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- 2025年07月09日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
53
- 英文名：
一管式双链 cDNA 合成试剂盒
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
10 次
一管式双链 cDNA 合成试剂盒10 次规格详细介绍：
公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列，5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
以下是一管式双链 cDNA 合成试剂盒10 次规格的相关产品：
酪氨酰氨4985-46-0质量规格：>98%,sigma进分
皂素；茶皂素8047-15-2质量规格：BR,皂素>80%
炔诺酮(标准品)68-22-4质量规格：>97%,标准品
炔诺酮68-22-4质量规格：>97%
可的松(标准品)19515质量规格：HPLC>95%,标准品
己二酸二异丁酯(>99.0%(GC))Diisobutyl Adipate质量规格：>99.0%(GC)
己二酸二丙酯(>99.0%(GC))Dipropyl Adipate质量规格：>99.0%(GC)
壬二酸二甲酯(>98.0%(GC))Dimethyl Azelate质量规格：>98.0%(GC)
己二酸双(2-丁氧乙基)酯(>97.0%(GC))Bis(2-butoxyethyl) Adipate质量规格：>97.0%(GC)
油酸乙酯(>70.0%(GC))Ethyl Oleate质量规格：>70.0%(GC)
依匹斯汀质量规格：美国进口Epinastine
9,13b-脱氢依匹斯汀盐酸盐质量规格：美国进口9,13b-Dehydro Epinastine Hydrochloride
7-氯依匹斯汀盐酸盐质量规格：美国进口7-Chloro Epinastine Hydrochloride
9-氧络依匹斯汀盐酸盐质量规格：美国进口9-Oxo Epinastine Hydrochloride
6β-羟基依普利酮质量规格：美国进口6β-Hydroxy Eplerenone
小鼠DNA(胞嘧啶-5)甲基转移酶3A(DNMT3A)ELISA试剂盒 ，英文名： DNMT3A ELISA Kit
大鼠第八因子相关抗原(FⅧAg)ELISA检测试剂盒RatFactorⅧ-relatedAigen,FⅧAgELISAKit 96T/48T
人DAB2互作蛋白(DAB2IP)免疫试剂盒 Human DAB2IP ELISA Kit
英文名称MouseBonemorphogeneticprotein2ELISAKit小鼠骨成型蛋白质-2(BMP-2)规格：96T/48T
冰冻切片磷脂尼罗红(NileRed)荧光染色试剂盒50次
Ratai-IVIgGaibodyELISA试剂盒大鼠抗IVIgG抗体ELISA试剂盒规格：96T/48T
小鼠维生素B12(VB12)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human squamous cell carcinoma aigen 2 (SCCAg-2) ELISA Kit 人鳞状上皮细胞癌抗原2(SCCAg-2)ELISA试剂盒
HumanOrexinB,OX-BELISAKit 人食欲素/阿立新B(OX-B)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
ChickenL-Phenylalanineammonla-lyase,PALELISA试剂盒鸡L苯氨酸解氨酶(PAL)ELISA试剂盒规格：96T/48T
载玻片细胞MYC蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次
MouseGamma-aminobyricacid,GABAELISAKit小鼠γ氨基(GABA)ELISA试剂盒规格：96T/48T
一管式双链 cDNA 合成试剂盒10 次规格小鼠细胞蛋白(CC16)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠可溶性坏死因子相关凋亡诱导配体(sAIL)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠可溶性血小板内皮细胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠可溶性血管细胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
操作步骤:
1. 一管式双链 cDNA 合成试剂盒10 次规格匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c．细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物完全分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml，室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
实验要点：
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2．在最适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和氯仿的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的（—氯仿—=25:24:1），的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要
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文献和实验M-MLV第一链cDNA合成试剂盒-技术手册一、 试剂盒组成 Components SK2027 SK2028 5×M-MLV Reaction Buffer 100µl
分钟,然后75℃灭活10分钟; 3. 加入等体积酚/氯仿/异戊醇,剧烈振荡后,常温下13000g离心5分钟; 4. 离心后,吸取上清于另一1.5ml eppendof管中,加入等体积氯仿,上下颠倒几次混匀后,常温下13000g离心5分钟; 5. 吸取上清至另一eppendof管,加入1/10V3M NaAc(PH5.2)和2.5V预冷的无水乙醇,混匀,-20℃放置过夜以沉淀双链cDNA
等体积氯仿,上下颠倒几次混匀后,常温下13000g离心5分钟; 5. 吸取上清至另一eppendof管,加入1/10V3M NaAc(PH5.2)和2.5V预冷的无水乙醇,混匀,-20℃放置过夜以沉淀双链cDNA; 6. 第二日,将昨日沉淀物在4℃,13000g离心60分钟以充分沉淀双链cDNA; 7.离心完毕,弃上清,加入1ml 70%乙醇洗涤沉淀,常温下13000g离心5分钟; 8.离心完毕,弃上清,干燥沉淀至无乙醇气味. 注：第3，第4步可以用PCR 纯化试剂盒代替。四
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