗜热脂肪芽孢杆菌冻干粉   银耳、白木耳  食用
    溶酪葡萄球菌   金耳、黄木耳  食用
    敏捷食酸菌   具核梭杆菌多形亚种
    发酵性酵母   苏云金芽胞杆菌库尔斯塔克亚种Bacillusthuringiensissubsp.kurstaki
    痢疾志贺菌冻干粉   蔗糖发酵管5ml 30 /
    成团肠杆菌(成团泛菌)   长根菇
    威尼斯不动杆菌   副球菌
    真线侧耳短孢变种   金龟子绿僵菌 Metarhizium anisopliae
    一站式平末端克隆试剂盒20 次规格猴头菌   健强地霉
    淡紫色拟青霉   抗辐射不动杆菌
    硫乙醇酸盐平板培养基90mm   大肠埃希氏菌(大肠杆菌带有YCplac111穿梭质粒
    白色噬琼胶菌   大肠埃希氏菌(大肠杆菌)  YIplac128穿梭质粒
    变绿粘球菌   大肠埃希氏菌(大肠杆菌测定维生素B12
    操作步骤:
    1. 一站式平末端克隆试剂盒20 次规格匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅
    b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(3.5cm直径的培养板)1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNADNA污染。
    c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
    2.将匀浆样品在室温(15-30)放置5分钟,使核酸蛋白复合物完全分离。
    3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-810000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
    5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
    6. 2-810000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅
    7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml,室温放置10分钟。
    8. 2-810000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。

    实验要点:
    1CTAB 溶液在低于15时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。  
    2.在最适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。 
    3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)mRNA。如果用和氯仿的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的(氯仿—=25:24:1),的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS DH5α菌种接种在LB 固体培养基(50μg/ml Amp), 37培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(50μg/ml Amp),37振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要

     

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