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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
39
- 英文名:
即用型高保真 PCR 试剂盒
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海邦景
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
1.5mL
(1) 即用型高保真 PCR 试剂盒1.5mL说明书实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
以下是即用型高保真 PCR 试剂盒1.5mL说明书的详细介绍点击了解更多核酸扩增产品:

储存事项:
A. 即用型高保真 PCR 试剂盒1.5mL说明书在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打,颠倒混匀,充分溶解RNase A和DNase I后,按照每次使用量分装-20℃冻存,有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀,可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项:
1. 即用型高保真 PCR 试剂盒1.5mL说明书组织和细胞取材速度要快,在获取后应当尽快浸入RNAwait,以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存,因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取:样本从-20℃或-80℃冰箱取出后,复苏到室温后,取出组织块,再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞,去除RNAwait,再用于提取RNA。后继的处理(如组织匀浆)可以在室温下进行,不必在液氮中操作,RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
JNJ-26854165 (Serdemetan)881202-45-5质量规格:>98%
SB505124694433-59-5质量规格:>98%
NLG9191402836-58-1质量规格:>98%,IDO抑制剂
维莫德吉(GDC0449)20357-25-9质量规格:>98%,hedgehog抑制剂
Zosuquidar;LY335979167354-41-8质量规格:>98%
甲磺酸齐拉西酮(标准品)Ziprasidone mesilate质量规格:HPLC法含量测定
盐酸美利曲辛(标准品)Melitracen hydrochloride质量规格:含量测定
咪唑斯汀(标准品)Mizolastine质量规格:HPLC法含量测定
地氯雷他定(标准品)Desloratadine质量规格:UV法含量测定
糠酸莫米松(标准品)Mometasone Furoate质量规格:鉴别
乙酰紫堇灵(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Acetylcorynoline
异阿魏酸(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品3-Hydroxy-4-methoxycinnamic acid
异补骨脂查尔酮;补骨脂乙素质量规格:HPLC≥98%,标准品Isobavachalcone
异补骨脂二氢黄酮(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Isobavachin
异补骨脂素(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Angelicin
小鼠E1A激活基因阻遏子1(CREG1)ELISA试剂盒 ,英文名: CREG1 ELISA Kit
人磷酸烯醇式酸羧激酶(PCK)ELISA检测试剂盒Humanphosphoenolpyruvatecarboxykinase,PCKELISAKit 96T/48T
大鼠谷氨酸免疫试剂盒 Rat Glamate ELISA Kit
CLIAKitforVEGFR-2/Flk-1ELISAKit大鼠血管内皮细胞生长因子受体2规格:48T/96T
免疫细胞化学AP酶联NBT/BCIP基础检测试剂盒(无一抗和二抗)50次
ELISAKitx人硫氧化还原蛋白规格:48T/96T
小鼠戊糖素(Peosidine)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human Phosphoglucomase (PGM) ELISA Kit 人磷酸葡萄糖变位酶(PGM)ELISA试剂盒
HumanAngiotensinaseELISAKit 人血管紧张肽酶(Angiotensinase)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
ChickenIerferonγ,IFN-γELISA试剂盒鸡γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒规格:96T/48T
载玻片细胞ERBETA蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次
Mouseglycogensyhasekinase,GSKELISAKit小鼠糖原合成酶激酶(GSK)ELISA试剂盒规格:96T/48T
即用型高保真 PCR 试剂盒1.5mL说明书小鼠纤维连结蛋白(mous FN) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装
小鼠Fractalkine(mouse Fractalkine) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装
小鼠凝血因子X(mouse FX) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装
小鼠纤维蛋白原(mouse Fibrinogen) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装
服务流程:
1)即用型高保真 PCR 试剂盒1.5mL说明书客户提供材料
2)提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供:
新鲜材料或正确保存条件下材料(组织、细胞、细菌等)
4℃保存一周,-20℃保存一个月,-80℃保存一年血液样品(EDTA,肝素,柠檬酸钠抗凝)
详细的背景资料:来源、特点、类型等
我们提供:基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证:高纯度RNA/DNA、完整货期:3-5个工作日
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文献和实验Expand High Fidelity PCR--高保真PCR
will have at least one mutation. See Boehringer data sheet for more details on error rate. Mix in an 0.2 ml thin wall microfuge tube: 1 microliter each: dATP, dGTP, dCTP, dTTP (10 mM solutions) 100 ng each primer (20-mer) 5 microliters Expand buffer +15 mM MgCl2
PCR 新手指南——手把手教您如何正确选择合适的 PCR 酶
酶。 图 1.非特异性扩增(左图)与使用热启动 DNA 聚合酶进行的特异性扩增(右图)。 如何为您的 DNA 聚合酶选择正确的形式 还有更多需要考虑的因素。选择可以简化您工作流程的聚合酶形式。PCR 聚合酶形式的选择包括即用型预混液、用于直接凝胶上样的含染料缓冲液以及用于直接 PCR 分析的所有必要成分的完整试剂盒。 使用预混液,您只需添加模板和引物,然后,开始 PCR 实验。如果您想进一步减少操作步骤,使用含染料缓冲液的聚合酶允许 PCR 产物直接凝胶上样(注意:确保染料与下游应用兼容)。直接
buffer,摸索镁离子浓度或适当加入 DMSO(小于 0.3%) · 提高退火温度,增加延伸时间(反应条件参照试剂盒说明书) 问题 2:假阳性 现象:空白对照出现条带 可能原因: · 引物设计不适,与目的序列具有同源性 · 试剂污染:水、移液枪等被核酸污染 · 样品间出现交叉污染 解决方法: · 实验仪器高压灭菌 · 实验试剂(酶除外)高压灭菌,离心管枪头一次性使用 · 规范实验操作 · 假阳性可通过巢式 PCR 解决,或者使用特异性较高的试剂盒扩增 问题 3:拖尾、弥散 现象:电泳出现拖尾、涂抹
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